Колориметриялық (фотометрия әдісі) - әдістің негізінде көзбен немесе фотоэлектрліқ колориметр көмегімен, арнайы реактивпен әрекеттесіп, боялған түзілген өнімнің мөлшерін анықтау.
Спектрофотометриялық әдіс.
Әдіс - ферменттің активті топтарынының, субстраттардың, немесе реакция өнімдерінің спектрдің белгілі бір толқын ұзындығында сәулені сіңіруге негізделген.
Спектр анықтау үшін арнайы құрылғыларды қолданады – спектрофотометрлер, фотометриялық абсорбциометрлерді, т.б.
Бұл әдіс: 1) тез; 2) сезімтал; 3) фермент пен реактивтердің аз шығыңымен сипатталады; 4) реакция барысын қадағалауға мүмкіндік туғызады.
20.09.23
Кейде ферменттің активтілігін сіңірген сәуле арқылы емес, флюоресценцияны – өлшеу арқылы анықтауға болады (флуориметриялық әдіс).
Кейде ферменттің активтілігін сіңірген сәуле арқылы емес, флюоресценцияны – өлшеу арқылы анықтауға болады (флуориметриялық әдіс).
Флуоресценцияны анықтау – сезімталдығы бойынша спектрофотометриялық әдістермен салыстырғанда жоғары болады.
Кейбір коферменттер мен субстраттар күшті флюоресценцияға ие; мысалы, NAD+ пен NADP+ тотықсызданған күйде қатты флуоресценцияланады, ал тотыққан күйінде – флуоресценцияламайды.
Сондықтан, флуорометрияны никотинамидті және флавиндік ферменттердің кинетикасы мен әсер ету механизмдерін зерттеу үшін қолдануға болады.
20.09.23
Ферменттердің активтілігін биолюминесценттік әдіспен анықтауға болады.
Ферменттердің активтілігін биолюминесценттік әдіспен анықтауға болады.
Биолюминесценция – организмдердің тіршілікпен байланысты сәулелену процессі, жылу бөлінбейді. Әдістің негізінде люциферин (S) –люцифераза (E) әрекеттесуінің нәтижесінде болатын күшті сәулелену.
Бұл – өнімнің әр молекуласы электронды-қозған күйінде түзілуімен түсіндіріледі.
20.09.23
20.09.23
Фотопротеинді биолюминесценция (В) түрі шамамен 30 теңіз Coelenterata (кишечнополостные) түрінде кездеседі.
