Хламидии : иллюстрированное учебное пособие



Pdf көрінісі
бет10/19
Дата05.12.2022
өлшемі1,37 Mb.
#54996
1   ...   6   7   8   9   10   11   12   13   ...   19
Байланысты:
UMK 2017 022

 
Диагностика хламидиозов 
При диагностике хламидиозов чаще всего используют цитоскопические 
методы, иммуноморфологические методы, методы иммуноферментного анализа и 
метод полимеразной цепной реакции.
Материалом для исследования служат выделения и соскобы из уретры у 
мужчин, из уретры и цервикального канала у женщин при урогенитальном 
хламидиозе, соскобы с конъюнктивы у больных трахомой, мокрота при 
хламидийной пневмонии и другие выделения.
Цитоскопические методы направлены на обнаружение цитоплазматических 
включений. Исследуемый материал наносят на предметное стекло, высушивают, 
фиксируют и окрашивают. Наиболее распространенный метод окраски – по 
Романовскому-Гимзе. При этом цитоплазма клеток окрашивается в голубой цвет, 
ядра клеток – в фиолетово-синий цвет, а цитоплазматические включения хламидий 
определяются в виде темно-синих (на стадии элементарных телец) или розовых (на 
стадии ретикулярных телец) микроколоний.
Иммуноморфологические методы направлены на обнаружение антигенных 
субстанций хламидий в исследуемом материале. При этом антитела 
диагностической антихламидийной сыворотки соединены с какой-либо меткой – 
люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или ферментной (энзим-меченые антитела). К 
иммуноморфологическим методам в первую очередь относятся метод прямой 
иммунофлюоресценции и метод непрямой иммунофлюоресценции. 
Метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ-метод) предусматривает 
прямое выявление антигенов хламидий. Исследуемый материал обрабатывают 
люминесцирующей сывороткой, содержащей ФИТЦ-меченые моноклональные 
антитела. При люминесцентной микроскопии включения хламидий определяются в 
виде зеленой или желто-зеленой флюоресценции на коричнево-оранжевом фоне 
цитоплазмы клеток. Включения могут иметь зернистую или гомогенную структуру. 
Для проведения этого метода различные фирмы выпускают диагностические наборы 
(рисунок 14).


14 
Рисунок 14 – Диагностический набор для выявления хламидийных антигенов 
методом прямой иммунофлюоресценции
В частности, при использовании ХламиСлайда готовят мазок-отпечаток, 
высушивают и фиксируют его. На приготовленный мазок наносят препарат 
“ХламиСлайд” с ФИТЦ-мечеными хламидийными антителами и после экспозиции 
микроскопируют 
в 
люминесцентном 
микроскопе. 
Результат 
считается 
положительным, если в мазке регистрируется ярко-зеленое свечение телец 
хламидий, расположенных внеклеточно или внутриклеточно. Эпителиальные клетки 
окрашиваются в оранжево-красный цвет. При отрицательном результате 
специфическое свечение отсутствует (рисунок 15).
Рисунок 15 – C. trachomatis в пораженных клетках. ПИФ-метод. 
Реагенты одних фирм представляют собой ФИТЦ-меченые моноклональные 
антитела к основному белку наружной мембраны хламидий (МОМР), а реагенты 
других фирм - моноклональные антитела к ЛПС хламидий. В России также 
выпускаются диагностические наборы, содержащие моноклональные антитела к 
ЛПС хламидий и моноклональные антитела к белковым антигенам хламидий. 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   6   7   8   9   10   11   12   13   ...   19




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет