Микроскопия в темном поле.
В темнопольном микроскопе только свет,
который дает дифракцию структур в препарате, достигает объектива. Про
исходит это
благодаря наличию в микроскопе специального конденсора,
который освещает препарат строго косым светом; лучи от осветителя на
правляются сбоку. Таким образом, поле выглядит темным, а мелкие части
цы в препарате отражают свет, который далее попадает в объектив. Разре
шение этого микроскопа не может быть лучше, чем у светлопольного мик
роскопа, так как используется такая же длина волны. Но здесь достигается
больший контраст. Он используется для изучения живых объектов, автора
диографических объектов, например зерен серебра, которые выглядят свет
лыми на темном поле. В
клинике его применяют для изучения кристаллов в
моче (мочевая кислота, оксалаты), для демонстрации спирохет, в частности
treponema pallidum, вызывающей сифилис, и др.
Интерференционная микроскопия
. Разновидностями фазово-контрастного
микроскопа являются и н т е р ф е р е н ц и о н н ы й м и к р о с к о п , который
предназначен для количественного определения массы ткани, и д и ф ф е
р е н ц и а л ь н ы й и н т е р ф е р е н ц и о н н ы й м и к р о с к о п (с особой оп
тикой), который специально используют для изучения рельефа поверхности
клеток и других биологических объектов.
В интерференционном микроскопе пучок света от осветителя разделяет
ся на два потока: один проходит через объект и изменяет по фазе колеба
ния, второй идет, минуя объект. В
призмах объектива оба пучка соединяют
ся и интерферируют между собой. В результате строится изображение, в ко
тором участки микрообъекта разной толщины и плотности различаются по
степени контрастности. Проведя количественную оценку изменений, опре
деляют концентрацию и массу сухого вещества.
Фазово-контрастный и интерференционный микроскопы позволяют изу
чать живые клетки. В них используется эффект интерференции, возникаю
щий при комбинации двух наборов волн, который создает изображение
микроструктур. Преимуществом фазово-контрастной, интерференционной
и темнопольной микроскопии является возможность наблюдать клетки в
процессе движения и митоза. При этом регистрация движения клеток мо
жет производиться с
помощью цейтраферной (покадровой) микрокино
съемки.
Поляризационная микроскопия.
Поляризационный микроскоп является
модификацией светового микроскопа, в котором установлены два поляриза
ционных фильтра — первый (поляризатор) между пучком света и объектом,
а второй (анализатор) между линзой объектива и глазом. Через первый
фильтр свет проходит только в одном направлении, второй фильтр имеет
главную ось, которая располагается перпендикулярно первому фильтру, и
он не пропускает свет. Получается эффект темного поля. Оба фильтра могут
вращаться, изменяя направление пучка света. Если
анализатор повернуть на
90° по отношению к поляризатору, то свет через них проходить не будет.
Структуры, содержащие продольно ориентированные молекулы (коллаген,
микротрубочки, микрофиламенты), и кристаллические структуры при изме
нении оси вращения проявляются как светящиеся. Способность кристаллов
или паракристаллических образований к раздвоению световой волны на
обыкновенную и перпендикулярную к ней называется двойным лучепре
ломлением. Такой способностью обладают фибриллы поперечнополосатых
мышц.
14