Микрофлора растительного лекарственного сырья
жүктеу/скачать 64,26 Kb.
|
ÐикÑоÑлоÑа ÑаÑÑиÑелÑного лекаÑÑÑвенного ÑÑÑÑÑ.
- Бұл бет үшін навигация:
- : лактозный бульон, среда №3 ;
- –среда Эндо, среды Гисса с углеводами; сальмонелл – висмут-сульфитный агар; синегнойной палочки – среда № 9
- 1:10, 1:100 и 1:1000.
| Питательные среды
Для определения ОМЧ (общего микробного числа) бактерий: МПА (мясо-пептонный агар); ОМЧ грибов – жидкая и плотная среда Сабуро (среда №2) Среды накопления (обогащения) для выявления энтеробактерий: лактозный бульон, среда №3; синегнойной палочки и золотистого стафилококка: среда №8 Элективные среды: для сальмонелл – тетратионатный бульон; для синегнойной палочки – цетримидный агар; Дифференциально-диагностические среды для идентификации: кишечной палочки и других энтеробактерий –среда Эндо, среды Гисса с углеводами; сальмонелл – висмут-сульфитный агар; синегнойной палочки – среда №9 (стимулирует продукцию пигмента – пиоцианина); золотистого стафилококка – желточно-солевой агар, цитратная плазма. Проведение испытания Для количественного определения микроорганизмов используют методы: 1.Чашечный агаровый метод 2.Метод мембранной фильтрации 3.Метод наиболее вероятностных чисел (НВЧ) Чашечный агаровый метод. Для количественного выявления бактерий образец в разведении 1:10 в количестве 1 мл вносят в 2 стерильные чашки Петри, заливают расплавленным и остуженным до 40-45 0С мясо-пептонным агаром (МПА) в объёме 15-20 мл и быстро перемешивают вращательными движениями. Для выявления грибов чашки заливают средой Сабуро. После застывания среды чашки помещают в термостат на 5 суток: МПА при Т350С, среду Сабуро – Т20-250С. После окончания сроков инкубации считают колонии, выросшие на поверхности питательных сред, находят среднее арифметическое и умножают на степень разведения образца. Полученный результат будет соответствовать количеству микроорганизмов в 1 г (мл) исследуемого ЛС. Метод мембранной фильтрации. Данный метод используют для количественного определения микроорганизмов в жидких, водорастворимых и жиросодержащих ЛС, растворимых в изопропилмиристате, обладающих или не обладающих антимикробным действием. Для посева используют мембранные фильтры с диаметром пор не более 0,45 мкм, способные эффективно задерживать микроорганизмы: *из нитрата целлюлозы – для водных, масляных и слабых спиртовых растворов; *из ацетата целлюлозы – для концентрированных спиртовых растворов, кислот, щелочей. Испытание проводят с использованием фильтрационной установки в асептических условиях. Фильтрационная установка и фильтры должны быть стерильны. Мембранную фильтрацию проводят с помощью вакуума или давления. Образец в разведении 1:10 в объёме 10 мл (что соответствует 1 г или 1 мл образца) наносят на фильтр. После фильтрации мембранный фильтр переносят на чашки с соответствующей средой: МПА и агаром Сабуро. Если исследуемый препарат обладает выраженным антимикробным действием или в его состав входит консервант, то фильтр отмывают от лекарственного препарата стерильным физиологическим раствором или специальными жидкостями, указанными в фармакопейной статье. После окончания сроков инкубации (5 суток) производят подсчёт колоний, выросших на фильтре, что будет соответствовать количеству микроорганизмов в 1 г (мл) исследуемого ЛС. Метод наиболее вероятных чисел (НВЧ). Данный метод является менее чувствительным и точным. Его используют, когда невозможно применить указанные выше методы. Исследуемый образец готовят в виде раствора, суспензии или эмульсии в разведениях: 1:10, 1:100 и 1:1000. Каждое разведение в объёме 1 мл (что соответствует 100 мг, 10 мг и 1 мг образца) вносят в 3 пробирки с жидкой питательной средой. Каждое разведение, таким образом, представляет ряд из 3-х пробирок. Среды с посевами инкубирую при Т350С в течение 5 суток. После окончания сроков инкубации в каждом ряду отмечают количество пробирок. В которых визуально отмечается рост микроорганизмов. Полученное трёхзначное число соответствует наиболее вероятному количеству микроорганизмов в 1г или 1 мл лекарственного средства (см. таблицу 2). жүктеу/скачать 64,26 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|