Учет результатов. Чувствительные к препарату культуры начинают расти
лишь на некотором расстоянии от дорожки, нечувствительные растут до
самого края.
Методика работы с оптическим стандартом мутности
Для определения количества микробных тел в 1 мл используют оптические
стандарты мутности. Их изготовляет Государственный НИИ стандартизации и
контроля медицинских биологических препаратов МЗ СССР им. Л. А.
Тарасевича (ГИСК). Существуют следующие стандарты мутности:
0,5 млрд. микробов в 1 мл - № 5 (5 ед. мутности)
0,9 " " " 1 " -
№ 9 (9 " " )
1 " " " 1 " -
№ 10 (10 " " )
1,1 " " " 1 " -
№ 11 (11 " " )
Перед определением количества микробных тел в 1 мл сначала получают
микробную взвесь. Для этого в пробирку с выросшей на скошенном агаре
культурой наливают 5-6 мл изотонического раствора натрия хлорида и, вращая
пробирку между ладонями, смывают культуру с поверхности среды. Часть
полученной взвеси переносят стерильной пипеткой в стерильную пробирку,
толщина стенки и диаметр которой соответствует пробирке оптического
стандарта. Затем сравнивают густоту полученной микробной взвеси с одним
из
оптических стандартов мутности. В случае необходимости микробную
взвесь разводят, прибавляя изотонический раствор натрия хлорида до нужной
мутности. Если мутность полученной микробной взвеси совпадает с
мутностью оптического стандарта, то количество микробных тел в ней
соответствует номеру стандарта.
Контрольные вопросы
1. Что является критерием чувствительности микроорганизмов к
антибиотикам при лабораторном исследовании?
2
. Когда следует выделять культуры микроорганизмов из организма
больных для определения чувствительности к антибиотикам?
3. Какие существуют
методы определения чувствительности
микроорганизмов к антибиотикам?
Задание
1. Возьмите у преподавателя флакон с пенициллином, содержащий в 1 мл
300000 ЕД, и приготовьте основной раствор антибиотика в 32 ЕД/мл.
2. Определите чувствительность микроорганизмов к антибиотикам методом
бумажных дисков, учтите результаты и дайте ответ.
3. Определите чувствительность выделенной культуры стафилококков к
пенициллину методом серийных разведений в жидкой питательной среде,
учтите результаты и дайте ответ.
Химиопрофилактика и химиотерапия
В медицинской практике для предупреждения и лечения инфекционных
болезней давно применяли химические вещества. Индейцы для борьбы с
малярией употребляли кору хинного дерева, а в
Европе уже в XVI веке
применяли ртуть для лечения сифилиса. Химиотерапия - это применение для
лечения заболевания химических веществ, обладающих специфическим
действием на клетки возбудителя заболевания и не повреждающих клетки и
ткани человека. Основы научной химиотерапии были сформулированы П.
Эрлихом. Он получил первые химиотерапевтические препараты - сальварсан
и неосальварсан, содержащие мышьяк. В течение нескольких десятилетий их
использовали при лечении сифилиса.
Химиопрофилактика - применение химических препаратов для
предупреждения инфекционных заболеваний.
В основе действия химиотерапевтических препаратов на клетки
возбудителей заболеваний лежит сходство их молекул с рядом веществ,
необходимых для метаболизма микроорганизмов: аминокислот, витаминов,
ферментов и т. д. Препарат всасывается бактериальной клеткой вместо
необходимого ей компонента и начинает свое разрушительное действие. В
результате нарушения важнейших систем клетки она погибает (бактерицидное
действие), а если нарушения слабые, то отмечается бактериостатическое
действие.
Важным этапом в
развитии химиотерапии явилось создание
сульфаниламидных препаратов (стрептоцид, норсульфазол, сульфадимезин и
др.). Они дают хороший лечебный эффект при ангине, гнойно-воспалительных
инфекциях, кишечных заболеваниях. В борьбе с туберкулезом помогли
синтетические
химиотерапевтические
препараты
ПАСК
(парааминосалициловая кислота), тибон, фтивазид и др. В настоящее время
разрабатывают
и
применяют
химические
противовирусные
и
противоопухолевые препараты. Большое значение имеют антибиотики -
химиотерапевтические препараты биологического происхождения.
Однако химиотерапевтические препараты обладают рядом отрицательных
свойств. Воздействуя на определенную цепь обмена веществ, они могут
наряду с
клеткой возбудителя поражать и клетки человека. В результате
лечения химиопрепаратами в организме человека накапливается большое
количество промежуточных продуктов, обладающих побочным действием.
Описаны случаи изменения состава крови, мутации клеток и другие
функциональные нарушения организма человека в результате применения
химиотерапевтических препаратов.