Тема 16 Подсчет числа хромосом на постоянных препаратах Цель: - ознакомить с методом подсчета числа хромосом
План: 1 Подсчет числа хромосом на постоянных препаратах
Методические рекомендации по подготовке к занятию Постоянные препараты с поперечными срезами корешков соответствующего растения помещают на предметный столик микроскопа, тщательно, ряд за рядом, просматривают срезы при объективе 9х и окуляре 15х и отыскивают метафазные пластинки с наиболее удобным для подсчета расположением хромосом. Хромосомы должны лежать свободно, не налегая одна на другую. пластинки отмечают, либо делая соответствующую запись в тетради, либо обводя нужный срез с нижней стороны предметного стекла тушью. Если микроскоп имеет столик- препаратоводитель, то можно записать показания горизонтальной и вертикальной шкал. Отмечают 5-10 таких пластинок на нескольких препаратах изучаемого растения.
Для подсчета числа хромосом необходимо брать клетки, не поврежденные ножом при резке на микротоме. С этой целью отмеченные клетки перед подсчетом проверяют при иммерсионном объективе 90х путем различной фокусировки объекта. Вращая микровинт, устанавливают объектив таким образом, чтобы был виден верхний слой цитоплазмы. По мере вращения микровинта вначале появляются размытые контуры хромосом, затем они становятся четкими. При дальнейшем движении микровинта хромосомы опять теряют четкость и снова становится, виден слой цитоплазмы. Если пластинка разрезана микротомным ножом, то либо на верхней, либо на нижней поверхности клетки вместо цитоплазмы бывают видны контуры хромосом.
Подсчет числа хромосом производят с максимально возможным увеличением – лучше всего с иммерсионным объективом 90х и окуляром 10х. Для этой чтобы точно подсчитать число хромосом, их обязательно следует тщательно зарисовать. Для этой цели лучше всего пользоваться рисовальным аппаратом. Рисовальный аппарат отбрасывает изображение метафазной пластинки на бумагу. Слегка вращая микровинт, добиваются четкого изображения рисуемой хромосомы и постепенно обводят ее контуры остро отточенным карандашом. Когда будет зарисована одна хромосома, начинают рисовать следующую и таким образом зарисовывают все хромосомы метафазной пластинки.
