Исследование воздуха, воды, смывов с объектов внешней среды
жүктеу/скачать 60,61 Kb.
|
Материал для подготовки ТФП №11
- Бұл бет үшін навигация:
- 2 недели
| Недостатки метода:
а) необходимость содержания животных и ухода за ними; б) повторное использования кроликов только спустя 3 суток, если испытуемый препарат был апирогенным, и через 2 недели, если в опыте у животного повышение температуры было более 0,50С. в) невозможность определения количества эндотоксинов в исследуемом препарате; г) возможное несоответствие величины пирогенных доз для кролика и человека (описаны случаи апирогенности раствора для кролика и пирогенной реакции у человека, так как кролики менее чувствительны к эндотоксинам, чем человек). д) невозможность исследования ряда инъекционных форм нейролептиков и транквилизаторов из-за токсического действия на организм кролика. Бактериальные эндотоксины. (ГФ XII, стр. 128, ОФС 42-0062-07) Определение содержания бактериальных эндотоксинов проводят с помощью реактива, представляющего собой лизат клеток крови (амёбоцитов) мечехвостов Limulus polyphemus (ЛАЛ-реактив – Лимулюс Амебоцитов Лизат) или Tachypleus tridentatus (ТАЛ-реактив). В результате реакции с эндотоксином происходит помутнение реакционной смеси и увеличение её вязкости вплоть до формирования плотного геля, образование которого служит индикатором наличия в пробе бактериальных эндотоксинов – гель-тромб тест. Метод используется для определения соответствия содержания бактериальных эндотоксинов предельному содержанию эндотоксинов, указанному в частной фармакопейной статье («Метод А. Качественный анализ») и для определения содержания бактериальных эндотоксином в лекарственном препарате («Метод В. Количественный анализ»). Содержание бактериальных эндотоксинов выражается в единицах эндотоксина (ЕЭ) Международного стандарта эндотоксина. «Метод А. Качественный анализ» – является основным методом проведения анализа на соответствие показателю «Бактериальные эндотоксины»; является арбитражным. Проведение испытания: Стеклянная и пластиковая посуда, используемая для проведения ЛАЛ-теста, не должна содержать бактериальные эндотоксины и не должна оказывать влияния на ход реакции (депирогенизация достигается путём нагревания при Т2500С 30 мин). Вода для ЛАЛ-теста должна соответствовать требованиям к воде для инъекций и не должна содержать бактериальные эндотоксины в количествах, определяемых тесте. Чувствительность ЛАЛ-реактива выражена в единицах эндотоксина (ЕЭ/мл) и соответствует минимальной концентрации Международного стандарта эндотоксина, образующей плотный гель с данным реактивом. При проведении анализа может использоваться Контрольный стандарт эндотоксина (КСЭ) для подтверждения чувствительности ЛАЛ-реактива. Испытуемое лекарственное средство может содержать мешающие факторы, усиливающие или ингибирующие реакцию. Для обнаружения этих факторов сравнивают способность ЛАЛ-реактива реагировать с КСЭ (Контрольный стандарт эндотоксина) и с раствором лекарственного средства. Для устранения мешающих факторов можно использовать фильтрацию, нейтрализацию, диализ или температурную обработку. Указанные методы не должны влиять на концентрацию эндотоксина в лекарственном препарате. Если испытуемое лекарственное средство нельзя освободить от мешающих факторов, оно не может быть исследовано с помощью ЛАЛ-реактива. Это является недостатком данного метода. Положительная реакция характеризуется образованием плотного геля, который не разрушается при переворачивании пробирки на 180 0. При отрицательной реакции гель не образуется. Лекарственный препарат считают выдержавшим испытание на «Бактериальные эндотоксины», если в растворе А (опыт) и в растворе D (отрицательный контроль) реакция была отрицательная, а растворах В и С (положительные контроли) реакция была положительная. жүктеу/скачать 60,61 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|