Лекция № Ферменттердің белсенділігінің көрсеткіштері, өлшембірлігі, белсенділікті анықтау әдістері



бет5/7
Дата20.09.2023
өлшемі0,75 Mb.
#109262
түріЛекция
1   2   3   4   5   6   7
Байланысты:
Лекция № 3. Ферменттердің белсенділігінің көрсеткіштері, өлшембірлігі, белсенділікті анықтау әдістері.

Электродты әдістер:

  • Егер реакция барысында қышқыл түзілсе, шыны электродты қолдануға болады.
  • Ең қарапайым әдіс – рН-тың реакция барысында өзгеруін бақылауға болады. Оның өзгеруі:
  • Фермент белсенділігі өзгеруі мүмкін;
  • Реакция жылдамдығы тек рН-тың өзгеруіне тәуелді емес, сонымен қатар, ерітіндінің буферлық сыйымдылығына да тәуелді, себебі белоктарда ол жоғары болады.
  • Тазаланбаған ферменттерде көп мөлшерде белсенді емес белоктар болады. Тазалау барысында олар алынады және буферлық сыйымдылығы өзгереді.
  • 20.09.23

Тиімді әдістің бірі – үздіксіс титрлеу.

  • Тиімді әдістің бірі – үздіксіс титрлеу.
  • Бұл жағдайда жиі сілті қосып, рН денгейін тұрақты сақтауға болады. Буфердың мөлшері әдістің туралығына әсер етеді: егер, буфер аз болса - рНсоnst сақтау қиын, егер буфер көп болса – әдістің сезімталдығы азаяды. Қазір ыңғайлы автоматты құрылғылар бар (рН-статтар) – олар тұрақты рН мәнін ұстап тұрады және реактив мөлшерінің уақыт аралығында өзгеруін қисық арқылы сызып отырады.
  • 20.09.23

Для определения ферментативной активности используют следующие методы: 1. Химический метод – количественное определение субстрата или продуктов с помощью химических реагентов (О-гликозилгидролазы – по образованию восстанавливающих сахаров). 2. Спектрофотометрический метод – измерение скорости ферментативной реакции по изменению поглощения субстрата при характеристической длине волны (лиазы – по образованию двойной связи). 3. Манометрический метод – определение количества газа, выделяющегося в процессе реакции (оксидазы – по поглощению О2, декарбоксилазы – по выделению СО2). 4. Поляриметрический метод – фиксируется изменение оптического вращения (β-фруктофуранозидаза). 5. Хроматографический – количественное определение субстрата или продуктов с помощью различных видов хроматографии: бумажной (анализ сахаров), тонкослойной (гликозидов со сложными агликонами), ВЭЖХ (аминокислотный анализ и др.).

  • Для определения ферментативной активности используют следующие методы: 1. Химический метод – количественное определение субстрата или продуктов с помощью химических реагентов (О-гликозилгидролазы – по образованию восстанавливающих сахаров). 2. Спектрофотометрический метод – измерение скорости ферментативной реакции по изменению поглощения субстрата при характеристической длине волны (лиазы – по образованию двойной связи). 3. Манометрический метод – определение количества газа, выделяющегося в процессе реакции (оксидазы – по поглощению О2, декарбоксилазы – по выделению СО2). 4. Поляриметрический метод – фиксируется изменение оптического вращения (β-фруктофуранозидаза). 5. Хроматографический – количественное определение субстрата или продуктов с помощью различных видов хроматографии: бумажной (анализ сахаров), тонкослойной (гликозидов со сложными агликонами), ВЭЖХ (аминокислотный анализ и др.).
  • 20.09.23


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет