Фармацевтическая

321
Продолж
ение
 
табл
. 50 
Наименование 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Наименование 
приборног
о комплекс
а
ТСХ Sorbfi
l 
Характеристика 
п
р
и
бо
р
н
ог
о 
к
ом
п
л
ек
са 
ТСХ Sorbfi
l 
Количество,
шт. 
Характеристика 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Элюирование 
Камера для опрыскива
- 
ния пластин обнару
жи
- 
вающим реагентом 
с у
становочным 
столиком 
При опрыс
кивании пластины,
разме
- 
щенные на установочн
ом столике,
помещают в камере. Для присоедине
- 
ния камеры к вытя
жно
й вентиляции 
в ее задней 
стенке вырезано отверстие. 
Изготовлена камера из 
материала,
устойчивог
о к агресси
вным средам. 
Размеры: ш
ирина — 320 мм, длин
а — 
150 мм, высота — 220 мм 
1 
Предназначена для без
опас
- 
ного нанесения на хромато
- 
графически
е пластины 
обнару
жив
ающего реагента 
Камера для опрыскива
-
ния Sorbfil 
1 
Камера хроматографи
- 
ческая стек
лянная под 
пластины 10
×
10 см 
Sorbf
il 
1 
Дериватизация
Устройство для конвек
-
тивного нагрева пластин
(электрофе
н) 
1 
321

322
Продолж
ение
 
табл
. 50 
Наименование 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Наименование 
приборног
о комплекс
а
ТСХ Sorbfi
l 
Характеристика 
п
р
и
бо
р
н
ог
о 
к
ом
п
л
ек
са 
ТСХ Sorbfi
l 
Количество,
шт. 
Характеристика 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
П
рибор для обработки 
пластин проявляющей 
жидкостью 
ПОЖ-3
Прибор обеспечивает четкость прояв
- 
ления хроматографических зон и равно
-
мерность окраски фон
а пластины после 
обработки (по сравнению с методом 
опрыскива
ния) и рекоменду
ется при 
количественных расчетах хромато
- 
граммы.
Технически
е характеристики: 
максима
льные размеры пластины, мм,
100×150; ёмкость кюветы, см
3
, 125; 
скорость погру
жения (извлечения), 
м
м
/с
, р
ег
ул
ир
уе
м
ая
о
т 30 до 50; время 
выдержки в погру
женн
ом положен
ии, 
рег
улируемое таймером, с, от 1 до 15; 
питание +12 В через адаптер от сети 
220 В, 50 Гц; потребляемая мощн
ость, 
ВxА, 30. Габаритные размеры, мм,
не более: 2
30×160×330. Масса, кг
, 5 
1 
Прибор предназначен для 
обработки пластин проявляю
- 
щей жидкостью методом 
погру
ж
ения при проведении 
анализов состава веществ 
методом тонкослойной 
хроматографии 
П
ульверизатор Sorbfil 
Стеклянный распылитель пу
львериза
- 
тора совмещает в одном корп
ус
е эжек
- 
ционн
ую
си
стему и емк
ость для раст
- 
вора и у
становлен на полихлорвинило
- 
вой гру
ше. Размеры: высота — 170 мм, 
диаметр ко
рп
уса р
асп
ылителя — 
26
–
30 мм, о
бъем гр
уши
— 110
±
20 мл 
1 
Предназначен для нанесения 
на хроматографически
е 
пластины обнару
ж
ивающего 
реагента 
322

323
Продолж
ение
 
табл
. 50 
Наименование 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Наименование 
приборног
о комплекс
а
ТСХ Sorbfi
l 
Характеристика 
п
р
и
бо
р
н
ог
о 
к
ом
п
л
ек
са 
ТСХ Sorbfi
l 
Количество,
шт. 
Характеристика 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Ус
тр
ой
ст
во
нагревательное УСП-2 
На стадии нанесения проб и стандарт
- 
ных растворов подогрев пластин до 
заданной температ
уры 
обеспечивает 
полу
чение компактного пятна (напри
- 
мер, при ан
ализе на ми
котоксины)
и, соответс
твенно, повышает эффек
- 
тивность и четкость разделения.
Подогрев пластин после нанесени
я 
проб и проявляющего реагента обеспе
- 
чивает 
уско
ренн
ую их 
су
шк
у или
проявление для последующего анализа. 
В УСП-2 для рег
улиров
ания темпера
- 
ту
ры испол
ьзован микропроцессо
рный 
контроллер, что позволило у
лучши
ть 
точностные и фу
нкциональные характе
-
ристики процесса суш
ки пластин ТСХ 
1 
Предназначено для подогрева 
пластин для ТСХ на р
азных 
стадиях анализа 
Устройство 
нагревательное 
для су
шки пластин 
УСП-1 
1 
Оценка: 
детектиро
вание, 
количественное 
определение 
и документи
-
рование 
Ультрафиолетовый 
облучатель
УФС 254/365 
Предназначен для просмотра на пл
асти
-
нах ТСХ хроматограмм веществ актив
- 
ных в у
льтрафиолетовом свете: вещест
- 
ва, флюоресциру
ю
щие на длине волны 
365 нм, видны как цветные пятна на 
темном фон
е; вещества, поглощающие 
УФ-свет на длине волны 254 нМ, видны
как темные пятна на пластине ТСХ, 
содержащей УФ-инди
катор 
1 
Предназначен для просмотра 
на пластинах ТСХ хро
мато
- 
грамм веществ, активных 
в 
уль
тр
аф
ио
ле
то
во
м
с
ве
те
323

324
Продолж
ение
 
табл
. 50 
Наименование 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Наименование 
приборног
о комплекс
а
ТСХ Sorbfi
l 
Характеристика 
п
р
и
бо
р
н
ог
о 
к
ом
п
л
ек
са 
ТСХ Sorbfi
l 
Количество,
шт. 
Характеристика 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Виз
уализат
ор Sorbfil 
с программой 
Sorbf
il TLC View 
Ввод, захва
т и запись изображения 
производится видеосредствами 
и может обрабатываться с помощ
ью 
специализи
рованной программы
Sorbf
il TLC View. Визуализатор 
не требу
ет изменения су
ществ
ую
щих 
методик ТСХ 
1 
Предназначен для запи
си 
и док
ументирования изобра
- 
жений хроматограмм, исполь
- 
зу
емых для 
исследован
ия 
веществ, видимых в дневном 
свете или по люминесценции 
в у
льтрафи
олете с дли
ной волн 
365 и 254 нм 
Денситометр Sorbfi 
на базе осв
етительной 
камеры с п
рограммой
Sorbf
il TLC View 
В состав денситометра входят: 
осветительная камера (дневной свет, 
ультрафиолетовый, спе
ктр излу
чен
ия 
254 и 365 нм); видеокамера цветная, 
блок ввода видеоизображения 
(внешний TV тюнер); программа 
оценки и расчета параметров 
хроматографии 
1 
Предназначен для расчета 
параметров и количественной 
оценки в то
нкослойной 
хроматографии 
Денситометр Sorbfil 
на базе планшетного 
сканера с п
рограммой
Sorbf
il TLC View 
1 
324

325
Продолж
ение
 
табл
. 50 
Наименование 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
Наименование 
приборног
о комплекс
а
ТСХ Sorbfi
l 
Характеристика 
п
р
и
бо
р
н
ог
о 
к
ом
п
л
ек
са 
ТСХ Sorbfi
l 
Количество,
шт. 
Характеристика 
этапа анализа 
ТСХ Sorbfi
l 
П
рограмма 
Sorbf
il TLC View 
Визу
альная оценка цифрового изобра
- 
жения хроматограммы; расчет
ориентировочного содержания 
анализир
уемых веществ в смеси (выра
- 
женного в процентах) по методу норми
-
ро
вк
и;
р
ас
че
т 
ко
нц
ен
тр
ац
ии
в
ещ
ес
тв
а 
в пробе, с использованием стандартов; 
обработка/сохранение цифровых изо
- 
бражений хроматограмм, записанн
ы
х 
как в дневном, так и в ультрафиолето
- 
вом цвете; р
уч
на
я/автоматическая
расстановка треков; сглаживание при 
поиске треков; анализ цветового
состава; оп
ределение о
тношения 
«сигнал/шум»; составление отчета 
рез
ультатов расчета состава веществ 
в смеси или концентрации веществ 
в пробе 
1 
325

336
Рис. 296.
Аппликатор механический Sorbfil 
Рис. 297.
Аппликатор автоматический АПА-2 Sorbfil 
Этап
: элюирование (рис. 298). 
Рис. 298.
Камера для опрыскивания Sorbfil
326

337
Этап
: дериватизация и окрашивание (рис. 299–301). 
Рис. 299. 
Прибор для обработки пластин 
проявляющей жидкостью ПОЖ-3 Sorbfil 
Рис. 300.
Пульверизатор Sorbfil 
Рис. 301.
Устройство нагревательное УСП-2 Sorbfil 
327

338
Этап
: оценка, детектирование, количественное определение и доку-
ментирование (рис. 302
–
307). 
Рис. 302.
Ультрафиолетовый облучатель (кабинет) УФС 254/365 
Рис. 303.
Визуализатор Sorbfil с программой Sorbfil TLC View
Рис. 304.
Денситометр на базе осветительной камеры 
с программой Sorbfil TLC View
328

339
Рис. 305.
Денситометр Sorbfil на базе планшетного сканера 
с программой Sorbfil TLC View
Рис. 306.
Программа Sorbfil TLC View 
Рис. 307. 
Набор стандартный для тонкослойной хроматографии компании «ИМИД» 
с торговой маркой Sorbfil 
329

340
3.2.2. СТАНДАРТНАЯ ОПЕРАЦИОННАЯ ПРОЦЕДУРА 
ПРИ РАБОТЕ НА ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ПЛАСТИНАХ 
В ТОНКОМ СЛОЕ СОРБЕНТА 
Этапы проведения тонкослойной хроматографии 
на хроматографических пластинах Sorbfil 
1. Подготовительный этап. 
1.1. Приготовление системы растворителей для хроматографирования. 
Все реактивы отмеривают либо отведёнными для них цилиндрами, либо 
одноразовыми пластиковыми пипетками. Приготовляемые системы рас-
творителей перемешивают стеклянной палочкой и полностью перелива-
ют в камеру для хроматографирования, которую затем накрывают стек-
лом. 
2. Пробоподготовка биологического материала. Осуществляется по одной 
из стандартных методик, например метод Стаса — Отто, метод 
В. Ф. Крамаренко и др. Методики по пробоподготовке можно найти в научных 
статьях. 
2.1. Создание необходимого уровня рН. Используют универсальную 
индикаторную бумагу. 
2.2. Экстракция искомых веществ. Осуществляется веществами, кото-
рые перечислены в общих и частых методах изолирования анализируе-
мых веществ. Поставить пробы на встряхиватель на 10 мин в режиме, 
уменьшающем вероятность образования эмульсии (около 120 об/мин). 
Флаконы устанавливают в положении лёжа. Допускается энергичное 
равномерное встряхивание руками в течение 10 мин в горизонтальном 
положении. 
2.3. Очистка. После проведения экстракции в тех же флаконах прово-
дят центрифугирование при скорости 3000 об/мин в течение 10 мин. Пе-
ред началом центрифугирования необходимо уравновесить центрифугу, 
поставить в центрифугу напротив флакончика с анализируемым вещест-
вом балластный флакончик, в который предварительно добавляют 10 мл 
воды и 10 мл эфира диэтилового. 
2.4. Разделение фаз. Если использовался неполярный растворитель, то 
одноразовой пластиковой пипеткой осторожно переносят верхний орга-
нический слой в стеклянный стаканчик, наполненный стружкой из 
фильтровальной бумаги приблизительно на 1/4 объёма или эфирного, или 
хлороформного извлечения, избегая попадания водного слоя. Экстракт в 
стаканчике аккуратно перемешивают в течение 2–3 мин, и затем экстракт 
переносят в фарфоровую чашку. На чашку приклеить номер анализа. 
2.5. Упаривание. 
Выпаривательные чашки ставят в вытяжной шкаф под поток тёплого воз-
духа. Упаривают до сухого остатка. 
3. Хроматографирование. 
3.1. Подготовка пластин. Исходную хроматографическую пластину 
(размер 20×20 см) разрезают на две части размером 20×10 см, которые 
330

341
далее разрезают на части размером 5×10 см (4 шт.). Отмечают линию 
старта и линию финиша на расстоянии 1 см от края пластины. На линии 
старта на расстоянии 1 см от края пластины отмечают точки для нанесе-
ния экстрактов и стандартов (расстояние между точками — 1 см). Для 
разметки пластин используются мягкие острые карандаши. При разметке 
на карандаш сильно не надавливают во избежании повреждения слоя 
сорбента. Разрезать пластину острыми ножницами. 
3.2. Нанесение растворов проб и стандартов. Сухой остаток растворя-
ют в хлороформе в количестве 20 мкл. Аккуратно сделать смывы со всей 
поверхности чашки. Для нанесения экстрактов используют чистые ка-
пилляры. Пробу необходимо наносить несколькими порциями в одну 
точку на линию старта, высушивая каждую порцию под струёй тёплого 
воздуха. Размер пятна не должен превышать 3 мм в диаметре (во избежа-
ние бокового размывания на этапе проявления пластины). Одновременно 
наносят на пластины в качестве метчиков стандартные растворы иссле-
дуемых веществ. Стандартные растворы наносят чистыми капиллярами 
после окончания работы с экстрактами, чтобы исключить перекрёстное 
загрязнение. 
3.3. Разделение компонентов. Пластинки аккуратно помещают в хро-
матографическую камеру, которую герметично закрывают. Когда фронт 
растворителя достигнет линии финиша, пластинки вынимают из камеры. 
3.4. Сушка пластинок. Пластинки помещают в струю тёплого воздуха 
и подсушивают в течение 10 мин до полного удаления сопутствующих 
запахов. Пластинки должны быть тщательно высушены. 
3.5. Детектирование. Хроматографическую пластинку последователь-
но обрабатывают реактивами — опрыскивание пластинок из пульвериза-
тора. 
3.6 Интерпретация результатов хроматографирования. Необходимо 
сравнить показатели R
f
анализируемых компонентов и стандартов, окра-
ску пятен, флюоресценцию и т. д. Данная величина непостоянна и зави-
сит от множества факторов. 
Этапы проведения тонкослойной хроматографии 
на хроматографических пластинах Silufol 
1. Нанесение вещества. 
1.1. Пробы наносят при помощи микропипетки. 
1.2. Пробы наносят на расстоянии примерно 15 мм от нижнего конца 
хроматографической пластины и по крайней мере 10 мм от вертикально-
го края листа пластины. 
1.3. Диаметр нанесённых пятен не должен превышать 2 мм. 
1.4. Перед проявлением пятна пластину высушивают на воздухе. 
1.5. В некоторых системах растворителей могут иметь место так на-
зываемые краевые эффекты. Для исключения этих эффектов рекоменду-
ется отрезать оба нижних края хроматографической пластины Silufol. 
331

342
2. Проявление. 
2.1. Для проявления хроматограмм используют обычные хроматогра-
фические камеры. 
2.2. Слой смеси растворителей на дне хроматографической камеры 
должен быть приблизительно 7 мм. 
2.3. В некоторых случаях атмосфера камеры должна быть насыщена 
парами растворителя или смеси растворителей. Для этой цели рекомен-
дуется поместить на стенки камеры фильтровальную бумагу, пропитан-
ную растворителем или смесью растворителей. 
3. Обнаружение пятен. 
3.1. Обнаружение пятен некоторых веществ существенно облегчено 
благодаря присутствию люминесцентного индикатора. 
3.2. Обнаружение пятен путём опрыскивания серной кислотой и по-
следующей карбонизации пламенем необходимо заменить опрыскивани-
ем серной кислотой, содержащей 0,5% анисового альдегида или 0,5% 
водного 35%-ного раствора формальдегида. Этот реактив «анисовый аль-
дегид-серная кислота» применим в качестве универсального реактива для 
обнаружения пятен. Пятна проявляются при комнатной температуре. Для 
получения более яркой окраски пятен хроматограмму выдерживают мак-
симально 3 мин в сушильном шкафу при температуре 60–80°С. 
4. Состав Silufol UV 254; 
— адсорбент: силикагель для хроматографических целей, содержащий 
люминесцентный индикатор; 
— подкладка: фольга алюминиевая; 
— связующее вещество: крахмал. 
Хроматографические камеры. 
В качестве хроматографической камеры 
может быть использована герметически закрываемая емкость любой формы. 
Чаще всего это стеклянные емкости различного размера цилиндрической или 
прямоугольной формы с плоским дном. Необходимое условие — наличие гер-
метичной крышки (пришлифованное стекло, завинчивающиеся крышки и др.). 
Пластиники для ТСХ. 
При проведении анализа можно использовать 
пластинки, выпускаемые промышленным способом или изготовленные вруч-
ную. Рациональнее для работы пользоваться готовыми пластинками, так как 
пластинки, приготовленные вручную, обычно не имеют стандартной толщины 
слоя по всей поверхности. Слой сорбента на пластинке может быть закреплен-
ным или незакрепленным. При работе с незакрепленными слоями чаще всего 
используют алюминия оксид, который равномерно распределяется по пластин-
ке нужного размера с помощью стеклянной палочки или специального устрой-
ства. 
Ход
 
анализа
: 
1) подготовка хроматографической пластины. Проводят разметку пласти-
ны: наносят линию старта от нижнего края пластины на расстоянии в 1,5 см и 
линию финиша на расстоянии 10 см от линии старта (рис. 308); 
332

343
Рис. 308.
Разметка хроматографической пластины 
2) нанесение пробы. Анализируемый раствор наносят микропипеткой, 
микрошприцем или капилляром на линию старта, проведенную на расстоянии 
1–1,5 см от нижнего края пластинки, так, чтобы пятна образцов отстояли друг 
от друга и от краев слоя сорбента не менее чем на 2 см. Каждую следующую 
каплю в одну и ту же точку можно наносить только после полного высыхания 
предыдущей. Нежелательное растекание пятен анализируемых проб при нане-
сении предотвращают путем периодического подсушивания. Для этого можно 
использовать микропипетку, капилляр или микрошприц хроматографический 
(рис. 309); 
Рис. 309. 
Приспособления для нанесения проб на пластину ТСХ 
3) наносимый объём раствора анализируемого вещества от 1 до 10 мкл. 
Размер наносимого пятна должен быть не более 3 мм (рис. 310); 
Рис. 310.
Нанесение раствора анализируемого вещества на линию старта 
333

344
4) процесс хроматографирования. На дно камеры наливают подвижную 
фазу в количестве, достаточном для образования слоя глубиной 0,5 см, камеру 
закрывают и выдерживают для насыщения парами растворителей 30–60 мин. 
После окончательного высыхания нанесенных на линию старта пятен веществ 
пластинку вносят в камеру. Нижний край пластинки при этом должен погру-
зиться в подвижную фазу на 0,5–1 см (рис. 311); 
Рис. 311.
Процесс хроматографирования 
5) обнаружение (детектирование) искомых веществ на пластине. Когда 
фронт растворителя достигнет линии финиша (10–15 см), пластинку вынимают, 
подсушивают до полного удаления растворителя и открывают пятна хромато-
графировавшихся веществ: визуально (для веществ, имеющих собственную ок-
раску); по флюоресценции веществ при облучении пластин УФ-светом или по 
поглощению ультрафиолетового излучения (темные пятна на флюоресцирую-
щем фоне); с помощью хромогенных реагентов (образование окрашенных со-
единений с исследуемыми веществами). Совокупность пятен, полученных по-
сле хроматографирования анализируемого образца и последующего проявления 
их тем или иным способом, называется хроматограммой (рис. 312–316); 
Рис. 312.
Хроматографическая камера УФС-254/365 
для детектирования флюоресцирующих веществ 
в ультрафиолетовом свете 
334

345
Рис. 313.
Камера для опрыскивания хроматографических пластин 
для детектирования веществ, не имеющих собственной окраски 
Рис. 314.
Пульверизатор для опрыскивания хроматографических пластин 
Рис. 315.
Детектирование анализируемых веществ на хроматограмме, 
не имеющих своей собственной окраски, 
но получивших окраску при опрыскивании 
раствором с красителем (например, раствором Дрангендорфа) 
при детекции азотсодержащих лекарственных веществ 
на примере аминазина, папаверина и хинина 
Рис. 316.
Детектирование анализируемых веществ на хроматограмме в лучах 
ультрафиолета на флюоресцирующие вещества 
335

346
6) идентификация. Идентификация компонентов проводится с использо-
ванием свидетелей (метчиков) — известных эталонных веществ сравнения, ко-
торые хроматографируются одновременно с анализируемой пробой на одной и 
той же пластинке. Отношение длины пробега анализируемого вещества к длине 
пробега растворителя — величина Rf служит качественной характеристикой 
соединения на данном сорбенте и в данной системе растворителей. Величина 
Rf зависит от: природы сорбента, толщины слоя, природы подвижной фазы, 
температуры, длины пробега, растворителя (рис. 317). 
Рис. 317.
Расчёт индекса удерживания R
f
Величина R
f
— отношение длины пробега анализируемого вещества (
а
) к 
длине пробега растворителя (
b
). 
3.2.3. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 
В ТОНКОМ СЛОЕ СОРБЕНТА 
В работе С. Я. Овчинниковой, Т. Д. Мезеновой, Т. В. Орловской (2013) 
представлена методика идентификации и количественного определения, вали-
дация таких методик ТСХ кислоты хлорогеновой в корневищах с корнями лю-
бистока лекарственного (Livisticum officinale Koch.) семейства сельдерейных 
(Apiaceae). 
Пример 122.
Сырьём для анализа являлись высушенные корневища и 
корни, заготовленные от растений, культивируемых в условиях Кавказских 
Минеральных Вод в период 2010–2011 гг. В качестве экстрагента использовали 
70%-ный этиловый спирт в соотношении 1:2. Извлечение получали методом 
реперколяции (повторная или многократная перколяция). Сущность метода за-
ключалась в том, что сырье делили на части и каждую последующую его пор-
цию экстрагировали вытяжкой, полученной из предыдущей. 
336

347
Для приготовления стандартного образца 0,1 г хлорогеновой кислоты 
(точная навеска) помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяли в 
95%-ном этиловом спирте и доводили спиртом раствор до метки. Концентрация 
стандартного образца хлорогеновой кислоты составила 1 мкг/мкл. 
Для идентификации и количественного определения использовали метод 
ТСХ с последующей денситометрической обработкой хроматограмм. Хромато-
графирование проводили на пластинках марки Sorbfil (г. Краснодар) размером 
10×15 см. В качестве подвижной фазы использовали систему 
n
-бутанол — ле-
дяная уксусная кислота — вода (5:4:1). Высота подъема растворителя 9 см. Де-
тектирование проводили парами аммиака. 
На линию старта хроматографической пластинки длиной 15 см наносили 
0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0 мкл раствора стандартного образца с содержанием 
хлорогеновой кислоты 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0 мкг соответственно. На этой же 
пластинке обозначали четыре линии контрольных треков, на которые наносили 
спиртовое извлечение объемом 20 мкл. Пробы наносили при помощи микро-
шприца МШ-10 (агат). Пластинки помещали в камеру для хроматографирова-
ния объемом 2000 см
3
, насыщенную парами растворителя. После подъема рас-
творителя на необходимый уровень пластинки вынимали, высушивали в вы-
тяжном шкафу при комнатной температуре до удаления паров растворителя. 
Через 10–15 мин на пластинке на воздухе появляются пятна тёмно-коричневого 
цвета. Для усиления окраски пластинку держали над парами аммиака концен-
трированного. 
Далее пластинки сканировали при помощи планшетного сканера 
HP Scanjet 3670 (разрешение 100 dpi) и осуществляли их цифровую обработку с 
помощью компьютерной программы «Видеоденситометр Sorbfil v1.7» 
(г. Краснодар). Количественное определение проводили методом абсолютной 
калибровки (внешнего стандарта), по градуировочному графику зависимости 
«масса вещества — площадь пика» (линейная аппроксимация). 
Определение хроматографических характеристик. Для выбора наиболее 
эффективных пластинок исследовали пластинки следующих марок: ПТСХ-П-В-
УФ, ПТСХ-П-А-УФ и ПТСХ-АФ-В-УФ (г. Краснодар). Эффективность пла-
стинки определяли по числу теоретических тарелок (NTR) и асимметрии (As) 
пятен стандартных образцов (табл. 51). 
Таблица
 51 
Показатели эффективности различных типов пластинок 
Тип пластинки 
NTR 
As 
ПТСХ-П-В-УФ 
1308
±
250 
0,67
±
0,09 
ПТСХ-П-А-УФ 
694
±
185 
0,48
±
0,03 
ПТСХ-АФ-В-УФ 
604
±
121 
0,39
±
0,03 
Наиболее эффективными являются пластинки марки ПТСХ-П-В-УФ, ко-
торые были выбраны для определения хлорогеновой кислоты в спиртовом из-
влечении (табл. 50). 
337

348
Чувствительность детектирующего реагента устанавливали по величине 
предела обнаружения, нанося точно известное количество раствора стандартно-
го образца хлорогеновой кислоты на хроматографическую пластинку. Готовили 
растворы стандартного образца с концентрациями 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1,0 и 
далее — до 3 мкг/мкл. На пластинку наносили по 1 мкл приготовленных рас-
творов и хроматографировали. Предел обнаружения составляет 0,5 мкг/мкл. 
Специфичность
 
определяли по величине R
f
пятна контрольного трека, ко-
торое должно соответствовать R
f
пятен стандартного образца (0,56
±
0,02). На 
треках контрольного образца визуально обнаруживалось пятно тёмно-
коричневого цвета с R
f
= 0,54, что соответствует окраске и R
f
стандартных об-
разцов (рис. 318). 
Рис. 318.
Оцифрованная хроматограмма раствора стандартного образца 
хлорогеновой кислоты и спиртового извлечения: 

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: