Глава 18. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ
ДЕКСТРАНОВ
225
Продуцентом декстрана 40 является культура
Leuconostoc
mesenteroides (факультативные анаэробы). На жидкой синтетической среде
образуют капсулы углеводного происхождения.
Накопление посевного материала (ПМ) производят в
два этапа:
1. Выращивание ПМ в пробирках. Массовая доля сахара в среде
должна составлять 9,5
0,5%, рН – 6,60,2. Поддержание штамма в активном
состоянии производят путем пересева культуры один раз в двое суток из
пробирки в пробирку на свежеприготовленную среду.
2. Выращивание ПМ в колбах. Для выращивания ПМ в колбах
вместимостью 1000 мл используют 30
6 часовую культуру
Leuconostoc
mesenteroides, выращенную в пробирках, в количествах 25
1 мл
на каждую
колбу. Состав среды аналогичный. Засеянную среду в колбах культивируют
в течение 30
6 ч.
Ферментация. Питательная среда состоит из 10 компонентов:
МgSO
4
,
КН
2
РО
4
,
Na
2
HPO
4
,
NH
4
Cl,
КCl,
соль
Мора
(FeSO
4
×(NH
4
)
2
SO
4
×6H
2
O), парааминобензойная кислота, пептон, сахар и
вода для инъекций.
Технологический процесс ферментации состоит из следующих
стадий:
1) выращивание посевного материала в инокуляторе. Для засева
инокулятора используют ПМ из колб в количестве 10% к объему среды в
инокуляторе (3 колбы по 700 мл). ПМ в колбах должен соответствовать
следующим требованиям:
а) внешний вид –
мутная густая жидкость;
б) морфология культуры –
цепочки кокков с капсулами;
в) отсутствие
посторонних микроорганизмов;
2) получение нативного декстрана в биореакторе.
Выделение и очистка продукта. Осаждают нативный декстран
спиртом этиловым, затем растворяют в воде осадок нативного декстрана и
переосаждают декстран спиртом этиловым. После чего растворяют
очищенный декстран в воде и проводят гидролиз. Обрабатывают раствор
частично гидролизованного декстрана непирогенным углем и фильтруют
через аппарат для выделения высокомолекулярной фракции декстрана.
Также отдельно выделяют среднемолекулярную фракцию. В последующем
проводят стерилизацию. Выделяют первичную стерилизацию с
активированным углем, фильтрацию и ионообменную очистку раствора
декстрана 40 и вторичную стерилизацию раствора с активированным углем,