С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020
- Бұл бет үшін навигация:
- Количественное определение адсорбированной дифтерийной вакцины (ГФ РБ, статья 2.7.6)
Глава 11. ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ВАКЦИН 123 инкубации при 32ºС берут пробу культуральной жидкости и вводят 10 мышам. При заболевании хотя бы одной мыши вакцину бракуют. Количественное определение адсорбированной дифтерийной вакцины (ГФ РБ, статья 2.7.6) Активность дифтерийной вакцины определяется путем назначения вакцины морским свинкам с последующей провокацией дифтерийным токсином (методы А или В) или путем определения титра антител против дифтерийногo токсина или анатоксина в сыворотке крови морских свинок (метод С). В обоих случаях активность вакцины рассчитывается по сравнению со стандартным образцом, калиброванным в Международных Единицах. Метод А. Внутрикожный провокационный тест на морских свинках. Используют здоровых морских свинок из одной партии. Животных распределяют не менее чем на 6 равных групп по 5 голов в каждой. Готовят по 5 разведений раствора стандарта и исследуемого раствора с шагом не более 2,5 раза. Иммуниация и провокация. Назначают по одному разведению одной группе морских свинок и вводят подкожно по 1,0 мл разведения каждой морской свинке в группе. Спустя 28 дней каждой свинке выбривают оба бока и вводят внутрикожно по 0,2 мл каждогo из 6 разведений токсина в 6 различных мест на коже животного так, чтобы минимизировать влияние соседних инъекций. Все места инъекций обследуют через 48 часов и записывают наличие специфической дифтерийной эритемы (покраснение). Записывают также число мест инъекций без реакции (внутрикожный провокационный индекс). Сравнивают индекс исследуемого и стандартного растворов. Метод В. Летальный провокационный тест на морских свинках. Используют здоровых морских свинок из одной партии весом 250-350 г. Животных одного пола распределяют в 6 равных групп. Назначают по одному разведению одной группе морских свинок и вводят подкожно по 1 мл разведения каждой морской свинке в группе. Спустя 28 дней каждой свинке вводят подкожно по 1 мл раствора токсина. Считают число выживших животных спустя 4 дня после инъекции токсина. Рассчитывают активность испытуемой вакцины по отношению к активности стандартною образца на основании пропорции выживших животных в каждой группе вакцинированных морских свинок. |