Фармацевтическая

367
2) пробу в виале растворяют в определённом растворителе в соответствии 
с методикой анализа при помощи автоматической микропипетки (рис. 326); 
Рис. 326.
Растворение пробы в виале 
3) перемешивание пробы в виале (рис. 327); 
Рис. 327.
Процесс перемешивания 
4) программная установка параметров хроматографирования (рис. 328); 
Рис. 328.
Установка параметров хроматографирования 
357

368
5) программная установка параметров изменения температуры колонки 
(рис. 329); 
Рис. 329. 
Установка температуры колонки 
6) помещение виалы в соответствующую ячейку автосемплера (рис. 330); 
Рис. 330.
Виала с анализируемым раствором помещается в ячейку автосемплера 
7) промывка шприца (рис. 331); 
Рис. 331.
Промывка дозирующего шприца в автосемплере 
358

369
8) отбор пробы автосемплером (рис. 332); 
Рис. 332.
Отбор пробы из виалы 
9) программное построение хроматограммы в виде хроматографического 
пика (рис. 333); 
Рис. 333.
Построение хроматограммы 
10) масс-спектрометрия анализируемого образца на максимуме хромато-
графического пика (рис. 334). 
Рис. 334.
Масс-спектрометрия образца 
359

370
3.3.2. СТАНДАРТНАЯ ОПЕРАЦИОННАЯ ПРОЦЕДУРА 
ПРИ РАБОТЕ НА КОМПЛЕКСЕ 
ГАЗОВОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 
Данный СОП представлен с сайта https://www.pharmaguideline.com и пе-
реведён на русский язык автором учебно-методического пособия. 
СОП на калибровку метода газожидкостной хроматографии 
1. Цель: проверить оборудование с целью получения точных и надёжных 
результатов. 
2. Область применения: данная процедура применима для проверки рабо-
тоспособности газового хроматографа отдела контроля качества. 
3. Ответственность. 
3.1. Выполнение: технический помощник. 
3.2. Проверка: менеджер анализа. 
4. Подотчётность: начальник отдела. 
5. Процедура. Периодичность: один раз в три месяца. 
5.1. Управление прибором согласно СОП на прибор. 
5.2. Приготовление растворов: 
5.2.1. Внутренний стандарт: разбавить 95% этанол 25 мл до 
1000 мл водой очищенной. 
5.2.2. Подготовка теста: разбавить 1, 2, 3, 4, 5 мл метанола до 
100 мл раствором внутреннего стандарта. 
5.3. Следовать параметрам, указанным в приложении ниже. 
5.4. Впрыснуть по 2 мл приготовленного раствора и записать хромато-
грамму. 
5.5. Рассчитать соотношение площади метанола к площади внутрен-
него стандарта этанола. 
5.6. Рассчитать коэффициент корреляции. 
5.6.1. Коэффициент корреляции должен быть больше, чем 0,9900. 
5.6.2. Работа прибора считается удовлетворительной, если рассчи-
танный коэффициент корреляции находится в пределах заданного ин-
тервала, в противном случает пользуется СОП на прибор. 
Лаборатория контроля качества. 
Отчёт о проверке производительности газового хроматографа. 
Параметры хроматографирования: 
Колонка Porapack Q. 
Температура колонки 150°С. 
Температура инжектора 200°С. 
Подвижная фаза — азот со скростью 30 мл/мин. 
Объём впрыска 2 мл. 
Внутренний стандарт 25 мл 95% этанол до 1000 мл очищенной воды. 
Тестовые растворы 1, 2, 3, 4, 5 мл метанола в 100 мл раствора внутренне-
го стандарта (табл. 55). 
360

371
Таблица
 55 
Параметры тестовых растворов метанола и этанола 
Метанол, 
% 
Площадь 
пика метанола 
Площадь 
пика этанола 
Отношение 
площадей 
пика метанола 
к этанолу 
Значение 
отношения 
площадей 
1 
1 
1 
1 
2 
2 
2 
2 
1 
1 
1 
2 
2 
2 
3 
1 
1 
1 
2 
2 
2 
4 
1 
1 
1 
2 
2 
2 
5 
1 
1 
1 
2 
2 
2 
Коэффициент корреляции ... (не менее 0,9900). 
3.3.3. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 
МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 
Идентификация 
Первая
 
типовая
 
задача
 
идентификации
— отнесение пиков хромато-
граммы к тому или иному веществу при известном составе компонента 
анализируемой пробы (рис. 335). 
Рис. 335.
Первый вариант задачи по идентификации методом ГЖХ 
Например, мы знаем, что наша проба состоит из трёх веществ, все эти 
вещества выходят из хроматографической колонки. И аналитик должен 
ответить на вопрос: какой пик какому веществу принадлежит? Эта типовая 
задача лежит в основе выполнения количественного определения. Задачу 
решить просто при наличии у аналитика данных веществ. Когда вводятся в 
361

372
хроматографическую колонку в определённой последовательности эти 
вещества, либо в чистом виде, либо в смеси, зная, что растворитель не даёт 
пика, и мы смотрим, через какое время эти вещества выходят их колонки. Мы 
получили хроматограмму, где пики имеют времена удерживания: 60, 80 и 100 с. 
Ввели в колонку вещество «Б» и отмечаем, что оно выходит (образует пик) 
через 80 с и т. д. 
Что делать, когда у аналитика нет в чистом виде этих веществ? Чтобы 
решить эту задачу в конкретном случае, надо знать порядок выхода этих 
веществ из колонки. Если мы знаем, что в смеси присутствуют гомологи, и в 
случае газовой хроматографии знаем, что каждый последующий гомолог 
выходит после предыдущего, например, соответственно, гексан, гептан и октан, 
которые будут выходить в данной последовательности. Если вещества в смеси 
сильно отличаются по своим температурам кипения, и они не обязательно 
являются гомологами, будем знать, какое вещество после какого вещества 
будет выходить по температурам кипения. Если мы сомневаемся в своих 
знаниях по закономерностям удерживания, то необходимо обратиться к 
справочной литературе. 
Вторая
 
типовая
 
задача
 
идентификации
— определение наличия или 
отсутствия в пробе конкретного вещества (рис. 336). Например, присутствует 
ли компонента «А» в пробе? Если у аналитика есть в чистом виде это вещество, 
то вторая типовая задача тоже решается очень просто. Добавляем пробу 
вещества «А» и смотрим, как у нас меняется хроматограмма. Если на 
хроматограмме появляется этот же пик большего размера, то, значит, это и есть 
вещество «А», так как концентрация вещества «А» стала больше, или может 
быть простое совпадание параметров удерживания вещества «А». Вот и 
сложность второй задачи идентификации определяется анализируемыми 
веществами. Есть речь идёт об идентификации неорганических соединений, то 
совпадение параметров удерживания — это редкое явление. То есть аналитики 
знают пару трудно разделяемых веществ и прилагают все усилия, чтобы их 

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: