Методы исследования генома животных и человека Геном
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
жүктеу/скачать 64,78 Kb.
|
Methods of human genome research
- Бұл бет үшін навигация:
- Прямая ДНК-диагностика
- Косвенная ДНК-диагностика
| МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
В эту группу входят методы ДНК-диагностики. С их помощью можно изучать структуру участков ДНК-гена или участка хромосомы, диагностировать многие заболевания. Основа метода – научные данные о строении молекул ДНК и РНК, генах, закономерностях наследования признаков. В основе анализа ДНК лежат два момента: Последовательность аминокислот в ДНК каждого человека индивидуальна (кроме однояйцевых близнецов и клонов); Во всех соматических клетках организма ДНК совершенно одинакова. Прямая ДНК-диагностика Применяется, когда известен ген, ответственный за возникновение наследственного заболевания, и основные типы его мутаций. Это высокоточный метод (100%). Используется при таких заболеваниях, как муковисцидоз, фенилкетонурия, хорея Гентингтона и др. Один из методов ДНК-диагностики – ПЦР – полимеразная цепная реакция. Позволяет обнаружить и многократно копировать (амплифицировать) короткие участки ДНК. Метод как бы имитирует на определенном участке гена естественный процесс репликации ДНК. Для проведения реакции нужно точно знать нуклеотидную последовательность этого фрагмента ДНК. ПЦР включает в себя несколько этапов: Денатурация двойной спирали ДНК-матрицы при t 95°С. Гибридизация (отжиг) одноцепочечной ДНК-матрицы и праймеров при t 45-60°С. При этом праймеры распознают комплементарные участки ДНК. Образование новых цепей при t 65-72°С с участием ДНК-полимеразы, т.е. гибридизация. При этом количество исследуемого гена удваивается. Затем ДНК опять нагревают, и процесс повторяется снова. Происходит множественное копирование одноцепочечных молекул. Число таких циклов составляет от 25 до 40. Процесс идет в автоматическом режиме на специальных программируемых приборах. В дальнейшем исследуются конкретные особенности амплифицированного гена. Можно четко определить патологические участки гена. Косвенная ДНК-диагностика Используется для диагностики таких наследственных болезней, ген которых либо неизвестен, либо находится на определенном узком участке определенной хромосомы, но типичные патологические изменения для него еще не установлены. Фрагменты ДНК больного сравниваются с таковыми у его родственников. Методы эти трудоемки, требуют длительного времени, дорогостоящи. Для их проведения нужны несколько членов семьи из 2-3 поколений. Неприменимы для спонтанных случаев заболевания. Достоверность их ниже. Преимущество – возможность диагностировать практически все наследственные заболевания, вызванные изменением гена. жүктеу/скачать 64,78 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|