Орындаған: Төлегенова Б. Д тобы: в-жмқБ-05-21 Қабылдаған: Полатбекова Ш. Т жоспар

жүктеу/скачать 307,5 Kb. бет 1/2 Дата 15.04.2023 өлшемі 307,5 Kb. #83209

Бұл бет үшін навигация:

• Тобы: В-ЖМҚБ-05-21 Қабылдаған:Полатбекова Ш.Т Жоспар

«Микробиология, вирусология және иммунология» кафедрасы Ғылыми мақалаға сараптама Тақырыбы:Сарысусыз HEK293A жасуша мәдениеті жүйесінде коксаки вирусының A10 таралуы және иммунологиялық сипаттамасы Орындаған:Төлегенова Б.Д Тобы: В-ЖМҚБ-05-21 Қабылдаған:Полатбекова Ш.Т Жоспар: Мақала авторлары, мақала атауы Өзектілігі Әдістер Деректерді талдау Нәтижелер ,ғылыми жаңалық Қорытынды Авторлар CRediT авторлық үлесі туралы мәлімдеме Шен-Чи Лиен: концептуализация, әдістеме, зерттеу, жазу – түпнұсқа жоба. Ю-Шэн Шен: концептуализация, әдістеме, зерттеу, жазу – түпнұсқа жоба. Сяо-Ю Лин: концептуализация, зерттеу. Шан-Рун Ву: Тергеу. Chih-Yeu Fang: Формальды талдау, Жазу – түпнұсқа жоба. Чи-Хсун Чен: Тергеу. И-Ан Чен: Тергеу. Пеле Чой-Синг Чонг: концептуализация, ресурстар. Мин-Хси Хуан: Ресурстар. Йен-Хунг Чоу: концептуализация, ресурстар. Джен-Рен Ванг: Ресурстар. Сух-Чин Ву: Ресурстар. Чиа-Чи Лю: Тұжырымдама, әдістеме, деректерді курациялау, формальды талдау, жазу – түпнұсқалық жоба, жазу – шолу және өңдеу, жобаны басқару, қаржыландыруды алу. Өзектілігі:Coxsackievirus A10 (CVA10) - қол, аяқ және ауыз ауруын (HFMD) тудыратын энтеровирустық патогендердің бірі. CVA10 Веро жасуша мәдениетінде оңай таралмайтыны хабарланғандықтан, формалинмен инактивацияланған CVA10 вакцинасын өндіру үшін мүмкін болатын өндіріс процесі шұғыл қажет. Вирустық вакцинаны өндіру үшін жиі қолданылатын бірнеше жасуша линиялары осы зерттеуде CVA10 (M2014 штаммы) мәдениетіне сыналған және біздің нәтиже CVA10 HEK293A жасушаларында оңай таралатынын көрсетті. CVA10 өндіру үшін сарысусыз HEK293A жасуша культурасы жүйесі әзірленді және өнімділік 108 TCID50/мл-ге жетті. Осы сарысусыз HEK293A дақылынан алынған CVA10 бөлшектерінің биохимиялық және иммуногендік қасиеттері алдыңғы зерттеуімізбен бірдей болды. CVA10 екі негізгі бөлшектері ультрацентрифугалау арқылы бөлінді және тек жұқпалы жетілген бөлшектер тінтуірдің иммуногенділігін зерттеуде CVA10 бейтараптандыратын антиденелердің жауаптарын индукциялауға қабілетті болды. Сонымен қатар, біз коксаки вирусы A6 және энтеровирус A71 де сарысусыз HEK293A жасуша культурасы жүйесін пайдаланып оңай таралатынын анықтадық. Біздің нәтижелеріміз CVA10 таралуындағы кедергіні еңсеру шешімін береді және HFMD алдын алу үшін көпвалентті вакциналарды әзірлеуді жеңілдетеді. Кіріспе Coxsackievirus A10 (CVA10) - қол, аяқ және ауыз ауруларын (HFMD) тудыратын кең таралған патогендердің бірі. CVA10 инфекциясы балаларда эритематозды, онихомадезді және HFMD байланысты белгілерді тудыруы мүмкін. Соңғы 20 жылдағы пандемиялық сауалнамаға сүйенсек, Қытайда, Финляндияда, Францияда, Үндістанда, Жапонияда, Кореяда, Сингапурда, Испанияда, Тайваньда, Тайландта және Вьетнамда CVA10-мен байланысты HFMD бірнеше өршуі тіркелген (Лу және т.б., 2012; Лю және т.б., 2014; Клейн және Чонг, 2015; Ян және басқалар, 2015; Гонсалес және басқалар, 2019; Нхан және басқалар, 2020; Цзян және басқалар, 2021; Ким және басқалар, 2021; Мин және т.б., 2021; Чжан және т.б., 2022). EV-A71-мен байланысты HFMD алдын алу үшін формалинмен белсендірілмеген энтеровирус A71 (FI-EV-A71) вакцинасының сәтті дамуымен HFMD байланысты вирустардың басқа түрлері назар аудара бастады (Fang және Liu, 2018, 2022). Дегенмен, моновалентті EV-A71 вакциналары клиникаға дейінгі зерттеулерде CVA10-ға қарсы нашар айқаспалы бейтараптандыруды көрсетті (Liu және т.б., 2016). FI-EV-A71 толық вириондық вакцина тұжырымдамасына сүйене отырып, FI-CVA10 вакцинасының дамуы HFMD алдын алуға арналған көпвалентті вакцинаға қосылуы үшін маңызды болып саналады (Liu және басқалар, 2016; Лим және т.б., 2018; Фанг пен Лю, 2022). Сондықтан вакцинаны өндіру үшін CVA10 үшін мүмкін болатын өндіріс процесі шұғыл қажет. CVA10 — Picornaviridae тұқымдасының, Enterovirus текті қабықсыз РНҚ вирусы, оған сонымен қатар полиовирус (PV1-PV3), коксакивирустар (CVA тобы және CVB тобы), EV-A71 және эховирус кіреді. CVA10 Enterovirus A түріне жіктеледі және оның РНҚ геномының өлшемі шамамен 7,4 Кбит (Соломон және басқалар, 2010; Simmonds және т.б., 2020). 100-ден астам энтеровирустардың геномдық өлшемдері ұқсас екендігі хабарланғанымен, олардың барлығының өзіндік бірегей сипаттамалары бар. Дәстүрлі түрде энтеровирусты вакцинаны өндіруге қажетті вириондар Веро жасуша культурасынан алынады. Дегенмен, CVA10 клиникалық изоляттарының көпшілігінің Веро жасушаларында культуралық тиімділігі төмен екендігі хабарланды, ал алдын ала скринингтен өткен бірнеше ғана Веро-бейімделген CVA10 штаммдары Веро жасушаларында барабар тарай алады (Liu және т.б., 2016; Лим және т.б., 2018). ; Ван және т.б., 2020; Чжан және басқалар, 2022; Чжао және басқалар, 2022). Бұл нәтижелер клиникалық оқшауланған пулдан алынған CVA10 вакцинасына үміткерлердің мүмкін еместігін көрсетуі мүмкін, бұл олардың әдеттегі Веро мәдениетінде жақсы таралмайтынын көрсетеді. Жасуша желілері, қоректік орталар және өндіріс процестері жасуша негізіндегі вирустық вакцинаны өндіру үшін маңызды элементтер болып табылады. Полиовирусты вакциналар микротасымалдаушы биореактордағы Веро жасушалары өндіретін вириондардан әзірленеді (Montagnon және т.б., 1984). EV-A71 сарысусыз күйде шығару үшін роликті бөтелке, жасуша зауыты және микротасымалдаушы биореакторды қамтитын өсіру жүйелері әзірленді (Liu және басқалар, 2011; Чоу және басқалар, 2012; Чонг және басқалар, 2015). Вакцинаны өндіруге арналған вириондарды өндіру үшін HEK293, MRC-5, CHO, MDCK, CAP және AGE1.CR қоса алғанда, бірнеше әлеуетті хост-жасушалық желілер пайдаланылды бұл жасуша желілерінің вакцина өндірісі үшін қолданылатын жүйелерге айналуы мүмкін. (Vlecken және т.б., 2013). Өткен жылдары жасуша негізіндегі тұмауға қарсы вакциналардың дамуы Vero, MDCK, AGE1.CR және HEK293 сияқты жасушалық желілерді пайдалану арқылы вакцина өнімділігін айтарлықтай жақсартуға болатынын көрсетті (Lohr және басқалар, 2009; Le et al. ., 2010; Tapia және т.б., 2014; Милиан және басқалар, 2017; Перес Рубио және Эйрос 2018). Сондықтан вирион өндірісі үшін қосымша қолайлы жасуша желілерінің болуы CVA10 және басқа энтеровирустық вакциналарды өндіру үшін қосымша икемділікті қамтамасыз етуі мүмкін. Бұл зерттеуде біз энтеровирусты өндіруге арналған бірнеше жасушалық желілерді сынадық және HEK293A CVA10 өндірісі үшін күшті жасуша желісі екенін анықтадық. Біз CVA10 көбеюі үшін роликті бөтелке мен суспензия культура жүйесін пайдалана отырып, сарысусыз HEK293A жасуша культурасын жасадық. Алынған вириондар тазартылды және олардың иммунологиялық және биохимиялық сипаттамаларын бағалау үшін сынақтан өтті. Біз сондай-ақ осы сарысусыз жүйеде HEK293A жасушаларын пайдаланып CVA6 және EV-A71 таралуын зерттедік. Бұл нәтижелер көпвалентті HFMD вакцинасының дамуына ықпал етеді деп күтеміз. жүктеу/скачать 307,5 Kb. Достарыңызбен бөлісу: