О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология

Способы сбора материала 

 

Способы сбора материала 
Независимо от характера взятого для исследования материала с момента 
выделения чистой культуры исследование ведут по общей схеме. 
Основные методы исследования 
1. Бактериологический (рис. 43). 
2. Серологический. 

 

Рис. 43. Схема микробиологического исследования при брюшном тифе и 
паратифах в разные периоды заболевания. I - 1-й период исследования 
(гемокультура); II - 2-й период исследования (реакция Видаля); III - 3-й период 
исследования (копрокультура) 
Ход исследования 
Первый день исследования 
 
Первый день исследования 
Второй день исследования 
Вынимают чашки из термостата (инкубация 18-24 ч) и просматривают 
выросшие колонии невооруженным глазом и при помощи лупы. Несколько (5-
6) подозрительных колоний выделяют на среду Олькеницкого или Рассела. 
Посев производят следующим образом: снятую колонию осторожно, не 
задевая края пробирки, вносят в конденсационную жидкость, затем штрихами 
засевают всю скошенную поверхность среды и делают укол в глубину 
столбика для выявления газообразования. Укол следует производить в центр 
агарового столбика. 
Пробирки с посевами ставят в термостат. Если исследуемый материал был 
посеян на среду обогащения, то через 18-24 ч производят высев со среды 
обогащения на чашки с дифференциальными средами. Дальнейшее 
исследование ведут по общей схеме. 
 
Таблица 32. Рост сальмонелл на дифференциально-диагностических средах 

1
(
На месте снятых колоний остается черный след (изменяется цвет среды).
) 
Третий день исследования 
Вынимают пробирки с посевами из термостата и просматривают характер 
роста. 
В состав комбинированных сред входят лактоза, глюкоза, иногда мочевина 
и индикатор. Расщепление глюкозы происходит только в условиях 
анаэробиоза. Поэтому скошенная поверхность среды при расщеплении 
глюкозы не изменяется, а столбик окрашивается в цвет, соответствующий 
индикатору. Бактерии, расщепляющие лактозу и мочевину, изменяют цвет 
всей среды. 
Если выделенные культуры сбраживают лактозу или расщепляют мочевину, 
меняя цвет всей среды, то они не являются сальмонеллами и можно дать 
отрицательный ответ. 
Культуру, расщепляющую только глюкозу, подвергают дальнейшему 
изучению: делают мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют. При 
наличии в мазках грамотрицательных палочек изучают их подвижность и 
ферментативные свойства. 
Подвижность можно определить в висячей капле или в раздавленной капле, 
а также по характеру роста в полужидкой среде Гисса или в 0,2% агаре. При 
наличии подвижности при посеве уколом рост на среде диффузный, среда 
мутнеет. 
Для выявления ферментативной активности производят посев на среды 
Гисса, МПБ, пептонную воду. В пробирки с последними средами опускают 
(под пробку) индикаторные бумажки для определения индола и сероводорода. 
Делают также посев на лакмусовое молоко. 
Четвертый день исследования 
Учитывают биохимическую активность по результату ферментации 
углеводных и других сред (см. табл. 33). 

 
Таблица 33. Ферментативные свойства сальмонелл 
Примечание. к - образование кислоты; кг - образование кислоты и газа; щ - 
щелочение; + наличие свойства; - отсутствие свойства. 
Определив морфологические, культуральные и ферментативные свойства 
выделенной культуры, необходимо провести анализ антигенной структуры 
(табл. 34). 
 
Таблица 34. Сокращенная схема антигенной структуры сальмонелл (по 
Кауфману - Уайту) 
Серологическую идентификацию сальмонелл начинают с реакции 
агглютинации на стекле с поливалентной О-сывороткой А, В, С, D, Е. При 

отсутствии агглютинации выделенную культуру испытывают с поливалентной 
О-сывороткой к редким группам сальмонелл. При положительной реакции с 
одной из сывороток культуру испытывают с каждой О-сывороткой, входящей 
в состав поливалентной, для определения О-серогруппы. Установив 
принадлежность культуры к О-группе, определяют ее Н-антигены с 
сыворотками первой, а затем второй фазы (табл. 35). 
 
Таблица 35. Антигенная структура возбудителей брюшного тифа и 
паратифов 
Культуру сальмонелл тифа испытывают также с Vi-сывороткой. 
Возбудители брюшного тифа, содержащие Vi-антиген, испытывают Vi-фагами 
(их 86). Определение фаготипа имеет большое эпидемиологическое значение 
(см. рис. 43). 

жүктеу/скачать 14,39 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: