Фармацевтическая

68
7) заполняют кювету исследуемым раствором до метки (рис. 27); 
Рис. 27.
Заполнение кюветы исследуемым раствором перед анализом 
8) удаляют со стенок кюветы мелкие капельки раствора, потожировые 
следы пальцев исследователя (рис. 28); 
Рис. 28.
Удаление безворсовой салфеткой мешающих следов 
9) вторую кювету заполняют растворителем, как правило, это вода очи-
щенная (рис. 29); 
Рис. 29.
Заполнение кюветы сравнения растворителем 
68

69
10) удаление жидкости и потожировых следов со стенок кюветы (рис. 30); 
Рис. 30.
Удаление мешающих следов со стенок кюветы сравнения безворсовой салфеткой 
11) выбирают необходимый цветной светофильтр по роду измерений для 
каждого конкретного химического соединения (рис. 31); 
Рис. 31.
Установка тумблера на нужную длину волны в соответствии с длиной волны 
анализируемого вещества, при которой устанавливается максимальная 
оптическая плотность раствора анализируемого вещества 
12) установка минимальной чувствительности фотоэлектроколориметра 
(рис. 32); 
Рис. 32.
Установка минимальной чувствительности фотоэлектроколориметра 
по двум тумблерам: «чувствительность» на единицу слева 
и «установка „100“» в крайне левое положение (в положение «грубо») 
69

70
13) помещают кювету в кюветодержатель с раствором сравнения или с 
водой очищенной напротив светового пучка (рис. 33); 
Рис. 33.
Раствор сравнения или вода очищенная в кювете помещается 
напротив светового потока 
14) кювету с анализируемым раствором помещают во второе отделение 
кюветодержателя (рис. 34); 
Рис. 34. 
Кювета с анализируемым раствором помещена 
в свободную ячейку кюветодержателя 
15) закрывают крышку кюветного отделения (рис. 35); 
Рис. 35. 
Закрывается крышка кюветного отделения фотоэлектроколориметра 
70

71
16) ручка фотоэлектроколориметра находится в положении 1 (рис. 36); 
Рис. 36. 
Положение 1 ручки прибора перед началом испытания 
17) тумблерами «чувствительность» и «установка „100“» грубо и точно 
устанавливают отчёт 0 по шкале оптической плотности (рис. 37); 
Рис. 37.
Установка нулевого значения оптической плотности 
18) постановка нулевого значения оптической плотности относительно 
раствора сравнения (рис. 38); 
Рис. 38.
Нулевое значение оптической плотности относительно раствора сравнения 
71

72
19) замена кюветы с раствором сравнения на анализируемый раствор 
(рис. 39). 
Рис. 39.
Снятие показания оптической плотности с анализируемого раствора 
Для точности проводимых измерений снимают показания оптической 
плотности с анализируемого раствора не менее трех раз и рассчитывают сред-
нее значение показателя оптической плотности. 
Правила работы на фотоэлектроколориметре ФЭК-56М 
Ход
 
действий
: 
1) прибор включают в сеть с напряжением 220 В через стабилизатор на-
пряжения за 30 мин до начала проведения анализа; 
2) устанавливают «электрический ноль» прибора. Для этого с помощью 
рукоятки световые потоки перекрывают шторкой. Рукояткой стрелку микроам-
перметра на ноль. При этом чувствительность прибора должна быть макси-
мальной, для чего поворачивают рукоятку чувствительности против часовой 
стрелки до упора; 
3) работу проводят на выбранном светофильтре, в подобранных кюветах 
и при открытой шторке; 
4) в левый кюветодержатель на всё время измерений помещают кювету с 
растворителем; 
5) в правый кюветодержатель устанавливают две кюветы: с исследуемым 
раствором и с растворителем. Сначала по пути правого светопотока рукояткой 
помещают кювету с раствором. Вследствие поглощения света раствором на 
правый фотоэлемент будет падать световой поток меньшей интенсивности, чем 
на левый фотоэлемент, и стрелка микроамперментра будет отклоняться на ноль 
прямо пропорционально поглощению света (концентрации окрашенного рас-
твора); 
6) вращая барабан левой диафрагмы, устанавливают интенсивность обоих 
световых потоков. При этом стрелку микроамперметра устанавливают на ноль; 
72

73
7) затем по ходу правого светового потока рукояткой заменяют кювету с 
анализируемым раствором на кювету с растворителем. При этом фотометриче-
ское равновесие опять нарушается, так как растворитель прозрачнее, и интен-
сивность светового потока увеличивается. Стрелка микроамперметра снова ус-
танавливается на ноль; 
8) вращая правый барабан, уменьшают интенсивность правого светового 
потока до установления стрелки микроамперметра на ноль. Показания на крас-
ной шкале правого барабана будут соответствовать поглощению света раство-
ром; 
9) показания на чёрной шкале правого барабана будут соответствовать 
коэффициенту пропускания света раствором в процентах. 
Правила работы на фотометре КФК-3-01-«ЗОМС» 
Ход
 
анализа
: 
1) тумблер «Сеть» устанавливают в выключенном положении. Закрыть 
крышку кюветного отделения; 
2) подсоединить фотометр к сети напряжения 220 В. Включить тумблер 
«Сеть»; 
3) подготовка к работе фотометра осуществялется автоматически: 
а) на дисплее отображается символ предприятия-изготовителя «ОАОГ 
«ЗОМС» и сообщение «прогрев прибора» с показаниями таймера; 
б) по истечении 2,5 мин на дисплее отображается надпись шифр фото-
метра «КФК-3-01»; 
в) по истечении 5 мин автоматически учитывается «нулевой отчёт», 
включается источник излучения; 
г) на дисплее отображается значение длины волны в нм, надпись «про-
грев лампы» и показания таймера; 
д) по истечении 10 мин фотометр выдаёт звуковой сигнал о готовности 
прибора к работе и на дисплее отображается надпись «готов к работе. Введите 
режим». Фотометр готов к работе; 
4) ручкой установки длин волн устанавливают необходимую длину 
волны; 
5) устанавливают в кюветное отделение кюветы с «холостой пробой» и 
анализируемым раствором; 
6) ручку перемещения кювет устанавливают в крайне левое положение, 
при этом в световой пучок вводится кювета с «холостой пробой». Закрывают 
крышку кюветного отделения; 
7) нажатием клавиши прибора режима «
D
» выбирают «А — оптическая 
плотность»; 
8) нажимают клавишу «#». На дисплее должно отобразиться «градуиров-
ка». Через 3–5 с данная надпись исчезнет и на её месте отобразится надпись 
«измерение», «А = 0,000 + 0,002». Если отобразится значение «0,000» отобра-
зилось с большим отклонением, повторно нажать клавишу «#»; 
73

74
9) ручку перемещения кювет устанавливают вправо до упора. При этом 
под световой пучок вводится кювета с анализируемым раствором. На дисплее 
отображается значение оптической плотности исследуемого раствора; 
10) операции по пунктам 5–9 повторить 3 раза. Значение оптических 
плотностей исследуемого раствора определяется как среднее арифметическое 
из трёх отчётов по измерениям; 
11) отключение прибора производится нажатием клавишы «
D
», переклю-
чением трумблера «Сеть» в выключенное положение; 
12) отсоединение прибора от сети 220 В. 
Правила подбора кювет для фотоэлектроколориметрии 
1) Предварительный подбор кювет проводится визуально, соответственно 
интенсивности окраски раствора; 
2) если анализируемый раствор тёмный, то следует воспользоваться кю-
ветами с малой толщиной оптического слоя — 1–5 мм; 
3) в случае анализа слабоокрашенного раствора рекомендуется работать с 
кюветами с большой толщиной оптического слоя — 20–50 мм; 
4) кюветы подбирают так, чтобы измеренная оптическая плотность лежа-
ла в пределах 0,3–0,6. Если величина измеренной оптической плотности больше 
0,6, то берут кювету с меньшей рабочей длиной; 
5) если измеренная оптическая плотность будет меньше 0,2, то берут кю-
вету с большей рабочей длиной (табл. 6). 
Таблица
 6 
Параметры рабочих светофильтров 
Номер 
светофильтра 
Длина волны максимума пропускания, нм 
Свет 
1 
315
±
5 
Ультрафиолет 
2 
364
±
5 
Ультрафиолет 
3 
400
±
5 
Сине-фиолетовый 
4 
440
±
5 
Синий 
5 
490
±
10 
Сине-зелёный 
6 
540
±
10 
Жёлто-зелёный 
7 
572
±
10 
Оранжевый 
8 
593
±
10 
Красный 
9 
630
±
10 
Красный 
1.3.2. ИДЕНТИФИКАЦИЯ МЕТОДАМИ 
ФОТОЭЛЕКТРОКОЛОРИМЕТРИИ И ФОТОМЕТРИИ 
Молекулы различных веществ характеризуются своей системой энерге-
тических уровней, поэтому спектры поглощения их будут различаться по числу 
полос поглощения, их положению в шкале длин волн и интенсивности. Этот 
74

75
факт используют для идентификации и проведения качественного анализа ве-
ществ, используя для этого значения λ
max
и ε
max
, которые зависят от природы 
вещества. Ультрафиолетовые спектры поглощения обычно имеют две-три и бо-
лее полос поглощения. Для идентификации исследуемого вещества записывают 
его спектр поглощения в различных растворителях и сравнивают полученные 
данные с соответствующими спектрами исходных веществ известного состава. 
Если спектры поглощения исследуемого вещества в разных растворителях сов-
падают со спектром известного вещества, то делают заключение об идентично-
сти химического состава этих соединений. При идентификации вещества сле-
дует также обратить внимание на интенсивность поглощения. Очень многие 
органические вещества имеют полосы поглощения, максимумы которых распо-
ложены при одинаковой длине волны, но интенсивности их различны. Напри-
мер, в спектре фенола наблюдается полоса поглощения при λ = 255 нм, для ко-
торой ε = 1450. При той же длине волны ацетон имеет полосу поглощения, для 
которой ε = 17. Появление полос поглощения в электронных спектрах обуслов-
лено переходами электронов в молекуле вещества между электронными уров-
нями из основного — в возбужденное состояние.
Из изложенного следует, что анализ спектров поглощения веществ в ви-
димой и УФ областях позволяет сделать заключение относительно их строения. 
Однако наиболее полная и однозначная информация о строении соединений 
может быть получена путем исследования их ИК-спектров. 
При идентификации вещества в растворе методом фотоэлектроколори-
метрии используют различные способы: 
1) определение оптической плотности исследуемого раствора при опре-
делённой длине волны; 
2) по величине удельного показателя поглощения, рассчитанного по оп-
тической плотности исследуемого раствора при определённой длине волны; 
3) по отношению величин оптических плотностей при различных длинах 
волн. 
Пример 40.
Рассчитайте удельный показатель поглощения раствора ри-
бофлавина в максимуме длины волны 445 нм, если оптическая плотность рас-
твора рибофлавина с концентрацией 0,00001 г/мл равна 0,328 при толщине по-
глощающего слоя в кювете равной 10 мм. 
Используется формула 
1%
иссл.
1 см
,

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: