Состав производственных сред для микробиологического синтеза тилозина, %

99 
Компонент среды 
Среда 1 
Среда 2 
Среда 3 
Хлорид натрия 0,2 0,2 0,1 
Экстракт кукурузный 1,0 
– 
– 
Хлорид аммония – 0,7 – 
K
2
HPO
4
– 
0,03 
– 
Сульфат магния – 0,5 – 
(NH
4
)
2
HPO
4
– 
– 
0,4 
Мел 0,5 
0,5 
0,2 
Масло подсолнечное 3,0 
1,5 
– 
Масло соевое – – 
3,0 
Ферментацию проводят в условиях асептики при температуре 27–
29°С и рН среды 7,0–7,2. Интенсивность аэрации 1,5–0,9 об./(об. · мин). 
Наиболее интенсивное потребление кислорода наблюдается в трофофа-
зе (вторые сутки), затем оно снижается. Эффективный синтез тилозина 
происходит при концентрации растворенного кислорода, составляю-
щей не менее 30% от насыщения. Трофофаза длится 2–3 суток (анти-
биотик практически не образуется). Общая продолжительность процес-
са биосинтеза – до 220 ч (характерно повышение рН к концу процесса 
до 7,8–8,0). В настоящее время тилозин выделяют из нативного раство-
ра двумя методами: адсорбционным (сорбция на ионообменной смоле) 
и экстракционным. Большое распространение получил экстракцион-
ный метод с использованием в качестве экстрагентов полярных раство-
рителей (бутилацетат, этилацетат и др.). 
К концу биосинтеза мицелий актиномицета частично лизирует 
и большая часть тилозина сосредотачивается в культуральной среде (вне 
мицелиальной структуры), что упрощает выделение антибиотика. 
Обработку КЖ с целью полного вывода антибиотика из клетки 
и очистки его от примесей осуществляют различными методами (фло-
куляция, коагуляция, термический нагрев, изменение рН и др.). Ши-
рокое распространение получил способ, основанный на введении 
в КЖ сульфата цинка (0,5%), вызывающего частичный лизис клеток 
и коагуляцию коллоидных и взвешенных веществ. Для удаления 
ионов Ca
2+
, содержащихся в КЖ, вводят щавелевую кислоту (около 
0,5%) до рН 3,9–4,0. Фильтрационные свойства КЖ улучшаются при 
добавлении перлита (1–2% от объема КЖ). Фильтрацию осуществля-
ют на фильтре-прессе ФПАКМ. Количество влажного осадка состав-
ляет около 4% от объема КЖ. Осадок высушивают (после гранулиро-
вания) и используют как кормовой препарат фрадизин. 
Технологический процесс экстракционного выделения тилозина 
бутилацетатом состоит из следующих стадий (рис. 9.2): 

100 
– обработка КЖ щавелевой кислотой (0,5%) и сульфатом цинка 
(0,5%) при температуре 60°С; 
– фильтрация КЖ на фильтре-прессе; 
– экстракция тилозина бутилацетатом в соотношении нативный 
раствор : бутилацетат = 2,7 : 1 при рН 8,8–8,9 (25%-ный раствор 
NaOH); 
– реэкстракция тилозина водным раствором винной кислоты (2%) 
при соотношении бутилацетатный экстракт : раствор винной кисло-
ты = (5–6) : 1 с получением водорастворимой соли – тилозин-тартрата; 
– нейтрализация экстракта 10%-ным раствором NaOH (или 
NH
4
OH) до рН 4,5 и очитска раствора на ионообменной смоле SBW 
(или AB-17) в OH
–
-форме; 
– концентрирование экстракта в роторно-пленочном испарителе 
в 2–3 раза; 
– сушка концентрата распылением в мягких условиях (температу-
ра теплоносителя на входе в сушилку 120–160°С). 

101 
Рис. 9.2. Схема экстракционного выделения тилозина из культуральной жидкости:
1
– коагулятор; 2 – фильтр-пресс ФПАКМ; 3 – сборник фильтрата; 4, 7 – смеситель трубчатый ; 5, 8 – экстрактор-сепаратор 
«Россия»; 6 – сборник экстракта; 9 – сборник реэкстракта; 10 – ионообменная колонна; 11 – промежуточный сборник; 
12
– роторный испаритель; 13 – сборник концентрата
1
2
3
4
5 
6
7
8
9
10
11
12
13

102 

жүктеу/скачать 1,87 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: