Культивирование. Коринебактерий дифтерии - факультативные анаэробы.
Растут при температуре 35-37° С, рН среды 7,4-7,8. Они не размножаются на
обычных питательных средах. Культивируют их на средах, содержащих кровь
или сыворотку.
В конце XIX века французский ученый Э. Ру для культивирования бактерий
дифтерии предложил использовать свернутую бычью или лошадиную
сыворотку, а Ф. Леффлер рекомендовал добавлять к ней бульон (25%) и 1%
глюкозу. На этих средах коринебактерий растут быстро, в течение 14-18 ч
образуют несливающиеся выпуклые колонии кремового цвета (рост на
скошенной
среде
напоминает
шагреневую
кожу).
Однако
отдифференцировать на этих средах дифтерийные палочки от
ложнодифтерийных невозможно.
В настоящее время основными средами для выращивания являются среда
Клауберга (содержащая сыворотку крови и теллурит калия), хинозольная
среда Бунина, среда Тинсдаля и др. На основании культуральных и
ферментативных свойств коринебактерий дифтерии делят на три биовара:
гравис (gravis), ми тис (mitis), интермедиус (intermedins). Биовар гравис
обычно находится в R-форме. На среде Клауберга бактерии этого биовара
растут в виде крупных колоний 2-3 мм, серовато-черного цвета (так как
восстанавливают теллурит в теллур), имеют изрезанные края, что придает им
вид розетки. При прикосновении к колонии петлей она как бы рассыпается. На
бульоне бактерии этого биовара образуют крошащуюся пленку и зернистый
осадок.
Коринебактерии биовара митис (mitis) на среде Клауберга растут в виде
небольших, гладких колоний (S-форма) черного цвета. На бульоне они дают
равномерное помутнение.
Коринебактерии
биовара
интермедиус
(intermedins)
являются
промежуточными. На среде Клауберга бактерии этого биовара чаще растут в
виде блестящих, мелких, черных колоний (этот биовар встречается редко).