"фараби əлемі" атты халықаралық ғылыми конференция материалдары
ПРОЦЕСС ОЧИСТКИ ЭКСПЛАНТОВ ДЛЯ ВЕДЕНИЯ В КУЛЬТУРУ IN VITRO
жүктеу/скачать 2,79 Mb. Pdf көрінісі
|
thesis114326
| ПРОЦЕСС ОЧИСТКИ ЭКСПЛАНТОВ ДЛЯ ВЕДЕНИЯ В КУЛЬТУРУ IN VITRO
ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ДИКОЙ ФЛОРЫ ВОСТОЧНОГО КАЗАХСТАНА Мырзагалиева А. Б., Нурбаева А. М., Оразов А. Е. Восточно-Казахстанский государственный университет им. С. Аманжолова orazov_aidyn@mail.ru Для сохранения биологического разнообразия представителей дикой флоры ВКО специалистами ВКГУ им. С. Аманжолова был осуществлен научный проект в рамках фундаментальных научных исследований в 2015-2017 годы на тему «Разработка биотехнологических способов сохранения эндемических и лекарственных растений в условиях in vitro». Немаловажную роль в процессе микроклонального размножения играет протокол очистки и время контакта эксплантов со стерилизующими растворами. Было доказано, что агрессивные растворы и длительный контакт отлично очищает, но повышается риск появление некроза клеток и тканей эксплантов. Для предотвращения этого предлагаем универсальную схему очистки с различными комбинациями растворов и времени контакта. 1 этап: части растении должны пройти первичную отчистку от земли, пыли, визуальных загрязнений и вредителей, если они есть в наличие. Удаляются лишние части растений (листья, ветки, наружная часть семян и т.п.). Удаления грязи или неблагоприятных объектов являющимися потенциально переносчиками инфекций должно проводиться под проточной водой с температурой не выше +20 ºС. 2 этап: первичная очистка в 0,75 % растворе дезинфицирующего средства «Лизоформин специаль» в дистиллированной воде с добавлением пероксида водорода (H 2 O 2 ). Возникшая активная пена повышает воздействия средства и дает возможность проникнуть в труднодоступные участки. В дальнейшем раствор смывается в нескольких порциях дистиллированной и про автоклавированной воды. Семена замачиваются в растворе противогрибкового препарат Nystatin. 3 этап: стерилизация подготовленных эксплантов в условиях ламинарного бокса осуществляется погружением в 5% раствор гипохлорит натрия (NaOCl), для семян время контакта от 10 до 20 минут, для почек и побегов от 1 до 5 минут. Затем слабо концентрированный раствором пероксида водорода (H 2 O 2 ). В заключение промываются в нескольких порциях дистиллированной воды с малым добавлением спирта (1/10). В зависимости от вида и степени загрязнения эксплантов предполагается изменение комбинации, времени контакта и концентрация стерилизующих агентов в разных соотношениях, не нанося вреда для тканей и клеток и не снижая жизнеспособность их в дальнейшем процессе культивирования. Данные этапы стерилизации является апробированным. Количество заражённых пробирок снижается на 20-30 % по сравнению всеми известными методами стерилизаций. жүктеу/скачать 2,79 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|