О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология
жүктеу/скачать 14,39 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Способы сбора материала
- Ход исследования
- Методы ретроспективной диагностики
| Материал для исследования
1. Кал больных (взятые на 1-й и 2-й неделе заболевания). 2. Носоглоточное отделяемое (взятое в первые дни заболевания). 3. Кусочки головного и спинного мозга, содержимое тонкого и толстого кишечника, лимфоузлы (секционный материал). Способы сбора материала Способы сбора материала Основные методы исследования 1. Выделение вирусов путем заражения различных культур клеток. 2. Серологическое исследование (реакция нейтрализации) и РСК. Ход исследования Выделение вирусов проводят путем заражения исследуемым материалом двух видов культур - первичных и перевиваемых клеток. Ход исследования О наличии вируса судят по цитопатическому действию на клетки. При отсутствии дегенерации клеток в течение 7-10 дней после заражения проводят следующий пассаж. Для второго посева используют культуральную жидкость, взятую из первого пассажа, и заражают новую культуру клеток. При отсутствии дегенерации клеток во втором пассаже результат считают отрицательным. При положительном результате проводят типирование выделенного вируса с коммерческими сыворотками против вируса полиомиелита трех типов методом нейтрализации в культуре клеток и РСК. Серологическая диагностика Методы ретроспективной диагностики. Для подтверждения диагноза полиомиелита ставят реакцию нейтрализации с парными сыворотками больного. Одну сыворотку берут в начале заболевания, вторую - через месяц после начала заболевания. Обе сыворотки исследуют одновременно в реакции нейтрализации. Для этого сыворотки прогревают в течение 30 мин при 56° С и разводят раствором Хенкса. Разведения делают от 1:4 до 1:1024. Каждое разведение смешивают со стандартной дозой вируса I, II и III типа. После часового контакта (при комнатной температуре) каждой смесью заражают по 2 пробирки со взвесью культуры клеток и помещают в термостат на 4-9 дней. О результатах реакции судят по изменению цвета среды (от малинового до желтого). Изменение цвета свидетельствует о наличии антител. Изменение цвета происходит потому, что клетки остаются жизнеспособными, образуют продукты обмена, изменяющие реакцию рН и соответственно цвет среды. Жизнеспособность клеток обеспечивает нейтрализация вируса соответствующей сывороткой. Положительной реакцию считают только при четырехкратном увеличении титра вируснейтрализующих антител, т. е. если, например, титр первой сыворотки был 1:8, а во второй, взятой через 1-2 мес, титр не менее чем 1:32. Вирусы Коксаки Вирус Коксаки впервые выделили в 1948 г. Г. Долдорф и И. Сиклс в городе Коксаки в США из испражнений детей при полиомиелитоподобных заболеваниях. жүктеу/скачать 14,39 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|