Фармацевтическая

98
Рис. 44.
Внешний вид пробирок с растворами фурацилина 
при проведении визуальной колориметрии 
Интенсивность окраски анализируемого раствора фурацилина (пробирка 
№ 1) соответствует интенсивности окраски раствора сравнения (пробирка № 2) 
с содержанием 0,4 мл 0,02%-ного стандартного раствора фурацилина. Значение 
0,4 мл подставляется в итоговую формулу расчёта концентрации анализируе-
мого раствора. 
Используется формула 
станд.
станд.
100%
,
V
С
C
a
×
×
=
(1.70) 
C
= 
V
станд.
× 
C
станд.
× 100%/
a
= 0,4 мл × 0,0002 г/мл × 100%/0,5 мл = 
= 0,016%. 
Вывод: содержание фурацилина в исследуемом растворе составляет 
0,016%. 
Метод экстракционной фотоколориметрии 
Экстракционная фотоколориметрия — метод, основанный на образова-
нии окрашенных продуктов, способных экстрагироваться из водных растворов 
соответствующим органическим растворителем с последующим фотоколори-
метрическим определением. Экстрагирование позволяет значительно повысить 
чувствительность определения за счет концентрирования определяемого ком-
понента. 
Экстракцию как метод разделения применяют в фармацевтическом ана-
лизе, особенно для разделения компонентов, входящих в состав лекарственных 
форм. В зависимости от исходной фазы различают экстракцию из твердого ве-
щества и экстракцию из раствора (жидкостную), а по количеству операций од-
нократную и многократную экстракции. Основное условие разделения — вы-
бор экстрагента, не смешивающегося с исходной фазой и легко отделяющегося 
от нее и от экстрагируемого вещества. Экстракцию как метод разделения соче-
тают с фотометрией. 
Экстракционно-фотометрический метод основан на образовании цветных 
продуктов, способных экстрагироваться каким-либо органическим растворите-
лем. Этот метод используют для анализа многих препаратов и лекарственных 
форм. Метод включен в ГФ XI, зарубежные фармакопеи. 
98

99
Для экстракционно-фотометрического определения алифатических, аро-
матических, гетероциклических азотсодержащих лекарственных веществ ис-
пользуют различные группы кислотных красителей: азокрасители (метиловый 
оранжевый, магнезон, кислотный хром темно-синий, тропеолин 00), сульфоф-
талеиновые красители (бромфеноловый синий, бромтимоловый синий, бром-
крезоловый зеленый, бромкрезоловый пурпуровый, тимоловый синий, пирока-
техиновый фиолетовый, ксиленоловый оранжевый), оксиксантеновые красите-
ли (эозин, эритрозин, флоксин, бенгальский розовый А и Б). Указанные краси-
тели образуют с азотсодержащими соединениями и их солями окрашенные 
комплексы или ионные ассоциаты, растворы которых отличаются высокими 
значениями молярных коэффициентов поглощения, что позволяет определять 
малые количества веществ. Окрашенные вещества экстрагируют в органиче-
скую фазу (обычно в хлороформ) и измеряют оптическую плотность с помо-
щью спектрофотометра или фотоколориметра. 
Чаще всего измеряют оптическую плотность раствора ионного ассоциата 
в органическом растворителе. Но в ряде случаев полученный ассоциат разру-
шают введением кислоты в органическую фазу или путем реэкстракции краси-
теля водными растворами кислот или оснований, а затем измеряют абсорбцию 
свободного красителя. Анализ выполняют при оптимальном значении рН вод-
ной среды, которую устанавливают экспериментально для каждого испытуемо-
го препарата. Наряду со стехиометрическим вариантом экстракционно-
фотометрического метода применяют также субстехиометрический, сущность 
которого состоит в однократном экстрагировании ионного ассоциата, что в зна-
чительной степени упрощает методику выполнения анализа и сокращает время 
его выполнения. 
Метод экстракционной фотоколориметрии позволяет осуществлять раз-
деление и увеличивать концентрацию, что приводит к увеличению оптической 
плотности анализируемого вещества. Поэтому часто используется для опреде-
ления лекарственных веществ в лекарственном растительном сырье, настойках, 
экстрактах, мазях с малым содержанием действующих веществ. 
Применение стандартных образцов лекарственных веществ обязательно 
во всех случаях анализа. Фотоколориметрические методы, использующие срав-
нительно несложные приборы, обеспечивают высокую точность (1–2%) и ши-
роко применяются в количественном анализе. Для этого лекарственные веще-
ства должны быть либо сами окрашены, либо образовывать окрашенные про-
дукты реакции при взаимодействии с реактивами. Причём если фотоколори-
метрический метод используется для количественного анализа лекарствен-
ной смеси, то только один компонент должен взаимодействовать с используе-
мым реактивом. Например, для количественного определения веществ, содер-
жащих фенольный гидроксил, применяется реакция образования азокрасителя; 
для определения 3-кетостероидов используется реакция с гидразидом изонико-
тиновой кислоты; количественное определение сложных эфиров, лактонов, 
лактамов и другого основано на гидроксамовой реакции. Полученное окрашен-
ное соединение должно быть достаточно устойчивым и прочным, а также обла-
дать постоянным составом, отвечающим определённой химической формуле. 
99

100
Постоянный состав окрашенного соединения обеспечивает стабильность окра-
ски раствора, что является одним из факторов точности фотоколориметриче-
ского определения. В фотоколориметрическом анализе надо использовать такие 
окрашенные соединения, которые сохраняют устойчивую окраску не менее 10–
15 мин. На устойчивость окрашенных соединений оказывают влияние рН сре-
ды, количество, последовательность добавления реактива. Органические рас-
творители в фотометрическом анализе применяют для разделения лекарствен-
ных веществ, повышения чувствительности и точности определения (экстрак-
ционная фотометрия). 
Пример 55.
Рассчитайте количественное содержание димедрола в 1%-
ном растворе для инъекций (в 1 мл), если 0,5 мл препарата поместили в мерную 
колбу вместимостью 100 мл и довели объем раствора водой очищенной до мет-
ки (раствор А). Затем 3 мл раствора А поместили в делительную воронку, доба-
вили 2 мл 0,1%-ного раствора метилового оранжевого, 5 мл воды очищенной и 
10 мл хлороформа, взбалтывали в течение 2 мин. И после отстаивания хлоро-
формный слой сливали. Оптическая плотность полученного раствора, измерен-
ная на фотоколориметре при 440 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, составила 
0,425. Оптическая плотность стандартного раствора после соответствующей 
обработки с концентрацией 0,000015 г/мл составила 0,415. 
Методика приготовления РСО димедрола. 1 г димедрола, отвечающего 
требованиям ФС, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и после рас-
творения доводят водой очищенной до метки и перемешивают (раствор А). 
0,5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, 
доводят водой до метки и перемешивают (раствор Б). 3 мл полученного раство-
ра помещают в делительную воронку, добавляют 2 мл 0,1%-ного раствора ме-
тилового оранжевого, 5 мл воды очищенной и встряхивают с 10 мл хлороформа 
в течение 2 мин. После отстаивания хлороформного экстракта в течение 2 мин 
измеряют оптическую плотность на фотоколориметре при длине волны 440 нм. 
Молекулы димедрола и метилового оранжевого образуют ионный ассо-
циат следующей структуры: 
100

101
Используется формула 
иссл.
станд.
колбы
иссл.
станд.
пип.
,

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: