ВВЕДЕНИЕ В КУЛЬТУРУ IN VITRO ИСЧЕЗАЮЩИХ ВИДОВ БЕРЕЗ Құттығұлова М.Б.
Казахский Национальный Университет им. аль-Фараби
РГП «Институт общей генетики и цитологии» КН МОН РК
madiin-k@mail.ru
Основной вид лесных пород в лесах Республики Казахстан составляет — береза. В целях
сохранения и поддержания жизнедеятельности, с экологической точки зрения в биотехнологии
используют метод микроклонального размножения в культуре in vitro. Для введения в культуру in vitro использовали 7 видов березы (береза Тянь-Шаньская,
Туркестанская, Максимовича, бумажная, плосколистная, ильмолистная, мелколистная). В качестве
эксплантов для получения каллусной культуры in vitro использовали части проростков и сегменты
молодых листьев берез после их ступенчатой стерилизации. Для этого растительный материал после
промывания в мыльном растворе, затем после нескольких раз полоскании водопроводной водой,
последовательно обрабатывали перекисью водорода в течение 8 минут, далее экспланты переложили
в чашки Петри с фильтровальной бумагой с последующим введением в культуру.
В качестве основной среды для культивирования использовали основу неорганических солей
WPM, с внесением цитокинина: 6- бензиламипурина (БАП) и ауксинов: 2,4 –
дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4Д) и индолилмасляную кислоты (ИМК). Для предупреждения
развития микрофлоры в питательные среды добавляли антибиотики (цефотаксим). В качестве
контроля использовали обычную среду WPM без добавления каких-либо гормонов, pH среды до
выхода доводили до 5,6-5,8. Число повторностей в каждом варианте составил 15. Цикл
культивирования не превышал 20 дней, некротизированные, фенольные варианты удалялись. В конце
опыта проводили ростовую оценку.
Результаты опытов по определению ростовых показателей в каллусной культуре показали
влияние гормонального состава на прирост культуры берез в целом. Достоверное превышение
прироста биомассы отмечается в варианте опыта с внесением в среду ауксина 1 мг/л 2,4 Д, что
значительно стимулировало прирост в массе во всех эксплантах. В других вариантах опыта ростовые
показатели достоверно не отличались. Отмечено, что в культурах, вводимых в среду с 1,5 мг/л 6-
БАП+ 1,0 мг/л аскорбиновая кислота существенно влияет на индукцию каллусогенеза. При этом у
65% побегов отмечалось формирование корней. Побеги далее микрочеренковали для получения
укоренённых клонов в целях дальнейшей высадки в открытый грунт.
В результате проведенной работы была пополнена коллекция берез in vitro, которая может
служить для сохранения генетического банка растительных ресурсов.
Научные руководители: к.б.н., и.о. доцента Джангалина Э.Д., к.б.н. Шаденова Э.А.