С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров



Pdf көрінісі
бет121/375
Дата31.12.2021
өлшемі2,61 Mb.
#21760
1   ...   117   118   119   120   121   122   123   124   ...   375
Байланысты:
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020

III  этап.  Введение  нового  (рекомбинантного)  гена  в  клетку  можно 
провести двумя способами: используя вектор или путем прямого введения. 
Вектор  –  молекула  ДНК  или  РНК,  способная  переносить 
включенные  в  нее  чужеродные  гены  в  клетку,  где  эти  молекулы 
реплицируются автономно или после интеграции с геномом (хромосомой). 
Не каждая молекула ДНК или РНК может быть вектором. 
Векторы должны обладать определенными свойствами: 
  способность к автономной репликации в клетке реципиента; 
  наличие  области,  в  которую  возможно  встраивание 
необходимого  фрагмента  ДНК;  для  этого  вектор  должен  содержать  один 
или более сайтов рестрикции
  небольшой  размер,  так  как  при  длине  более  15  т.п.н. 
значительно снижается эффективность клонирования чужеродной ДНК
  наличие 
маркерных 
генов, 
позволяющих 
отличить 
трансформированные  клетки  от  исходных:  это  могут  быть  селективные 
(придающие  клеткам  устойчивость  к  антибиотикам,  гербицидам)  или 
репортерные (клетки удобно тестировать по изменению окраски продуктов 
этих генов) гены; 
  наличие 
соответствующего 
промотора, 
под 
который 
необходимо поместить чужеродный ген для экспрессии в клетке бактерии
Существует  несколько  типов  векторов:  бактериальные  плазмиды, 
вирусы  и  т.д.  Существуют  гибридные  векторы,  содержащие  ДНК  фага  и 
плазмиды. К ним относятся, например, космиды и фазмиды. Кроме того, в 
качестве 
векторов 
можно 
использовать 
хлоропластную 
и 
митохондриальную  ДНК.  Интерес  представляют  сегменты  ДНК,  которые 
контролируют собственную транспозицию (перемещение) из одного сайта 
ДНК  в  другой  путем  вырезания  из  исходного  сайта  и  внедрения  в  новый 
сайт  хромосомы  или  плазмиды  –  транспозоны.  В  качестве  векторных 



Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   117   118   119   120   121   122   123   124   ...   375




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет