Фармацевтическая

168
за растворы сравнения и по отношению к ним измеряют оптическую плотность 
изначального раствора сравнения. При обратном порядке измерения относи-
тельная оптическая плотность 
D
отн.
равна разности оптических плотностей ис-
следуемого раствора (стандартного) и раствора сравнения. 
Пример 109.
Провести количественное определение суммы флавоноидов 
в лекарственном растительном сырье «Трава зверобоя» методом дифференци-
альной спектрофотометрии: аналитическую пробу сырья измельчают до разме-
ра частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г 
(точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вмести-
мостью 150 мл, прибавляют 30 мл 50% этанола. Колбу присоединяют к обрат-
ному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, 
периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Горячее извле-
чение фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы 
частицы сырья не попадали на фильтр. Вату помещают в колбу для экстрагиро-
вания и прибавляют 30 мл 50% этанола. Экстракцию повторяют еще дважды в 
описанных выше условиях, фильтруя извлечение в ту же мерную колбу. После 
охлаждения объем извлечения доводят 50% этанолом до метки и перемешива-
ют (раствор А). 
В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мл раствора А, добав-
ляют 1 каплю разведенной уксусной кислоты, 1 мл раствора алюминия хлорида 
в 95% этаноле и доводят объем раствора 95% этанолом до метки. Через 40 мин 
измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине вол-
ны 415 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения ис-
пользуют раствор, состоящий из 1 мл извлечения, 1 капли разведенной уксус-
ной кислоты и доведенный 95% этанолом до метки в мерной колбе вместимо-
стью 25 мл. Оптическая плотность исследуемого раствора составляет 0,300, 
стандартного раствора рутина — 0,345. Содержание влаги в траве зверобоя со-
ставляет 6%. 
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора ГСО рутина, при-
готовленного аналогично испытуемому раствору. 
Приготовление раствора ГСО рутина: около 0,05 г (точная навеска) ГСО 
рутина, предварительно высушенного при температуре 130–135
°
С в течение 
3 ч, растворяют в 85 мл 95% этаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл при 
нагревании на водяной бане. После охлаждения объем раствора доводят до 
метки тем же растворителем. 
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое 
сырье в процентах вычисляют по формуле 
иссл.
станд.
колбы1
иссл.
иссл.
1станд.
100% 100%
,
(100%
%)
D
a
V
C
D
a V
b
×
×
×
×
=
× ×
×
−
C
иссл.
= (
D
иссл.
× 
a
станд.
× 
V
колбы1
× 100% × 100%)/ 
/(
D
станд.
× 
a
× 
V
1станд.
× (100% – 
b
%)) = 
= (0,300 × 0,05 г × 100 мл × 100% ×100%)/ 
/(0,345 × 1 г × 100 мл × (100% – 6%)) = 4,63%. 
168

169
Вывод: содержание флавоноидов в траве зверобоя в пересчёте на рутин в 
абсолютно сухом сырье составляет 4,63%. 
В выпускной (дипломной) квалификационной работе выпускника 2016 г. 
Д. В. Заец, фармацевтический факультет СГМУ (г. Архангельск), рассматри-
вался вопрос по количественному определению суммы флавоноидов в траве 
нефармакопейного растения лабазника вязолистного (таволги) методом диффе-
ренциальной спектрофотометрии. 
Пример 110.
В ходе экспедиционного обследования района было заго-
товлено воздушно-сухое сырье — трава лабазника вязолистного, которая ис-
пользовалась для определения числовых показателей и химического состава. 
Заготовка проводилась в июле 2015 г. в период цветения растения. 
Для проведения исследований воздушно-сухое сырье измельчали с ис-
пользованием кофемолки BOSCH MKM 6003 (Германия). Для получения сырья 
с установленным размером частиц его просеивали через лабораторные сита с 
диаметром отверстий 1 и 2 мм. Для определения точной массы навесок лекар-
ственного сырья использовались весы аналитические «ВЛР-200» (Россия). 
Для количественного определения суммы флавоноидов применяли реак-
цию комплексообразования с раствором алюминия хлорида, исключая вклад в 
значение оптической плотности других групп соединений в пересчете на рутин. 
С этой целью точную навеску сырья (около 0,5 г), измельченного до размера 
частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, помещали в 
колбу со шлифом вместимостью 50 мл, добавляли 25 мл спирта этилового 
(спирт) 70%, нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 
1 ч. После охлаждения полученное извлечение декантировали в мерную колбу 
вместимостью 50 мл. Процесс экстрагирования повторяли. Объединенные из-
влечения доводили до метки спиртом (раствор А). 
2 мл раствора А помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, добав-
ляли 50 мкл раствора кислоты уксусной (ГОСТ 61-75) разведенной, 2 мл спир-
тового раствора алюминия хлорида 5% и доводили объем раствора до метки 
спиртом. 
Оптическую плотность определяли через 40 мин на спектрофотометре 
СФ-56А в кварцевых кюветах с толщиной слоя 1 см при длине волны 410 нм. 
В качестве раствора сравнения использовали раствор, приготовленный анало-
гично исследуемому, но без добавления 5%-ного раствора алюминия хлорида. 
Параллельно в тех же условиях измеряли оптическую плотность раствора, со-
держащего 1 мл 0,05% РСО рутина, приготовленного аналогично исследуемому 
раствору. 
Для приготовления РСО рутина 0,05 рутина (Sigma-Aldrich, Italy, 207671-
50-9) помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляли 50 мл 95%-
ного этилового спирта и растворяли, нагревая колбу на кипящей водяной бане. 
После растворения рутина раствор охлаждали и доводили объем раствора до 
метки 95%-ным этиловым спиртом. 
В ходе предварительных исследований было установлено, что максимум 
оптической плотности в дифференциальном спектре спиртового извлечения из 
исследуемого сырья совпадал с максимумом оптической плотности дифферен-
169

170
циального спектра РСО рутина и находился в области 410
±
2 нм, рутин был вы-
бран нами в качестве стандартного образца. 
Рис. 74.
Дифференциальные спектры растворов: 

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: