Литература для студентов Учебная литература для студентов медицинских вузов и медицинских


Фракционирование клеточного содержимого



Pdf көрінісі
бет17/620
Дата15.12.2023
өлшемі31,79 Mb.
#138676
түріЛитература
1   ...   13   14   15   16   17   18   19   20   ...   620
Байланысты:
Гистология Афанасьев 2004

Фракционирование клеточного содержимого
Фракционировать (т. е. разделять и выделять) структуры и макромолеку­
лы клеток можно различными методами — ультрацентрифугированием, 
хроматографией, электрофорезом. Подробнее эти методы описаны в учеб­
никах биохимии.
Улътрацентрифугирование.
С помощью этого метода клетки можно разде­
лить на органеллы и макромолекулы. Вначале разрушают клетки осмотиче­
ским шоком, ультразвуком или механическим воздействием. При этом мем­
браны (плазмолемма, эндоплазматический ретикулум) распадаются на фраг­
менты, из которых формируются мельчайшие пузырьки, а ядра и органеллы 
(митохондрии, аппарат Гольджи, лизосомы и пероксисомы) сохраняются 
интактными и находятся в образующей суспензии.
Для разделения вышеуказанных компонентов клетки применяют высоко­
скоростную центрифугу (80 000—150 000 оборотов/мин). Вначале оседают 
(седиментируют) на дне пробирки более крупные части (ядра, цитоскелет). 
При дальнейшем увеличении скоростей центрифугирования надосадочных 
фракций последовательно оседают более мелкие частицы — сначала мито­
хондрии, лизосомы и пероксисомы, затем микросомы и мельчайшие пу­
зырьки и, наконец, рибосомы и крупные макромолекулы. При центрифуги­
ровании различные фракции оседают с различной скоростью, образуя в 
пробирке отдельные полосы, которые можно выделить и исследовать. 
Фракционированные клеточные экстракты (бесклеточные системы) широко 
используют для изучения внутриклеточных процессов, например для изуче­
ния биосинтеза белка, расшифровки генетического кода и др.
Хроматография
широко используется для фракционирования белков.
Электрофорез
позволяет разделить белковые молекулы с различным заря­
дом при помещении их водных растворов (или в твердом пористом матрик­
се) в электрическом поле.
Методы хроматографии и электрофореза применяют для анализа пепти­
дов, получаемых при расщеплении белковой молекулы, и получения так на­
зываемых пептидных карт белков. Подробно эти методы описаны в учебни­
ках биохимии.


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   13   14   15   16   17   18   19   20   ...   620




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет