Вопросы для ветеринарных специалистов лабораторий ргп «рвл» Бруцеллез, инфекционный эпидидимит и методы их диагностики?Бруцеллёз
жүктеу/скачать 434 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- 160. Титрация комплемента в бак системе. На примере негативной сыворотки.
- 161. Титрация комплемента в бак системе.
- 162. Получение и подготовка к работе эритроцитов барана для постановки РСК и РДСК.
- 163. Приготовление взвеси эритроцитов перед постановкой реакции.
- 164. Приготовление фенолизированных растворов хлорида натрия для РА.
- 165. Приготовление физ раствора хлорида натрия для РСК и РДСК.
- 166 Определение РН среды физ р-ра. Допустимые параметры РН при постановке реакции.
| 159. Схема постановки РБП. Для каждой партии проб готовим контроли негативной и позитивной бруцеллезной сыворотки(с активностью 400 МЕ). Для этого, в три первые или последние лунки пластинки помещаем:пробу с позитивной бруцеллезной сывороткойв дозировке 0,03 мл. Соответствующая лунка при помощи спиртового маркера помечается знаком «+» (позитивный);пробу с негативной сывороткой в дозировке 0,03 мл. Соответствующая лунка при помощи спиртового маркера помечается знаком «-» (негативный);Контроль антигена ставится один раз на 100 проб. При помощи дозатора вносим сыворотку испытуемой крови дозировкой 0,03 мл с каждой пробирки на край каждой лунки, за исключением контрольных лунок.Для каждого внесения сыворотки на дно лунки, использует отдельный наконечник. Использованные наконечники выбрасываются в контейнер для отходов.В случае выявления бракованной пробы, оставляем пустой предназначенную данной пробе лунку.В каждую лунку, на другой край рядом с сывороткой вносим роз бенгал антиген в дозировке 0,03 мл - для сыворотки крови, взятых у КРС, лошадей, верблюдов и свиней и 0,015 мл - для сыворотки крови, взятых у овец, коз, буйволов, маралов и северных оленей.Допускается внесение роз бенгал антигена одним наконечником во все пробирки, в случае если не задеты наконечником края лунок. При помощи смесителя осторожными вращательными движениями по часовой стрелке раскачиваем лунки для смешивания сыворотки с роз бенгал антигеном (два-три полных оборота). При этом следим чтобы сыворотка и антиген перемешались на каждой из лунок. Подтверждением смешивания является образование в лунке круглой либо овальной смеси приблизительно 2 см в диаметре.Перед каждым использованием смеситель ополаскивают дезинфицирующим раствором приготовленный по инструкции к применению или 3% раствором натрий хлорида и высушивают с помощью фильтровальной бумаги.После того как произошло смешивание сыворотки и антигена убираем смеситель обратно в эксикатор, ставим пластинку с пробами на шейкер, устанавливаем таймер на 4 минуты и запускаем шейкер.После завершения работы шейкера готовим пластинку для проведения оценки результата.
160. Титрация комплемента в бак системе. На примере негативной сыворотки.
162. Получение и подготовка к работе эритроцитов барана для постановки РСК и РДСК. Кровь у барана берут из яремной вены с соблюдением правил асептики в сосуд со стеклянными или фарфоровыми бусами (для дефибринирования) или в сосуд с налитым в него раствором Алсивера в количестве, равном объему крови (для дефибринирования и консервирования). Для консервирования дефибринированной крови применяют раствор стрептомицина (1г стрептомицина, растворенного в 20 мл физ. р-ра, на 100 мл крови). Дефибринированная кровь пригодна для исследования в течении 3 дн, консервированная стрептомицином или р-ом Алсивера в теч 12 дней. Приготовление р-раАлсивера: в 1000 мл дист воды растворяют 18,7 г глюкозы, 4,2 г хлорида натрия, 8,0 г лимоннокислого натрия, 0,5 г лимонной кислоты. Раствор доводят до кипения, охлаждают, фильтруют ч/з бумажный фильтр, разливают в колбы или флаконы и стерилизуют в автоклаве (103-1050 С 30 мин) ч/з фильтр Зейтца. 163. Приготовление взвеси эритроцитов перед постановкой реакции. Для приготовления суспензии эритроцитов берут свежую дефибринированную или консервированную кровь, центрифугируют при 1500-3000 об/мин 15 ин, жидкую часть сливают, а осадок 2-3 раза отмывают в физ р-ре путем центрифугирования в указанном порядке до полного обесцвечивания надосадочной жидкости. 164. Приготовление фенолизированных растворов хлорида натрия для РА. Для приготовления фенолизированного 0,85; 5 и 10% р-ра хлорида натрия в 1000 мл дистиллированной воды растворяют при подогревании соответственно 8,5; 50 и 100 г хлорида натрия и 5 г фенола. 165. Приготовление физ раствора хлорида натрия для РСК и РДСК. Для приготовления 0,85%го физиологического раствора берем 8,5 гр хлорида натрия и доводим до 1 л, после чего кипятим 10 минут. 166 Определение РН среды физ р-ра. Допустимые параметры РН при постановке реакции. рН среды определяем с помощью Аппаратом Михаэлиса. В одну из пробирок наливаем 6 мл испытуемого р - ра и 1 мл соответствующего индикатора, эту пробирку ставим в среднее гнездо переднего ряда; по обеим сторонам помещаем стандарты с тем же индикатором, имеющие наиболее сходную по интенсивности окраску с испытуемым раствором; просмотр ведем в проходящем свете у окна, если цвет раствора одинаков с одним из стандартов, то их рН равны; если он является промежуточным м/у стандартами, допустим 7,0 и 7,2, то его рН принимают за 7,1. Допустимые параметры рН физ. р – ра 7,2 – 7,4. жүктеу/скачать 434 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||