Микротехника негіздері (Әдістемелік оқУ ҚҰралы) Алматы
Гельминттерден тұрақты боялған препарат жасау
жүктеу/скачать 2,96 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- 1.6.7 Алдын ала бекітілген тұрақты боялған гельминт препаратын дайындау.
- 1.7 Ұлпаларды гистологиялық препараттар жасауға дайындау
- 1.7.1 Дегидратация
| 1.6.6 Гельминттерден тұрақты боялған препарат жасау:
1) Ірі цестодалардың гермофродитты буындарын суда 1-3 күн ұстап, содан кейін лактат карминге 4-6-12 сағат (0,1-0,3 г карминды 50% 100 мл сүт қышқылына) салады. 2) Дәкемен байланған ыдысты 1 сағ. ағын сумен жуады. 3) Жуылған стробилді керек бөлімдерге бөліп заттық шыныға салады, 6-12 сағат кептіріп бальзамдайды. 1.6.7 Алдын ала бекітілген тұрақты боялған гельминт препаратын дайындау. Бұл әдістеме майда трематодтармен турбеляриаларға арналған: 1) Жаңа алынған гельминттерді 4-12 сағат суда ұстайды (нысан-көлем- байланыс). 2) Гельминттерді төсеніш шыныға қойып, басқа шынымен жауып жіппен байлайды. 3) Препаратты 70% этанолда 1-2 сағ., ал ірі болса 6-12 сағ. бекітеді. 4) Фиксациялау біткен соң гельминтті шешіп, лактат карминмен бояйды. Уақыты көлеміне қарай (30мин. -1сағ.). 5) Бояудың қалдықтарын этанол және хлорлы сутекті қышқылымен өңдейді. б. Дегидратация үшін 80% спирттен бастап әрқайсысында 5-7 мин ұстайды. 7) Ксилолда 2 рет ағартады (1-2 мин. ғана). 8) Бальзамға салу (бекіту). 1.7 Ұлпаларды гистологиялық препараттар жасауға дайындау Парафинге сіңіру және құю. Алдымен зерттеліп жатқан затты бекіткіш қалдығынан тазартып, жақсылап жуу керек. Бұл әдіс зерттеліп жатқан затты, бекіткіш қалдықтарынан толық тазартуды көздейді. Затты бекіту үшін әртүрлі қоюлықтағы ерітінділер қолданылатындықтан, (құрамында хром, формалин, осми қышқылы және басқа) ағза кесінділерін сумен 5-24 сағ. жуу қажет. Содан соң оларды парафинге қатыру үшін сусыздандырып, құрғату керек. 1.7.1 Дегидратация Бұл әдісті жүргізу үшін, кеңірек әрі қақпағы тығыздалып жабылатын стакандарды этикеткалап, оған күштілігі жоғарылай (50°, 60°, 70°, 80°, 90°, 2 өлшем 96° және 100°) түсетін спиртті құю қажет. Пайыздық спиртті алдын ала дайындап алу қажет (7-сурет). 7-сурет. Қақпағы тығыздалып жабылатын стакандар (парафин құюға, дегидратацияға және түссіздендіруге) пайдаланылады. Бір рет қолданған спиртті, бірнеше рет қолданбаған дұрыс. Оларды міндетті түрде ауыстырып тұру қажет. Толық дегидратация үшін, материал жоғарыда көрсетілген спирттердің әрқайсысынан өткізіп, барлығы 12-24 сағат ішінде құрғатылуы қажет. Кейбір ұлпа кесінділердің мөлшеріне қарай дегидратация уақыты: Ұлпа Спиртің күштілігі Уақыт (мин) Паренхиматозды Этил спирті 70° 20 (бауыр,өкпе,бүйрек) Этил спирті 80° 20 ұлпалар,көлемі1х1 Этил спирті 90° 20 Этил спирті 96°бірінші порция 20 Этил спирті 96°екінші порция 20 Абсолютті(изобутил немесе 20 изопропил спирті) 100°бірінші порция 15 Абсолютті (изобутил немесе изопропил спирті) 100°екінші порция 15 Түссіздендіру: Ксилол І бірінші порция 15 Ксилол ІІ екінші порция 15 Парафин сіңдіру: Парафин І бірінші порция 1сағ. Парафин ІІ екінші порция 1сағ. Парафин-воск 1сағ. Бұлшықет ұлпаны Этил спирті7 0° 30мин дегидратация, Этил спирті 80° 30мин көлемі1х1см. Этилспирті 90° 30мин Этил спирті 96°бірінші порция 30мин Этил спирті 96°екінші порция 30мин Абсолютті (изобутил немесе изопропил спирті) 100°бірінші порция 20 мин Абсолютті (изобутил немесе изопропил спирті) 100°екінші порция 20 мин Түссіздендіру: Ксилол І бірінші порция 15 Ксилол ІІ екінші порция 15 Парафин сіңдіру: Парафин І бірінші порция 1сағ. Парафин ІІ екінші порция 1сағ. Парафин-воск 1сағ. Аталық гонадалар - Этил спирті 70° 40мин көлемі1х1см, Этил спирті 80° 40мин эмбриондар көлемі Этил спирті 90° 40мин мм -ден сантиметр- Этил спирті 96°бірінші порция 40мин ге дейін. Этил спирті 96°екінші порция 40 мин Аналық гонадаларға Абсолютті (изобутил немесе -целлоидиндеу әдісі изопропил спирті) 100° бірінші порция 20 мин қолданылады. Абсолютті (изобутил немесе (әдіс21бетте) изопропил спирті) 100° екінші порция 20мин Түссіздендіру: Ксилол1 15мин Ксилол ІІ екінші порция 15 мин Парафин сіңдіру: Парафин І 1сағ. Парафин ІІ екінші порция Парафин- 1сағ. воск 1сағ. Желбезектер,көлемі Этил спирті 70° 30мин 1х1см Этил спирті 80° 30мин Этил спирті 90° 30мин Этил спирті 96°бірінші порция 30мин Этил спирті 96°екінші порция 30 мин Абсолютті (изобутил немесе изопропил спирті) 100° бірінші порция 20 мин Абсолютті (изобутил немесе изопропил спирті) 100° екінші порция 20 мин Түссіздендіру: Ксилол І бірінші порция 15мин Ксилол ІІ екінші порция 15 мин Парафин сіңдіру: Парафин І бірінші порция 1сағ. Парафин ІІ екінші порция 1сағ. Парафин-воск 1сағ. жүктеу/скачать 2,96 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|