Проточная цитофлюориметрия, ее диагностическое значение

245 
Таблица 3.10 
Возможности проточной цитофлюориметрии 
Клиническое значение 
Потенциальные возможности 
Диагностика ОЛЛ и ОМЛ (М0, М6, М7); 
бифенотипического острого лейкоза 
Идентификация вариантов острых 
лейкозов с неблагоприятным прогнозом
Диагностика и дифференциальная 
диагностика В-клеточных 
лимфопролиферативных заболеваний (ЛПЗ) 
Выявление минимальной остаточной 
болезни при острых лейкозах и ЛПЗ 
Диагностика Т-клеточных ЛПЗ 
Подсчет гемопоэтических стволовых 
клеток пуповинной и периферической 
крови, костного мозга 
На основе концепции соответствия фенотипа злокачественной клетки 
фенотипу 
нормального 
клеточного 
аналога 
на 
каждом 
уровне 
дифференцировки 
представилось 
возможным 
выделить 
ряд 
иммунологических вариантов (фенотипов), определяющих клеточную 
природу лейкозов, уровень блока дифференцировки клетки в лейкемической 
популяции. В большинстве случаев острых лейкозов бласты имеют 
иммунофенотип, сравнимый с нормальными гемопоэтическими клетками 
аналогичных стадий дифференцировки. При ОЛЛ и ОМЛ бластные клетки 
рассматриваются как злокачественные аналоги нормальных клеток на ранних 
стадиях лимфо- и миелопоэза. По набору мембранных и цитоплазматических 
антигенов можно установить линейную принадлежность, стадию 
дифференцировки и функциональное состояние клетки. Выделяют: 

линейно не ограниченные (не рестриктированные) антигены – их 
экспрессия не ограничена одной клеточной линией. Это CD34, CD38, HLA-
DR, TdT; 

линейно-ассоциированные (линейно-специфические) антигены – 
специфически экспрессируются на некоторых линиях миелоидной (CD13, 
CD33, CD117, CD65, MПO, CD14, CD15, CD41, CD42, CD61 и т.д.) или 
лимфоидной дифференцировки (CD19, CD22, cIg, sIg, CD5, CD3 и т.д.); 

дифференцировочные 
антигены 
– 
отражают 
стадии 
дифференцировки клеток (цитоплазматический IgМ, , -легкие цепи Ig, 
CD34, CD10, СD1а); 

246 

активационные антигены – отражают активацию клеток (CD25, 
CD38, HLA-DR). 
Дифференцировочные 
антигены 
могут 
обнаруживаться 
на 
злокачественных клетках в комбинациях, которые очень редко встречаются 
или не выявляются в нормальном костном мозге.
Лейкемические клетки можно отличить от их нормальных аналогов по 
ряду критериев. К основным типам фенотипа лейкозных клеток относятся: 

коэкспрессия антигенов нескольких линий, т.е. лимфоидных 
маркеров при ОМЛ или миелоидных маркеров при ОЛЛ; 

асинхронная экспрессия антигена – одновременная экспрессия 
«раннего» и «позднего» антигенов, которые в норме находятся на разных 
этапах дифференцировки клеток, например, CD34 и CD15; CD15 и CD117; 

сверхэкспрессия антигена – плотность распределения антигенов на 
лейкозной клетке больше, чем на нормальной клетке костного мозга 
(например, гиперэкспрессия CD10 при ВII ОЛЛ); 

отсутствие или низкий уровень экспрессии антигена, характерного 
для данной стадии дифференцировки — потеря клеткой ряда поверхностных 
антигенов, например, утрата CD33 наблюдается в 21% случаев ОМЛ; 

фенотипический профиль, практически не встречающийся в норме. 
Измененная экспрессия антигенов отражает генетические нарушения, 
лежащие в основе опухолевого перерождения клетки, позволяя выявлять 
атипичные клетки даже при относительно небольшом их содержании в 
образце. Подобный иммунофенотип лейкозной клетки позволяет проводить 
мониторинг за остаточной опухолевой популяцией в процессе химиотерапии. 
Проточная цитофлюориметрия позволяет исследовать антигены, 
имеющие прогностическое значение, например, CD38, ZAP-70, CD31 при
В-клеточном хроническом лимфолейкозе. Широкое использование в 
клинической практике моноклональных антител (мабтера, кэмпас, 
люмиксимаб и др.) значительно улучшило результаты лечения больных 

247 
лимфомами. Для успешного их применения необходимо до начала терапии 
исследовать степень экспрессии антигенов на соответствующих клетках-
мишенях (например, CD20 или CD52 при использовании соответственно 
мабтеры и кэмпаса). В динамике лечения, используя метод проточной 
цитофлюориметрии, можно проводить мониторинг остаточной популяции 
опухолевых клеток. Подсчет гемопоэтических стволовых клеток на 
основании идентификации антигена CD34 широко используется в 
клинической гематологии, так как они обеспечивают постепенное 
восстановление костного мозга после интенсивной химиотерапии.
Широкое 
использование 
проточной 
цитофлюориметрии 
в 
онкогематологии привело к качественно новой диагностике лейкозов и 
лимфом, а также к разработке новых подходов в оценке эффективности 
лечения и мониторинга минимальной остаточной болезни, определяющей 
дальнейшую тактику ведения больных.

жүктеу/скачать 4,09 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: