Микробиология

119 
ИФТ-дың «сэндвич» қойылымы. 
Аталмыш тәсіл зерттеуге алынған 
ҥлгілердің қҧрамынан антигендер мен антиденелерді анықтауға 
бағытталған.
Антигенді 
анықтау 
мақсатында 
қатты 
фаза 
алғашқы 
антиденелермен 
(телімді 
поликлоналды 
немесе 
моноклоналды 
антиденелер) адсорбцияланады. Сонан соң шайылған қатты фазаға 
зерттеуге алынған материалдар мен бақылау ҥлгілері енгізіледі. 
Инкубация және шаю процедураларын жҥргізгеннен кейін оған 
ферментпен таңбаланған екінші антиденелерді – конъюгатты қосады. 
Пайда болған «антидене + антиген + телімді конъюгат» кешені субстрат 
ерітіндісінің кӛмегі арқылы анықталады.
Егер бірінші және екінші антиденелер әртҥрлі жануарлардан 
алынған болса, онда олардың соңғысын ферментпен таңбаламай ақ 
пайда болған «алғашқы антидене + антиген + екінші антидене» кешенін 
кейінгі антиденелерге телімді ферментпен таңбаланған анти-
антиденелердің кӛмегімен айқындауға болады. Бҧл жағдайда тәсілдің 
қойылымы бір сатыға ҧзарады (44-сурет).
ИФТ-дың 
«сэндвич» 
қойылымында 
қолданылатын 
алғашқы 
және 
екінші 
антиденелер 
антигеннің 
әртҥрлі 
детерминанталарына бағытталған болуы керек.
Биологиялық 
сҧйықтықтардағы 
антиденелерді анықтау ҥшін оларға ҥйлесімді 
антигендерді қатты фазамен стандартты 
антиденелер 
арқылы 
байланыстырып, 
ферментпен таңбаланған антиантиденелерді 
қолдана 
отыра, 
зерттеуге 
алынған 
материалдағы антиденелердің барын немесе 
жоғын анықтайды.
Бірінші 
қатардан 
басқа 
(1А–1Н) 
планшеттің барлық шҧқыршығын антигенмен 
сенсибилизациялайды. Планшеттің бірінші 
қатарындағы шҧқыршықтарға 0,1 мл-ден ФТЕ-
Т (твин қосылған фосфатты тҧз ерітіндісі) 
енгізеді. 
Байланыспаған 
компоненттерді 
планшеттің шҧқыршығынан 3 мәрте шайып
тастаған соң, қатты фазаның бос
аймақтарын 1% сиыр қан сарысуы альбуминімен әр шҧқыршыққа 0,1-0,2 
мл-ден енгізу арқылы тежейді де, 37ºС-де 1 сағат инкубациялайды. 
1%-ды ірі қара қан сарысуының альбуминімен тежелу уақыты 
аралығында ФТЕ-Т ерітіндісінде 1:100 ден 1:12800-ге дейінгі бақылау 
және зерттелетін қан сарысуларының сҧйылтымдарын дайындайды. 
Барлық қан сарысулары бар тҥтіктер белгіленіп жазылуы керек. 
Уақыт ӛткен соң 1% сиыр қан сарысуының альбуминін 3 мәрте 
шайғаннан кейін планшеттің шҧқыршықтарына 0,1 мл қан сарысуы 

жүктеу/скачать 5,08 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: