С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Глава 14. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК 159 наиболее эффективными источниками углеводов являются глюкоза и сахароза. Они утилизируются более чем на 60 %. Их присутствие в составе питательной среды способствует высокой скорости роста и повышению выхода биомассы. Рост на средах с реже используемыми источниками углеводов, такими как галактоза и лактоза, а также на неочищенных источниках, часто требует особого периода «адаптации». Он может быть коротким (2–3 пассажа), а иногда более длительным (12–15 пассажей). Полисахариды, как правило, не используют в качестве источников углеводного питания. Но поскольку ряд тканей обладает активными гидролитическими ферментами (амилаза) и выделяет их в среду, то такие ткани могут расти на средах с растворимым крахмалом (ткани можжевельника, сахарного тростника, раувольфии змеиной). Большое влияние на рост и синтез вторичных соединений оказывает минеральный состав среды. При этом наиболее значимыми являются азот и фосфор. Однако их влияние очень специфично как в отношении вида растения, так и в отношении того или иного продукта. Соотношение аммонийного и нитратного азота в питательной среде также имеет значение. Для большинства культур четко установлена корреляция между увеличением сырой массы ткани и использованием нитратов из среды. Увеличение нитратного азота в среде приводит к повышению синтеза диосгенина культурой клеток диоскореи. В качестве источников азота используют также органические соединения: мочевину; аминокислоты: аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту, аланин, или их смеси в виде гидролизата казеина. Иногда их используют в качестве единственных источников азотного питания, но чаще в комплексе с нитратами и солями аммония. Следует также отметить, что у одних культур органические формы азота – пептон, дрожжевой экстракт, гидролизат казеина тормозят накопление вторичных соединений, а у других повышают их синтез. Необходимым компонентом является фосфор, который входит в состав питательных сред в виде солей ортофосфорной кислоты (NaH 2 PO 4 , KH 2 PO 4 ) Влияние фосфора на биосинтез вторичных метаболитов различно. Так, например, в культуре клеток табака происходит усиление синтеза никотина при уменьшении в среде сахарозы, нитрата и фосфора. Бесфосфатная среда способствует образованию алкалоидов и других вторичных метаболитов в каллусной культуре гармалы. Недостаток фосфора стимулирует синтез вторичных соединений и у некоторых других |