Жеке гендердің транскрипцияның морфологиясы

Жақында жеке құрылымдық (полипептидтік тізбектерді кодтайтын) гендердің транскрипция морфологиясын зерттеудің прогрессивті әдісі ұсынылды. Экспериментте x ооциттері қолданылды . laevis, оның ядроларына микроинъекциялар арқылы кез-келген молекуланы, соның ішінде ДНҚ-ны енгізуге болады. Егер сіз осындай енгізу үшін клондалған гендерді алсаңыз, онда Миллерге сәйкес дәрі-дәрмектерді ала отырып, ядро мен хромосомалардан бөлек ДНҚ молекулаларын таба аласыз, олар ооциттердің ядроларындағы жоғары транскрипциялық белсенділік жағдайында өз кезегінде транскрипция процесіне қатысады. Бұл жеке геннің транскрипциялық белсенділігін байқауға мүмкіндік береді.

Сонымен, тауықтардың овальбумині клондалған гендерінің кішкентай циклдік молекулалары ооцит ядроларына енгізілді. Осы гендердің көп мөлшерін енгізу (бір ядроға 2-5 нг) ядрода ооциттердің меншікті хроматин элементтерінен жақсы ерекшеленетін бірнеше жүздеген циклдік молекулалардың кластерлерін құруға әкелді. Инъекциялық материалдың 80-90% - ы белсенді емес екені белгілі болды. Бұл жағдайда гендердің жеке циклдік молекулалары толығымен нуклеосомалармен жабылған және транскрипциялық кешендер жоқ (РНҚ полимераза синтезделген РНҚ тізбегімен бірге).

Алайда, енгізілген гендердің аз бөлігі типтік транскрипциялық кешендерге ие болды. Мұндай белсендірілген гендердің ішінде кем дегенде үш морфологиялық класс бар. Бірінші жағдайда, олар әлсіз транскрипциясы бар дөңгелек молекулалар болды (хроматиннің ұзындығы 1 мкм-ге 3-10 транскрипт), транскрипттер әртүрлі ұзындықта болды және сызықтық градиент жоқ. Басқа жағдайда ДНҚ молекуласының бүкіл ұзындығы бойынша транскрипция кешендерімен жабылған хроматиннің қарқынды транскрипцияланған циклдік бөлімдері байқалды (1 мкм хроматинге 30-50 транскрипт). Мұнда транскрипттердің ұзындығы 1,2 мкм - ге жетті. Қарқынды транскрипцияланған учаскелердегі РНҚ әрқашан ұзындықтың градиенті бойымен орналастырылып, нуклеол ДНҚ-ның транскрипциялық бірліктерінде "шыршаларға" ұқсайтын учаскелер пайда болды. Клондалған тауықтардың овальбумин генінен алынған бастапқы транскрипт кодтау тізбегінің бөлімдерін (экзондар) және интрондарды қамтиды. Мұндай препараттарда глобулярлы сплайсосомалар жіп тәрізді транскриптермен тығыз байланыста көрінеді. Осылайша, кез-келген жеке гендердің жұмысын байқауға болады.