Литература: 8, с.15-22
Контрольные вопросы: 1 Перечислите, какой формы могут быть хромосомы
2 На какой стадии митоза удобно изучать форму и размер хромосом?
3 Что такое идиограмма хромосом?
Тема 15 Подсчет числа хромосом на временных препаратах Цель: - ознакомить с методом подсчета числа хромосом
План: 1 Подсчет числа хромосом на временных препаратах из зачаточных листочков
Методические рекомендации по подготовке к занятию Листочки размером 3-7 мм предварительно фиксируют в уксусном алкоголе, затем их мацерируют в смеси соляной кислоты и метилового спирта (1:1) и окрашивают ацетокармином. Приготовленный таким образом препарат можно заключить в жидкость Смита, и он будет храниться продолжительное время.
Порядок выполнения задания.
1. Приготовить фиксатор – уксусный алкоголь.
2. Листочки опустить в бюкс с фиксатором и выдержать там в течение 1-4 ч.
3. Слить фиксатор и налить в бюкс смесь крепкой соляной кислоты и метилового спирта (1:1). Продержать листочки в этой смеси в течение 5 минут.
4. Смесь слить и налить в бюкс дистиллированную воду, в которой листочки следует промывать в течение 5 минут.
5. Пинцетом перенести объект на предметное стекло в каплю ацетокармина и осторожно расправить его препаровальной иглой, накрыть покровным стеклом и нагреть над пламенем спиртовки до закипания ацетокармина. Затем осторожно раздавить листочек деревянной палочкой.
6. Чтобы временный препарат перевести в постоянный, ацетокармин нужно заменить просветляющей и консервирующей жидкостью Смита; ее осторожно наносят с одного края покровного стекла. В то же время с другой стороны стекла полоской фильтровальной бумаги удаляют лишний ацетокармин.
7. Препарат просмотреть под микроскопом и, осторожно надавливая препаровальной иглой, удалить воздушные пузырьки.
8. Полученный препарат рассмотреть при объективе 90х и окуляре 10х. Пользуясь рисовальным препаратом или окулярной сеткой подсчитать число хромосом.
