Люциферазды реакцияның өнімі – сәуле, ал ол - заманауи электрон-оптикалық техникамен өлшенеді;
Биолюминесценттік реакциялар – сезімтал; ATP пен NADH-тың концентрациясы - 10-17 және 10-19 моль/л, сәйкесінше.
Биолюминесценттік әдістің NADH анализінің сезімталдығы 25000 есе спектрофотометриядан жоғары.
Сәулетүзетін ферменттік реакциялар әдістің ерекшелігін анықтайды.
Барлық ферменттердің 20% - ATP- пен NAD(P)-тәуелді. Сондықтан, бұл әдіс түрлі метаболизм процесстерінің метаболиттерінің және ферменттердің концентрациясын анықтауға мүмкіндік береді.
Бұл әдіс: тез, жоғары сезімтал; аз реактив пен биологиялық материал жұмсалады.
20.09.23
Манометрия әдісі.
Манометрия әдісі.
Бұл әдіс – зерттеу реакциясының бір компоненті газды күйде болған жағдайда, ферменттің активтілігін анықтау үшін қолдануға болады.
Ондай реакцияларға, оттектің және көмірқышқыл газының бөлінуімен немесе байластырылуымен жүретін тотығу және декарбоксилдену реакциялары жатады. Реакция барысын арнайы құрылғымен - Варбург манометрлік аппараттарда қадағалайды.
Ферменты – это биологические катализаторы белковой природы, которые образуются в живых клетках и обладают способностью активировать различные химические соединения. Характеристикой активности ферментов является скорость, с которой они катализируют ту или иную реакцию. Она измеряется скоростью превращения субстрата или скоростью накопления продуктов реакции. Измерять нужно начальную скорость превращения, а не количество субстрата, превращенного за определенный отрезок времени. Комиссия по ферментам Международного биохимического союза дает понятие о стандартной единице активности. Единица активности (Е) – это количество фермента, которое катализирует превращение одного микромоля субстрата в мин при стандартных условиях (в оптимуме рН, при избытке субстрата, температуре 37 или 20º С).
Ферменты – это биологические катализаторы белковой природы, которые образуются в живых клетках и обладают способностью активировать различные химические соединения. Характеристикой активности ферментов является скорость, с которой они катализируют ту или иную реакцию. Она измеряется скоростью превращения субстрата или скоростью накопления продуктов реакции. Измерять нужно начальную скорость превращения, а не количество субстрата, превращенного за определенный отрезок времени. Комиссия по ферментам Международного биохимического союза дает понятие о стандартной единице активности. Единица активности (Е) – это количество фермента, которое катализирует превращение одного микромоля субстрата в мин при стандартных условиях (в оптимуме рН, при избытке субстрата, температуре 37 или 20º С).
