Глава 20. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ
ТРОМБОЛИТИКОВ И АНТИКОАГУЛЯНТОВ
249
культивирования после добавки фенилаланина. Культивируют в
присутствии 5 % углекислого газа. Определяют титр урокиназы в
культуральной жидкости. Культуральную жидкость с достаточным
содержанием фермента пропускают через колонку, заполненную пористым
кремнеземом или лигнином. Колонку промывают буферным раствором с рН
8,0–10,0 от примесей. Сорбированную урокиназу десорбируют 4 %
раствором аммиака.
Анализ урокиназы производят путем двухступенчатого метода с
помощью йодированной фибрином плитки. В первой стадии урокиназа
действует на плазминоген с образованием плазмина, во второй стадии
плазмин гидролизует радиоактивномеченый сгущенный фибриноген
(фибрин) с выделением фибринопептидов в раствор, количество которых
измеряют при помощи гамма-счетчика. Активность урокиназы относят
пропорционально к радиоактивности, выделенной в раствор. Единицу
активности урокиназы определяют, как количество энзима, который
гидролизует один мкг фибрина за час.
