а - қол гомогенизаторы: 1-пестик; 2 - корпус; 3-мотор; 4-штатив;
б-механикалық гомогенизатор: 1 – Электр қозғалтқышы және іске қосу құрылғысы бар корпус; 2-Материалды ұсақтауға арналған камера;
в-шар диірмені: 1 – Электр қозғалтқышы және іске қосу құрылғысы бар корпус; 2-Материалды ұсақтауға арналған камера.
Ақуызды тазалау әдістері Биологиялық материалды гомогенизациялау
Маталарды дезинтеграциялау үшін ультрадыбысты, пресс-әдістерді (мұздатылған биоматериал жоғары қысымдағы Болат Престің ұсақ тесіктері арқылы өткізеді) және "азот бомбасы" әдісін қолданады, бұл ретте жасушалар (атап айтқанда, микробтық) алдымен жоғары қысымдағы азотпен қанықтырады, содан кейін қысым күрт түсіреді – бөлінетін газ тәрізді азот жасушаларды "жаратын" сияқты.
Ұлпаларды ұнтақтаудың заманауи әдістері әдетте ұлпалардың гомогенаттарынан ақуыздарды экстракциямен ұштастырады. Тіндердің ақуыздарының көпшілігі тұздардың 8-10% ерітіндісінде жақсы ериді. Ақуыздарды экстракциялау кезінде ортаның рН белгілі мәндерімен әртүрлі буферлік қоспалар, Органикалық еріткіштер, сондай – ақ неионды детергенттер-ақуыздар мен липидтер арасындағы және ақуыз молекулалары арасындағы гидрофобтық өзара әрекеттесуді бұзатын заттар кеңінен қолданылады.
Органикалық қосылыстардан глицерин ерітінділері (бұрыннан) және әлсіз сахарозаның ерітінділері (әсіресе солюбелизация үшін) кеңінен қолданылады. Экстракция кезінде ақуыздардың ерігіштігіне рН орта үлкен әсер етеді, сондықтан ақуыз химиясында ақуыздардың еруіне де, тұрақтануына да ықпал ететін қышқылдан әлсіз сілтіге дейінгі рН мәні бар фосфатты, цитратты, боратты буферлік қоспалар қолданылады.
Ақуызды тазалау әдістері Белокты экстрациялау
Әсіресе, 0,2 М трис-(оксиметил)-аминометан (HOCH2)3cnh2 ("трис" деп қысқартылады) 0,1 М Хлорлы сутекті қышқыл ерітіндісімен әртүрлі қатынаста трис-буферлік жүйелер кеңінен таралған. Қан сарысуының ақуыздарын бөлу үшін оларды этанолмен (ат әдісі), ацетонмен, бутанолмен Тұндыру және олардың комбинациясы қолданылады. Барлық дерлік Органикалық еріткіштер ақуызды-липидті байланыстарды үзіп, ақуыздардың жақсы экстракциясына ықпал етеді.
Биологиялық материалдан ақуызды таза, гомогенді күйде алу үшін ақуыз-липидті кешендердің ыдырауына және ақуыз-ақуыз байланыстарының үзілуіне ықпал ететін түрлі детергенттер қолданылады . Атап айтқанда, митохондрий немесе басқа да субжасушалы құрылымдарды биомембраналармен тығыз байланысты белоктарды (ферменттерді) босату үшін Х-100 тритонын, натрий додецилсульфатын және натрий дезоксихолатын қолданады.
