Клиникалық зертханалық зерттеу әдістері пәнінен Іс-дағдылар стандарттары Мамандық
жүктеу/скачать 0,61 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- ІІ. Калибрлік кестені құру
- 1. Калибрлік кестемен коэфициентті к есептеңіз: к= С/*Е, Е = (Екал- Ек)
- АсАТ = Етәж.сын х к
- Қалыпты көрсеткіш
- Көмірсулар химиясы Көмірсулар алмасуы ПИРОЖҮЗІМ ҚЫШҚЫЛЫН АНЫҚТАУ Мақсаты
- Көрсетпесі: - дәрігердің көрсетпесі; Принципі
- Биоматериал
- СҮТ ҚЫШҚЫЛЫН ПАРАОКСИДОФЕНИЛ РЕАКЦИЯСЫ ӘДІСІМЕН АНЫҚТАУ Мақсаты: - сүт қышқылын нықтау әдісін меңгеру Көрсетпесі
7. Араластырыңыз, 20 минутқа бөлме температурасында (20-25гр)қалдырыңыз 8. Екі пробиркаға да 5 мл-дан 0,4 моль/л NаОН ертіндісін қоыңыз; 9.Араластырыңыз және 5-10 минуттан кейін бақылау ертіндісіне қарсы фотометрлеңіз, толқын ұзындығы 500-560 нм кювета қалыңдығы 1 см. ІІ. Калибрлік кестені құру: 1) 7 дана химиялық пробиркаларды алып номерлеңіз (1,2,3,4,5,6, және бақылау); 2) Калибраторларды құйыңыз 1-ші пробиркаға -0,05 мл, 2-шісіне- 0,10 мл, 3-шісіне- 0,15 мл, 4-шісіне- 0,20 мл, 5-шіге – 0,25 мл, 6-шысына – 0,30 мл 3) Дистилденген суды құйыңыз 1-ші пробиркаға 0,55 мл; 2-шісіне - 0,50 мл; 3-шісіне - 0,45 мл, 4-шісіне - 0,40 мл, 5-шісіне - 0,35 мл 6-сына - 0,30 мл Бақылау пробиркаға - 0,60 мл 4) Барлық пробиркаларға 0,5 мл-дан 2,4 ДНФГ ерітіндісін қосады
5. Пробирка ішіндегісін араластырыңыз және 20 минуттан соң (20-25◦С) 0,4 мл/л NаОН ертіндісін 5 мл-ден қоыңыз; 5-10 минуттан соң дистилденген суға қарсы фотометрлеңіз, толқын ұзындығы 500-560 нм., кювета қалыңдығы 1 см. 1. Калибрлік кестемен коэфициентті к есептеңіз: к= С/*Е, Е = (Екал- Ек), мұнда: Екал – калибрлік сынама экстинкциясы, Ек – бақылау экстинкциясы. С – АлАТ (активтілігі) каталитикалық концентрациясы калибрлік сынамада мкмоль/л немесе ммоль/л. 2. АсАТ(активтілігі) каталитикалық концентрациясы мкмоль/л немесе ммоль/л –де мына формуламен есептейді АсАТ = Етәж.сын х к, мұнда к – калибрлік кесте бойынша есептелген коэфициент, Етәж.сын – бақылауға қарсы өлшенген тәжірибе сынамасы экстинкциясы. Ескерту: Егер АсАТ белсенділігінде 3 ммоль/л = 0,834 мкмоль/л – ден жоғары болса қан сарысуын сұйылту керек. Белсенділікті есептеуде сұйылту дәрежесін ескеру керек, кейбір жағдайда сұйылтылған сарысуда сұйылту дәрежесімен АлАТ белсенділігі арасында пропорционалдық болмауы мүмкін. Қалыпты көрсеткіш: АсАТ – 0,1 – 0,68 ммоль/л немесе 0,028 – 0,19 мкмоль/л Клиникалық мағынасы: Аланинаминотрансфераза (АлАТ) – бауыр, жүрек скелет бұлшық еттерінің клеткаларының өңдеп шығатын ферменті. Аспарататаминотрансфераза (АсАТ) – жүрек, бауыр, скелет бұлшық еттерінің және эритроциттердің бөліп шығаратын ферменті. Трансаминазды тест аурудың диагнозын қоюға ғана емес, сондайақ дертті прогноздау және емнің әсерлігін бақылау үшін қойылады. 1. Жүрек инфарктінде қан сарысуында АсАТ мөлшері инфаркт болғаннан 3-4 сағаттан соң күрт көтеріліп кетеді (20-30 есе). Белсенділігінің максимумы 1-ші тәулік аяғында байқалады, ал 2-3 күннен кейін дерттің өтуі жақсарып, жасалып жатқан емнен жағдайы жақсарса сарысудағы трансаминаз деңгейі қалыптыға түседі. 2. Жедел инфекционды гепатитте АлАТ АсАТ-қа қарағанда жоғары болады. 3. АлАТ пен АсАТ – тың төмендеуі перидоксин (витамин В6 ) жетіспеушілігі, гемадиализ процедурасын қайталаған кезде, бүйрек жетіспеушілігінде байқалады. Көмірсулар химиясы Көмірсулар алмасуы ПИРОЖҮЗІМ ҚЫШҚЫЛЫН АНЫҚТАУ Мақсаты: - пирожүзім қышқылын анықтау әдісін меңгеру; Көрсетпесі: - дәрігердің көрсетпесі; Принципі: 2,4 – динитрофенилгидрозин мен кетоқышқылдар боялған гидрозондарды пайда етеді. Рессустар: 1) ыдыстар ( екі химиялық пробиркалар, 1 мл, 2мл пипеткалар) 2) Реактивтер: 1. НСІ, 2моль/л; 2. 2,4 – динитрофенилгидрозин ( ДНФГ); 3. Диэтилді эфир; 4. натрий карбонат (Nа2 СО3 ) Биоматериал: несеп Іс-әрекет алгоритмі: 1 химиялық пробирканы алыңыз; 1 мл 2,4ДНФ және 0,25 мл несеп қосыңыз; Араластырыңыз; 10 минуттан кейін 1,25 мл диэтилэфирін қосып араластырыңыз; эфирлі қабатын сорып алады және басқа пробиркаға салыңыз; теңдей мөлшерде натрий карбонат ерітіндісін қосыңыз; пробиркалар ішіндегісін араластырыңыз Нәтижесін бағалау: Оңтайлы сынамада бояу сарғыш түстен қызғыш-қоңыр түске дейін боялады. Қалыпты жағдайда: сынама теріс болуы керек, бояу пайда болмайды. Клиникалық мағынасы: Несепте ПЖҚ пайда болуы гипоксияда, бауырдың ауыр зақымдалуында (гепатит, бауыр циррозы), гликогенозда анықталады. СҮТ ҚЫШҚЫЛЫН ПАРАОКСИДОФЕНИЛ РЕАКЦИЯСЫ ӘДІСІМЕН АНЫҚТАУ Мақсаты: - сүт қышқылын нықтау әдісін меңгеру Көрсетпесі: - гипоксия диагностикасы Принципі: Құрамында күкірт, фосфор қышқылдары және мыс тұздары болған сүт қышқылынан сірке альдегиді пайда болады, ол параоксидафенилмен (С6Н5С6Н4ОН) әрекеттесіп күлгін түсті өнім береді. Реакция өте сезімтал, сондықтан зерттеудің жасалуы шарттарының барлығын толық және дәл орындау керек. Рессурстар: Савль сынамасымен тексерілген концентратты күкірт қышқылы. Оның сапасына анализді орындау тәуелді, кейде қышқыл сапасын, оны қыздыра отырып оған жылы күйінде сутек асқын тотығы қышқылын тамыза отырып жақсартуға болады. Қоспа: 3 г. мыс купоросы (СиSО4 х 5Н2О) және 9 мл ортофосфор қышқылы. Гомогенді ерітінді пайда болуы керек, оған бірқанша уақыт кетеді. Деметилформамидтегі 1,5% параоксидифинил (С6Н5С6Н4ОН) ерітіндісі. Параоксидифинилдің 1,5 мг 1 мл демитилформамидта ерітеді 5% үшхлорсірке қышқылы Центрифугалық пробиркалар, өлшемді колбалар, цилиндрлер, пипеткалар, штатив КФК Центрифуга жүктеу/скачать 0,61 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||