Введение
Бруцеллез животных имеет широкое рас
-
пространение в Казахстане, наносит огромный
ущерб животноводству и представляет большую
угрозу для здоровья людей. Организация и про
-
ведение комплекса специальных мероприятий,
направленных на предупреждение инфекцион
-
ных болезней животных и получение полно
-
ценных и безопасных продуктов животноводства,
были и остаются одной из главных задач ветери
-
нарной службы. Предотвращение эпизоотии
позволяет поддерживать и развивать необхо
-
димые межхозяйственные, межрегиональные и
государственные связи, а успешная борьба с бо
-
лезнями животных, опасных для человека, обес
-
печивает охрану здоровья населения страны.
При наличии большого количества исследова
-
тельских работ, посвященных вопросам пато
-
генеза, диагностики и профилактики бруцеллеза,
на современном этапе развития науки продол
-
жается поиск наиболее эффективных методов
диагностики и понимания процесса патогенеза
при бруцеллезе [1, с.40].
После попадания в организм бруцеллы по
-
двергаются фагоцитозу, зачастую незавершен
-
ному. Незавершенность фагоцитоза лежит в ос
-
нове способности бруцелл к интерецеллюляр
-
ному паразитированию. Фагоцитоз бруцелл в
клетках моноцитарно
-
макрофагальной системы
являются важным механизмом бруцеллезного
процесса. Активированный кислород
-
основной
продукт фагоцитоза, с которым связано образо
-
вание воспалительного очага. Сопротивляе
-
мость организма животного влиянию неблаго
-
приятных для здоровья факторов и вероятность
возникновения болезни во многом определяются
состоянием биохимических систем неспецифи
-
ческой резистентности, надежностью (запасом
прочности) механизмов адаптации [2, с.59, 3,
с.
2717].
Согласно современным представлениям,
многие жизненно
-
важные метаболические и фи
-
зиологические процессы, протекающие в орга
-
низме, тесно связаны со свободно
-
радикальным
окислением. В тоже время этот вид окисления
является универсальной неспецифической ос
-
новой патогенеза различных заболеваний и
негативного воздействия факторов среды и
технологического стресса у животных. Патогене
-
тическими причинами многих заболеваний явля
-
ются свободные радикалы. Они являются спут
-
никами большинства обменных процессов орга
-
низма и увеличивают свою численность при
неблагоприятных условиях внешней среды. Изу
-
чение систем, контролирующих процессы пере
-
кисного окисления липидов и антиоксидантной
защиты, имеет существенное значение для
оценки ранних обратимых изменений в организ
-
ме животного. Развитие окислительного стресса
может сопровождаться изменением антиокси
-
дантной активности не только сыворотки крови,
но и других биологических жидкостей. Свобод
-
ные радикалы, образуются непрерывно в ка
-
честве побочных продуктов во многих нор
-
мальных клеточных реакциях, но могут вызвать
различные повреждения в организмах. Оксид
азота (NO) является свободным радикалом, его
молекулы синтезируется в организме из арги
-
нина при участии кислорода и НАДФ ферментом
синтазой оксида азота. Окись азота способст
-
вует поддержанию гомеостаза сосудов, вызывая
расслабление гладких мышц стенок сосудов и
угнетая их рост и утолщение интимы сосудов, а
также угнетая адгезию и агрегацию тромбоцитов
и адгезию лейкоцитов к эндотелию сосудов [4,
с.1740, 5, с.503].
В лабораторной практике в последние
годы значительно возрос интерес к проблеме пе
-
рекисного окисления липидов (ПОЛ) в биологи
-
ческих мембранах. Свободнорадикальное окис
-
ление представляет собой процесс непосредст
-
венного переноса кислорода
на субстрат с
образованием перекисей, альдегидов, кетонов.
Свободно
-
радикальное окисление ненасыщен
-
ных жирных кислот имеет прямое отношение, как
к нормальной жизнедеятельности, так и к возник
-
ВЕТЕРИНАРИЯ
47
новению, течению, исходу многих патологи
-
ческих состояний [5, с.903, 6, с.215].
Одним из самых значимых вторичных
продуктов ПОЛ является малоновый диальдегид
(МДА), на долю которого приходится 40% всех
карбонильных соединений. Определение МДА в
сыворотке, моче или гомогенатах тканей часто
применяется в качестве
показателя активности
процессов ПОЛ. Отмечается повышение уровня
МДА при многих инфекционных заболеваниях.
Каталаза —
гемосодержащий фермент,
преимущественно находится в пероксисомах, где
образуется наибольшее количество перекиси
водорода, а также в лейкоцитах, где она за
-
щищает клетки от последствий «респираторного
взрыва». В основе антиоксидантного действия
каталазы лежит реакция разложения перекиси
водорода, которая может инициировать обра
-
зование самой активной формы окиси водорода.
Биологическая роль каталазы заключается в
деградации перекиси водорода,образующейся в
клетках в результате действия ряда флаво
-
протеиновых оксидаз (ксантиноксидазы,
глюкозо
-
оксидазы, моноаминоксидазы и др.), и обеспе
-
чении эффективной защиты клеточных структур
от разрушения под действием перекиси водо
-
рода.
Нет сомнений, что при нарушениях меха
-
низмов регуляции процессов свободно радикаль
-
ного окисления, сопровождающихся избыточным
накоплением радикалов, могут значительно
повреждаться биомембраны, что в настоящее
время
признается универсальной неспецифичес
-
кой основой патогенеза самых различных забо
-
леваний. Постоянное образование прооксидан
-
тов в живых организмах уравновешено их
дезактивацией антиоксидантами, поэтому для
поддержания гомеостаза необходима непрерыв
-
ная регенерация антиоксидантной способности.
Отсутствие или сбой этой непрерывности со
-
провождается накоплением окислительных про
-
цессов и заболеваний, таких как воспаление, ре
-
перфузионное заболевание, старение, канцеро
-
генез и др [7, с.99, 8, с.27, 9, с.40].
Целью исследований явилось определе
-
ние некоторых компонентов перекисного окисле
-
ния липидов у коров при бруцеллезе. Для дости
-
жения цели нами были определены следующие
задачи:
-
Исследовать содержание внутриклеточ
-
ного антиоксиданта каталазы эритроцитов при
бруцеллезе.
-
Определить уровень содержания малоно
-
вого диальдегида и оксида азота в плазме крови.
Материалы и методы
Объектами исследования явилась кровь
больных бруцеллезом коров (
n
=20), по резуль
-
татам РБП проведенных в ЗК филиале РВЛ. В
качестве контроля были взята кровь от 10 здо
-
ровых коров.
Эритроциты предварительно были подго
-
товлены по следующей методике:
1
. Отобранная кровь стабилизировалась
гепарином и центрифугировалась при 3
000 об/
мин в течении 10 минут.
2. Отбирали супернатант
и проводили от
-
мывку 0,9% раствором
NaCl
–
данный этап
подготовки повторяли три раза.
3. Осадок эритроцитов разбавляли в
соотношении 1:1 с 0,9% раствором
NaCl
Определения гемоглобина (
Hb
) проводили
по методике
Salvati A.M.et all, 1981 [10,
с.707],активность каталазы (
CAT
) по методу
Aebi
H
, 1984 [11, с.122], определения уровня малоно
-
вого диальдегида (
MDA
) определяли по
Gutterige
J.M
. 1995 [12, с.278]. Уровень оксида азота (
NO)
в сыворотке крови овец определяли фермента
-
тивной реакцией Грисса [13, с.186].
Измерения уровня концентраций
CAT,
MDA
и
NO
проводили на спектрофотометре
CARY-
50 согласно инструкции по его эксплуа
-
тации.
Результаты исследований и их обсуж
-
дение
В ходе проведенных исследований были
определены показатели каталазы, малонового
диальдегида и оксида азота у коров больных
бруцеллезом.
Таблица 1 –
Уровень гемосодержащегося фермента каталазы, малонового диальдегида и
оксида азота в контрольной и исследуемой группе.
Как видно из таблицы 1 при бруцеллезе в
организме больного животного наблюдается по
-
вышение уровня малонового диальдегида в
среднем до 38.61 nmol/ml
и оксида азота до
58.20 μmol/L, при нормальном уровне 28.26
nmol/ml и 38.07 μmol/L соответственно в конт
-
рольной группе. При этом уровень активности
каталазы составил 71.16
u/gHb
при бруцеллезе,
тогда как в контрольной группе данный пока
-
затель составил 1
80.53 u/gHb.
Показатель
Исследуемая группа (
n=20)
Контрольная группа (
n=10)
CAT u/gHb
71.16±1.41
180.53±3.77
NO (μmol/L)
58.20 ± 6.50
38.07 ± 2.40
MDA nmol/ml
38.61±0.65
28.26±0.83'
ВЕТЕРИНАРИЯ
48
Диаграмма 1 - Уровень гемосодержащегося фермента каталазы, малонового
диальдегида и оксида азота в контрольной и исследуемой группе.
71,16
58,20
38,61
180,53
38,07
28,26
0,00
20,00
40,00
60,00
80,00
100,00
120,00
140,00
160,00
180,00
200,00
CAT u/gHb
NO μmol/L
MDA nmol/ml
Исследуемая группа (n=20)
Контрольная группа (n=10)
Оксид азота играет важную роль в макро
-
фаг опосредованной цитотоксической активности
против различных патогенов, в том числе бак
-
терий, вирусов, грибов и простейших. Оксид
азота вызывает торможение определенных фер
-
ментов, ответственных за окислительное фосфо
-
рилирование, через которое синтезируется АТФ
и происходит гликолиз. Полученные данные
указывают на развитие оксидативного стресса об
этом говорит повышение уровня малонового
диальдегида в крови больных бруцеллезом жи
-
вотных значительно возросло образование про
-
дукта окисления липидов, это явно указывает на
тот факт, что идет развитие патогенеза и АОС не
способна держать в нормальных пределах уро
-
вень малонового диальдегида, что несомненно
приведет, к развитию оксидативного стресса,
об
этом свидетельствует снижение уровня каталазы
и повышение образования
NO
, а вследствие
этого усиление патогенетического воздействия
бруцелл (Диаграмма 1). Это связано с тем, что
после попадания в организм бруцеллы подвер
-
гаются фагоцитозу, зачастую незавершенному.
Незавершенность фагоцитоза лежит в основе
способности бруцелл к внутриклеточному пара
-
зитированию и во многом определяет особен
-
ности течения бруцеллезной инфекции –
дли
-
тельность процесса и склонность к латентному
течению. Фагоцитоз и персистенция бруцелл в
клетках моноцитарно
-
макрофагальной системы
являются важным механизмом бруцеллезного
процесса. Активированный кислород
-
основной
продукт фагоцитоза, с которым связано образо
-
вание воспалительного очага.
Выводы
Таким образом в ходе исследований
выявлен дисбаланс антиоксидантной системы у
больных бруцеллезом коров, проявляющийся в
снижении уровня активности внутриклеточного
антиоксиданта каталазы в эритроцитах. У
больных
бруцеллезом
коров
наблюдается
активация перекисного окисления липидов с
закономерным повышением уровня малонового
диальдегида в плазме крови и уровня оксида
азота. Увеличение в сыворотке крови уровня ок
-
сида азота у крупного рогатого скота, происходит
из
-
за активации синтеза NО в макрофагах в
ответ на бактериальные липосахаридов. С дру
-
гой стороны, увеличение МДА может быть ре
-
зультатом избыточной продукции радикалов вто
-
ричным по отношению к бруцеллам дейст
-
вующих на мембранные липидов. Закономерные
изменения показателей прооксидантной системы
и антиоксидантной защиты организма можно
использовать
в
качестве
дополнительного
критерия патогенеза бруцеллеза.
Литература:
1. Иванов Н.П. Методологические основы
борьбы с бруцеллезной инфекцией в совре
-
менных условиях. // Научно
-
практический журнал
Ветеринария. –
2008. -
№1. –
С
. 40-45.
2. Boschiroli M.L., Foulongne V., O'Callaghan
D. Brucellosis: a worldwide zoonosis. // Curr Opin
Microbiol.
–
2001. № 4(1). –
P. 58-64.
3. Halling S.M., Peterson-Burch B.D., Bricker
B.J., Zuerner R.L., Qing Z., Li L.L., Kapur V., Alt
D.P., Olsen S.C. Completion of the genome
sequence of Brucella abortus and comparison to the
highly similar genomes of Brucella melitensis and
Brucella suis. // J Bacteriol.
–
2005 -
№ 187(8). –
P.
2715-2726.
4. Urrutia L.L., Alonso A., Nieto M.L., Bayon
Y., Orduna A., Crespo M.S. Lipopolysaccharides of
Brucella abortus and Brucella melitensis induce
nitric oxide synthesis in rat peritoneal macrophages.
// Infect Immun.- 2000. -
№ 68. –
P. 1740
–
1745.
5. Lykkesfeldt J., Svendsen O. Oxidants and
antioxidants in disease: Oxidative stress in farm
animals // The Veterinary Journal.
–
2007. -
№173.
-
P. 502
–
511.
6. Gutteridge J.M.C., Beard A.P.C., Quinlan
G.J.
Superoxide-dependent
lipid
peroxidation.
Problems with the use of catalase as a specific
ВЕТЕРИНАРИЯ
49
probe for feuton-derived hydroxyl radicals //Bio-
chem. Biophys. Res. Commun.-1983.-V.l 17, N3.-
P.901-907.
7. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова
Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и
патофизиологический аспекты.
//
МАИК «Наука/
Интерпериодика», 2001. –
343 с.
8. Turk, R., Juretic
, D., Gereš, D., Svetina, A.,
Turk, N., Flegar-
Meštri
c, Z. Influence of oxidative
stress and metabolic adaptation on PON1 activity
and MDA level in transition dairy cows// Anim
Reprod Sci. - 2008. -
№ 108. –
P. 98-106.
9. Weindruch, R., Keenan, K.P., Carney, J.K.,
Fernandes, G., Feures, R.J., Floyd, R.A., Halter,
J.B., Ramsey, J.J., Richardson, A., Roth, G.S.,
Spindler, S.R. Caloric restriction mimetics: metabolic
interventions// J Gerontol.- 2001. -
№ 56. –
P. 20-33.
10. Valko, M., Izakovic, M., Mazur, M., Rho-
des, C.J, Telser, J. Role of oxygen radicals in DNA
damage and cancer incidence.// Mol Cell Biochem. -
2004. -
№ 266. P. 37
-56.
11. Salvati A.M., Tentori L.: Hemoglobi-
nometri in human blood. // Method in Enzymol.
–
1981 -
№ 76.
- P. 707-715.
12. Aebi H: Catalase in vitro.// Method
Enzymol.
–
1984. № 105. –
P. 121-126.
13. Gutterige J.M.: Lipid peroxidation and
antioxidants as biomarkers of tissue-damage.// Clin
Chem. 1995. -
№ 41.
- P. 277-290.
14. Burgner D, Rockett K, Kwiatkowski D. Ni-
tric oxide and infectious diseases.//Arch Dis Child, -
1999. -
№ 81. –
P. 185
–
188.
References:
1. Ivanov N.P. Metodologicheskie osnovy bor-
by s brucellioznoi infeckciei v sovremennyh uslo-
viyak. // Nauchno-practicheskii zhurnal Veterinariya.
–
2008. -
№1. –
S. 40-45.
2. Boschiroli M.L., Foulongne V., O'Callaghan
D. Brucellosis: a worldwide zoonosis. // Curr Opin
Microbiol.
–
2001. № 4(1). –
P. 58-64.
3. Halling S.M., Peterson-Burch B.D., Bricker
B.J., Zuerner R.L., Qing Z., Li L.L., Kapur V., Alt
D.P., Olsen S.C. Completion of the genome
sequence of Brucella abortus and comparison to the
highly similar genomes of Brucella melitensis and
Brucella suis. // J Bacteriol.
–
2005 -
№ 187(8). –
P.
2715-2726.
4. Urrutia L.L., Alonso A., Nieto M.L., Bayon
Y., Orduna A., Crespo M.S. Lipopolysaccharides of
Brucella abortus and Brucella melitensis induce
nitric oxide synthesis in rat peritoneal macrophages.
// Infect Immun.- 2000. -
№ 68. –
P. 1740
–
1745.
5. Lykkesfeldt J., Svendsen O. Oxidants and
antioxidants in disease: Oxidative stress in farm
animals // The Veterinary Journal.
–
2007. -
№173.
-
P. 502
–
511.
6. Gutteridge J.M.C., Beard A.P.C., Quinlan
G.J. Superoxide-dependent lipid peroxidation. Prob-
lems with the use of catalase as a specific probe for
feuton-derived hydroxyl radicals //Biochem. Biophys.
Res. Commun.-1983.-V.l 17, N3.- P.901-907.
7. Zenkov N.K., Lankin V.Z., Mebycykova
E.B. Okislitelnyi stress: Biohimicheskii I patophisio-
logicheskii aspecty. // MAIK «Nauka/Interperiodica»,
2001.
–
343 s.
8. Turk, R., Juretic
, D., Gereš, D., Svetina, A.,
Turk, N., Flegar-
Meštri
c, Z. Influence of oxidative
stress and metabolic adaptation on PON1 activity
and MDA level in transition dairy cows// Anim
Reprod Sci. - 2008. -
№ 108. –
P. 98-106.
9. Weindruch, R., Keenan, K.P., Carney, J.K.,
Fernandes, G., Feures, R.J., Floyd, R.A., Halter,
J.B., Ramsey, J.J., Richardson, A., Roth, G.S.,
Spindler, S.R. Caloric restriction mimetics: metabolic
interventions// J Gerontol.- 2001. -
№ 56. –
P. 20-33.
10. Valko, M., Izakovic, M., Mazur, M., Rho-
des, C.J, Telser, J. Role of oxygen radicals in DNA
damage and cancer incidence.// Mol Cell Biochem. -
2004. -
№ 266. P. 37
-56.
11. Salvati A.M., Tentori L.: Hemoglobinome-
tri in human blood. // Method in Enzymol.
–
1981 -
№ 76.
- P. 707-715.
12. Aebi H: Catalase in vitro.// Method Enzy-
mol.
–
1984. № 105. –
P. 121-126.
13. Gutterige J.M.: Lipid peroxidation and
antioxidants as biomarkers of tissue-damage.// Clin
Chem. 1995. -
№ 41.
- P. 277-290.
14. Burgner D, Rockett K, Kwiatkowski D.
Nitric oxide and infectious diseases.//Arch Dis Child,
- 1999. -
№ 81. –
P. 185
–
188.
Сведения об авторе
Какишев Мурат Галиханович
- PhD
докторант специальности 6
D120100
–
«Ветеринарная
медицина» кафедры «Незаразные болезни и морфология» Западно
-
Казахстанского аграрно
-
технического университета имени Жангир хана, магистр ветеринарии, г Уральск, ул. Жангир
хана
51,
тел
. 87058042610,
факс
87112501629, e-mail: kakishev_murat@mail.ru
Kakishev Murat Galohanovich - PhD student specialty 6D120100 -
«Veterinary medicine» Department
of «Non
-
infection diseases and morphology» West
-Kazakhstan agrarian technical university named after
Zhangir khan, master of veterinary, Uralsk, Zhangir khan avenue 51, phone. 87058042610, fax
87112501629, e-mail: kakishev_murat@mail.ru
Какишев Мурат Галиханович
–
6D120100
–
Жәңгір хан атындағы Батыс Қазақстан аграрлық
-
техникалық университетінің «Жұқпалы емес аурулар және морфология» кафедрасының
«Ветеринарлық медицина» мамандығы бойынша PhD докторанты, Орал қ. Жәңгір хан кӛш. 51,
тел. 87058042610, факс 87112501629, e
-mail: kakishev_murat@mail.ru
ВЕТЕРИНАРИЯ
50
УДК 619:617.5:577.27:636.32/.38
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ДИНАМИКА КЛИНИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ
ЭКЗОТИЧЕСКИХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ЛЕЧЕНИИ СПОНТАННЫХ РАН
В УСЛОВИЯХ АЛМАТИНСКОГО ЗООПАРКА
Касымбеков И.
-
магистрант кафедры акушерства, хирургии и биотехнологии воспроиз
-
водства животных Казахского национального аграрного университета
Туркеев М.
-
магистрант кафедры акушерства, хирургии и биотехнологии воспроизводства
животных Казахского национального аграрного университета
Орынханов К.А.
-
к.в.н., ассоциированный профессор кафедры акушерства, хирургии и
биотехнологии воспроизводства животных Казахского национального аграрного университета
В статье приведена сравнительная динамика клинических показателей при лечении
спонтанных ран экзотических животных мазью и антисептическим раствором на основе
природного минерала шунгит в условиях Алматинского зоологического парка. Для оценки процесса
заживления ран проводили клинические исследования и морфометрию ран у диких животных со
спонтанными ранами в различных участках тела. Полученные данные свидетельствуют, что, у
животных после получения травмы наблюдается ухудшение аппетита, беспокойство, повышение
температуры тела, наблюдается сильная болезненность.
Согласно приведенным данным, в течении всего периода исследований, были созданы две
группы животных, контрольная и подопытная, проводили комплексное лечение, при первой фазе
раневого процесса проводили короткий новокаиновый блок с антибиотиками, поверхность раны
очищали антисептическими растворами и шунгитовой водой, во второй фазе раневого процесса
использовали линимент Вишневского в контрольной группе и мазь на основе шунгита в
подопытной группе. Согласно приведенным данным заметная разница в динамике клинических
признаков и площади ран наблюдается на 7
-
е сутки, раневая поверхность сократилась до
9,49±0,47 см
2
у животных контрольной группы и до 8,80±0,84 см
2
в подопытной группе, а на 14
-
е
сутки у всех животных по краям ран хорошо выражен эпидермальный валик шириной 0,3
-
0,5 см,
воспалительный отек тканей и их напряжение исчезает, кожа становится подвижной. По данным
морфометрии площадь раневой поверхности составляет у животных контрольной группы 56,09
%, а у животных подопытной группы 40,8% от первоначальных показателей.
Полная эпители
-
зация ран у животных наступала в среднем на 24
-
27 сутки исследования у животных контрольной
группы и на 22 –
23 сутки у животных опытной группы. В отношении клинических признаков
принципиальной разницы
не отмечается.
Приведенные в статье данныесвидетельствуют, об эффективности применения
препаратов на основе природного минерала шунгит, и, что, сроки заживления ран сокращаются
на 2
-
4 дня по сравнению с традиционным методом.
Достарыңызбен бөлісу: |