Всегда медленно добавляйте кислоту в спирт, а не наоборот! Смесь может нагреться.
Раствор 5. 0,3% рабочий раствор метилено-
вого синего:
– растворите 0,3 г хлорида метиленового си-
него в 100 мл дистиллированной воды.
Рабочие растворы карболового фуксина и ме-
тиленового синего должны быть профильтрова-
ны и помещены в герметически закрытые емкости
из темного стекла. Обязательной является марки-
ровка с указанием названия раствора, его концен-
трации, даты приготовления и сроком годности.
Рабочий раствор карболового фуксина может
храниться не более 2–4-х недель, так как фуксин,
выпадая в осадок, изменяет заданные свойства
раствора. Другие рабочие растворы значительно
более стойкие при хранении, вместе с тем, реко-
мендуется готовить их одновременно с раствором
карболового фуксина, то есть каждые две-четыре
недели. Описанный режим приготовления рабо-
чих растворов позволит также добиться экономии
расходных материалов.
ОКРАШИВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ
МЕТОДОМ ЦИЛЯ-НИЛЬСЕНА
Окраску мазков методом Циля-Нильсена
рекомендуется проводить в вытяжном шкафу,
оборудованном раковиной для окраски мазков.
Организация рабочего места для окраски маз-
ков представлена на рис. 4.1.
Процедура окраски 1. Маркированные предметные стекла с на-
несенными на них мазками диагностического ма-
териала помещают на специальный штатив так,
чтобы они не касались друг друга, а их марки-
ровка (номера) была направлена в одну сторо-
ну. На стандартный штатив помещается не более
12 стекол. Кроме того, временной режим и ин-
тервалы окрашивания позволяют окрашивать не
более 12 мазков одновременно.
2. На фиксированный препарат накладывают
полоску фильтровальной бумаги, размером не-
много меньше предметного стекла, но так, чтобы
она закрывала мазок полностью. Фильтровальную
бумагу используют для предотвращения растека-
ния красителя по стеклу и возможного осаждения
кристаллов краски на мазок.
3. На бумагу наливают (рис. 4.2) раствор
карболового фуксина (препарат должен быть
обильно смочен)и нагревают препарат над пла-
менем горелки до появления легкого облачка
паров, не допуская закипания краски и высы-
хания бумаги (рис. 4.3). Объем красящего рас-
твора должен быть достаточным для того, что-
бы его повторно не наносить на уже разогретый
мазок. В случае высыхания мазка и повторного
нанесения красителя, нагрейте мазок до появ-
ления паров повторно.
4. Мазок оставляют на 5 минут с красителем,
чтобы он проник в клеточную стенку МБ и окра-
сил ее.
5. Пинцетом осторожно снимают фильтро-
вальную бумагу и помещают ее в емкость с де-
зинфицирующим раствором (рис. 4.4).