Глава 18. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ
ДЕКСТРАНОВ
227
подвижной фазы и тем же самым растворителем, находящимся в порах
материала, которым заполнена колонка (неподвижная фаза). Диапазон
размеров распределенных молекул определяется диапазоном размеров пор
наполнителя.
Достаточно маленькие молекулы, способные проникать во все поры
материала, элюируются в полном проникающем объеме колонки (V
t
, объем
пор). Молекулы с размерами, превышающими размер всех пор материала
колонки, мигрируют лишь сквозь пространство между частицами
наполнителя, не препятствуя им, и элюируются в свободном объеме
колонки или объеме эксклюзии (V
0
, объем пустот). Разделение молекул в
соответствии с размерами происходит между объемом эксклюзии и полным
проникающим объемом колонки; наиболее эффективное разделение
происходит в первые две трети данногo диапазона.
Специфичной частью оборудования является хроматографическая
колонка с различными длиной и внутренним диаметром, заполненная
материалом, который обеспечивает разделение молекул соответствующих
размеров в необходимом диапазоне. При необходимости колонку
термостатируют. Через колонку с постоянной скоростью пропускают
элюент. К одному концу колонки обычно присоединяют приспособление
для введения пробы, например, инжектор с прерывателем потока,
шприцевой инжектор с мембраной или инжектор с клапаном. К этому же
концу колонки также может быть присоединен соответствующий насос для
подачи элюента с контролируемой скоростью. Проба может также
наноситься непосредственно на сухую поверхность материала колонки или,
если вязкость пробы превышает вязкость элюента, может наслаиваться на
поверхность материала колонки под элюент. Другой конец колонки обычно
присоединяют к соответствующему детектору с приспособлением,
регистрирующим и обеспечивающим контроль соответствующих
концентраций распределенных компонентов пробы. Обычно используют
следующее детекторы: фотометрический, рефрактометрический или
люминесцентный. В качестве наполнителя может использоваться или
мягкий носитель, такой как набухший гель, или твердый – пористое стекло,
силикагель или подходящий для данногo растворителя поперечносшитый
органический полимер.