Технология выделения и очистка витамина B 12 Еще одной особенностью биосинтеза витамина В
12
является то, что
его накопление происходит внутри клетки, поэтому выделение и очистка
целевого продукта ведутся по следующей схеме:
1)
отделение клеточной биомассы от культуральной жидкости
путем центрифугирования;
2)
кислотный гидролиз биомассы (НСl, до рН= 4,3–4,6, t=80–90ºС);
3)
сорбция витамина из гидролизата на карбоксильном катионите
СГ-1 в динамических условиях (раствор подаётся сверху вниз) и десорбция
аммиачно-боратным буферным раствором;
4)
адсорбция витамина на активированном угле (очистка от
примесей);
5)
осаждение белком добавлением алюмокалиевых квасцов;
6)
цианирование (обработка цианистым натрием при рН=6,0);
7)
десорбция витамина с активированного угля изопропиловым
спиртом при температуре 80°С и рН = 5,0–6,0;
8)
упаривание изопропилового элюата (под вакуумом при
температуре 70–80°С);
9)
получение резорцинового комплекса;
10) разложение резорцинового комплекса горячей очищенной
водой (при температуре 80°С);
11) кристаллизация и перекристаллизация витамина ацетоном;
12) сушка кристаллов витамина.
Выход продукта при таком способе очистки составляет 55% (с
переработкой маточных растворов) от содержания его в биомассе. Данный
способ выделения и очистки имеет ряд недостатков: низкий выход
конечного продукта, использование нерегенерируемого дорогостоящего
сырья разового использования (активированный уголь, резорцин), большой
расход органических растворителей, использование ручного труда при
многократной загрузке и выгрузке активированного угля и т.д.
