Фармацевтическая
жүктеу/скачать 66,35 Mb. Pdf көрінісі
|
Снимок экрана 2024—09—11 в 22.33.36
разделению веществ, ведь каждый компонент будет иметь свой масс-спектр? Далеко не все вещества имеют индивидуальные масс-спектры. Например, ионизация электронным ударом молекулы ацетона будет образовывать ряд фрагментарных ионов и молекулярный ион. Причём иногда наиболее интенсивная линия будет соответствовать не молекулярному иону, а фрагменту. Также на масс-спектрограмме будут наблюдаться и маленькие линии, соответствующие либо изотопам углерода, но чаще всего изотопу дейтерия с массой 2. 365 376 Рис. 339. Четвёртый вариант задачи по идентификации методом ГЖХ в сочетании с масс-спектрометрией Оказывается, что многие изомеры органических соединений, например изомеры углеродного скелета (бутилбензол и изобутилбензол), имеют практи- чески идентичные масс-спектры. Изомеры положения, например 1,3,5-триме- тилбензол и 1,2,4-триметилбензол, и даже сильно отличающиеся по хими- ческим свойствам изомеры сопряжённых связей, например 1,3-диметилпиридин и фенилметиламин, имеют идентичные масс-спектры (рис. 340). Рис. 340. Масс-спектрометрические параметры изомеров замещённых бензола с практически идентичными показателями масс-спектров Поэтому идентифицировать при помощи масс-спектрометрии невозможно. Но они достаточно легко разделяются в варианте газовой хроматографии. Поэтому надо применять сочетание методов, чтобы идентифицировать соединения. 366 377 Количественное определение методом ГЖХ Количественный анализ в колоночных хроматографиях (например, ГЖХ) основан на измерении площади пика, который прямо пропорционален количе- ству вещества в анализируемой пробе. Площадь пика можно измерять умножением высоты пика на его ширину, измеренную на половине его высоты, или компьютерно. Площадь хроматографического пика рассчитывается по формуле 1 . 2 = × × S h W (3.16) Для количественного определения вещества в анализируемой пробе ис- пользуются следующие методы: 1) метод абсолютной градуировки; 2) метод внутренней нормализации; 3) метод внутреннего стандарта; 4) метод внешнего стандарта. Метод абсолютной градуировки Данный метод основан на использовании модельной пробы, и количест- венный расчёт ведётся по площади и высоте хроматографического пика. Вна- чале в колонку вводят серию эталонных растворов с известной концентрацией. Затем проводят измерение полученных хроматографических пиков как по пло- щади, так и по высоте. Строят график зависимости площади эталонного рас- твора от известной концентрации введённого эталонного раствора вещества. Затем проводят исследование площади хроматографического пика после введе- ния в колонку анализируемого раствора вещества. По значению площади пика определяют и концентрацию вещества в анализируемой пробе (рис. 341). Рис. 341. Вид графика при количественном определении методом абсолютной градуировки 367 378 Метод внутренней нормализации Метод основан на приведении к 100% суммы всех площадей всех хрома- тографических пиков на хроматограмме. При этом предполагается, что элюи- руются все анализируемые компоненты, и не один из компонентов не остаётся удержанным неподвижной фазой хроматографической колонки. Расчёт количе- ственного содержания проводится по формуле иссл. иссл. иссл. 100%. S C S = × (3.17) Данный метод позволяет лишь рассчитать относительное содержание компонента в смеси, но не позволяет определить его абсолютную величину. Пример 123. Хроматографированию подвергнут образец масла мятного. На хроматограмме имеются следующие пики: первый (не идентифицирован) площадью 112 мм 2 ; второй (не идентифицирован) — 221 мм 2 , третий (мен- тол) — 245 мм 2 ; четвёртый (метилацетат) — 381 мм 2 ; пятый (ментол) — 1130 мм 2 . Рассчитайте содержание свободного ментола в анализируемом об- разце. Используется формула иссл. иссл. иссл. 100%, жүктеу/скачать 66,35 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|