59
– малая энергоемкость;
– возможность одновременной очистки от низкомолекулярных
примесей и концентрирования продуктов;
– исключение применения химических реагентов, что снижает
стоимость процессов и уменьшает загрязнение сточных вод;
– универсальность – использование одной и той же установки для
получения различных препаратов.
Для промышленного разделения сложных систем наиболее пер-
спективны ультрафильтрация и обратный осмос.
Движущей силой этих процессов является градиент давлений:
ультрафильтрацию осуществляют при избыточном давлении 0,2–
0,3 МПа, в установках обратного осмоса давление достигает 0,4–
0,6 МПа. Четкой границы, разделяющей процессы ультрафильтрации
и обратного осмоса, нет. Считают, что обратноосмотические мембра-
ны
способны задерживать частицы размером 5 · 10
–4
мкм, т. е. гидра-
тированные неорганические ионы. Ультрафильтрационные мембраны
обеспечивают селективное концентрирование частиц размером более
5 · 10
–3
мкм, т. е. органических молекул и ионов. Это обстоятельство
и обусловило преимущественное применение ультрафильтрации
в промышленной микробиологической практике.
Ультрафильтрационные мембраны изготавливают из
различных
материалов (поливинилиденфторид, полиамид, полиакрилонитрил,
фторопласт и др.).
Существенный недостаток мембран – невысокая водопроницае-
мость, что в значительной степени связано с явлением «концентраци-
онной поляризации» мембран, сущность которого заключается в фор-
мировании примембранного слоя молекул и ионов, тормозящего
транспорт через мембрану низкомолекулярных соединений. На прак-
тике пропускная способность мембран составляет обычно 20–
100 дм
3
/(м
2
· ч).
Этот недостаток можно компенсировать только большой удель-
ной поверхностью мембран в промышленных установках.
Негативный эффект явления «концентрационной поляризации»
мембран минимизируют созданием непрерывного турбулизованного
протока жидкости над мембраной в замкнутом циркуляционном кон-
туре (рис. 6.2).
Принципиальное отличие ультрафильтрации от обычного филь-
трования – отсутствие гетерогенности. Исходная смесь, а также про-
дукт, прошедший через мембрану (пермеат), и продукт, оставшийся
над мембраной (концентрат), находятся в жидкой фазе и различаются
60
лишь составом, т. е. соотношением количеств компонентов. Образо-
вание осадка на поверхности мембраны недопустимо, так как это рез-
ко ухудшает условия ее работы.
Рис. 6.2. Принципиальная схема ультрафильтрационной установки
для концентрирования ферментных препаратов:
А,
Б,
В – ступени концентрирования;
1 – насос;
2 – сборник КЖ;
3 – циркуляционный
насос;
4 – вентиль;
5 – расходомер;
6 – пять последовательно установленных
ультрафильтрационных модулей (I, II, III, IV, V);
7 – холодильник;
8 – регулирующий вентиль
В условиях промышленной эксплуатации ультрафильтрационные
установки регулярно промывают водой или раствором химических
агентов (гипохлорита натрия, органических кислот).
По
способу укладки мембран различают установки с плоскими,
трубчатыми, спиральными мембранными элементами, а также с мем-
бранами в виде полых волокон. Установки с полыми волокнами име-
ют очень большую удельную поверхность фильтрования (до
20 000 м
2
/м
3
) и, следовательно, высокую производительность. Уль-
трафильтрационный
метод незаменим при концентрировании раство-
61
ров ферментов, которые весьма чувствительны к воздействию повы-
шенных температур.
В тонких малотоннажных биотехнологических производствах вы-
сокоактивных и дорогостоящих соединений применяют такие совре-
менные методы разделения веществ, как гель-хроматография, аффин-
ная и препаративная жидкостная хроматография, хроматография на
«молекулярных ситах».
В
технологии получения биопрепаратов на основе жизнеспо-
собных микроорганизмов наиболее ответственной операцией явля-
ется обезвоживание биомассы, в результате которого клетки резко
замедляют жизнедеятельность на длительное время, но сохраняют
жизнеспособность. Для обезвоживания живых микроорганизмов
(а также концентрата высокоактивных термолабильных метаболи-
тов) наиболее пригодна сублимационная сушка, т. е. высушивание
материала из
замороженного состояния при температуре не выше
28
С без оттаивания при глубоком разрежении (влага переходит из
твердого состояния в газообразное, минуя стадию жидкой фазы).
Сублимационной сушке подвергают концентрат суспензии микро-
организмов, в который предварительно вводят криозащитные веще-
ства, например, глицерин, мелассу, раствор глюкозы. Криопротек-
торы предотвращают механическое повреждение клеточных струк-
тур кристаллами льда и концентрирование внутриклеточных элек-
тролитов, вызывающих денатурацию белка. На выживаемость кле-
ток большое влияние оказывают скорость замораживания и оста-
точная влажность препарата, которые уточняют для данного объек-
та экспериментальным путем.
Сублимационная сушка – энергоемкий и дорогостоящий процесс,
но в
производстве ряда биопрепаратов (прежде всего для медицин-
ских целей) она незаменима.
В крупнотоннажных производствах сушку концентрированных
суспензий микроорганизмов производят в высокопроизводительных
распылительных сушилках при прямом контакте диспергированной
до капелек суспензии с
горячим воздухом или топочными газами от
сжигания природного газа. Температура сушильного агента на входе
в сушилку колеблется в пределах 120–350
С в зависимости от термо-
устойчивости продукта. Короткое время сушки (5–25 с) и низкая тем-
пература высушиваемого продукта (не более 45
С) позволяют избе-
жать существенных потерь биологически активных веществ и исполь-
зовать метод для сушки термолабильных продуктов, в том числе фер-
ментных препаратов.