|
|
| бет | 6/7 | | Дата | 20.09.2023 | | өлшемі | 0,75 Mb. | | #109262 | | түрі | Лекция |
| Байланысты: Лекция № 3. Ферменттердің белсенділігінің көрсеткіштері, өлшембірлігі, белсенділікті анықтау әдістері. - Белокты (ферментті) гомогенді түрінде алу – қиын, себебі басқа қосылыстардан арылмаған;
- Таза ферментті алу қиын, себебі: денатурацияға ұшырайды, лабильді.
- Ферментті бөліп алуда үш негізгі проблема бар:
- 1. бастапқы материал ұқсас түрлі қосылыстардан тұрады;
- 2. биологиялық материалмен жұмыс істегенде аз материал болады, сондықтан бөліп алу әдісі сезімтал болуы тиіс;
- 3. белоктардың тұрақсыздығы.
Клеткаларды бұзу және белоктардың экстракциясы - Клетканы бұзу әдістері – осмостық шок, кварц құмымен тканьдерді езу, гомогенизатор көмегімен:
Ультрадыбыстық гомогенизатор (а), магнитті гомогенизатор (б) Ферменттерді тазалау алдында концентрлейді: - Ферменттерді тазалау алдында концентрлейді:
- а) центрифугалау, аз көлемде еріту;
- б) ионалмастырғыш бағанаға адсорбциялау және элюция;
- в) ультрафильтрация.
- Диализ – төменмолекулалық қосылыстардан арылту;
Жылулық денатурация - Егер белок температураға тұрақты болса, жылулық денатурацияға ұшыратады, нәтижесінде – термотұрақтылығы төмен белоктар денатурацияға ұшырайды.
- Тұнбаға түсіру.
- Центрифугалау, фильтрация.
Гель-фильтрация Адсорбция - бағаналы хроматография,
- ионалмастырғыш шайырлар,
- сұйықтық хроматография.
Достарыңызбен бөлісу: |
|
|
