Нуржігіт Алтынбеков 1 Қазақстан республикасы денсаулық сақтау министрлігі
жүктеу/скачать 2,11 Mb. Pdf көрінісі
|
|
Нуржігіт Алтынбеков Тәжірибеде 0.5 мл қан сары суын 0.5 мл микробтық тест-культурамен (25000 микробтық торшалар) араластырады, ал бақылауда - 0.5 мл физиологиялық ерітіндіні 0.5 мл микробтық тест-культурамен араластырады. Қоспаларды термостатқа 37°С — 60 мин қояды. Уақыт ӛткен соң, Петри ыдысындағы қоректік орта бетіне 0.025 мл араластырған қоспадан бактериалді ілмекпен түсіреді, шпателмен қоректік орта бетіне біркелкі жаяды. 24 сағатқа 37°С термостатта инкубация жасайды. Қан сары суы белсенділігі (ҚССБ) формуламен есептейді: Нтәжірибе х 100 ҚССБ =100 Н бақылау Н — колония саны. Тапсырма 2. Биологиялық сұйыктықта лизоцим деңгейін анықтау. Лизоцим кӛздің жасында, сілекейде, қан сары суында, жұмыртқа белогында ж.т.б. кездеседі. Лизоцим кейбір патогенді микроорганизмдер ӛсуін тежейді: стафило-, стрепто-, менинго-, гонококктардың және дифтерия коринебактериялардың. Сонымен қатар, лизоцимге кӛптеген сапрофиттерде сезімтал болып келеді. Лизоцимнің биологиялық маңыздылығын ескере отырьш, оны биологиялық табиғаты бар антибиотик деп атауға болады және организмнің бейспецификалық гуморалді факторы. Осы себептен, лизоцим анықтауы аурудың дамуын, терапия нәтижесі және болжамын айқындайды. Биологиялық сұйықтықта лизоцим деңгейін анықтау принципі, олардың ең жоғарғы титрі тест – дақылы M.lysodeicticus берілген уақытта лизиске ұшырауы Ингредиенттер Пробиркалар 1 2 3 4 5 6 7 8 Физ.ертіндісі 2,4 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 Тексерілетін субстрат (сілекей, кӛз жасы т.б.) 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Дайындалатын ерітінділер 1 25 1 50 1 100 1 200 1 400 1 800 1 1600 - Тест - дақылы 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 37 0 С – 2 сағат термостатта инкубациялайды Қорытынды: егер микробтар лизиске ұшыраса, пробиркадағы ерітінді мӛлдір «+», ал лайланса «-» Лизоцим титрі – ең соңғы пробиркадағы (жоғары) сілекей ерітіндісі мӛлдір болса. 80 Тапсырма 3. Лейкоциттердің фагоцитарлық активілігін анықтау (демонстрация) Қан құрамындағы полиморфтыядролы лейкоциттер, моноциттер ӛз беткейлерінде микробтық тест-культураны ұстап, ӛзіне сіңіріп жоя алады, яғни фагоцитозға ұшыратады. Микробтық тест-культура ретінде саңырауқұлақтар, грам оң стафилококктар, грам теріс ішек таяқшасын алуға болады. Лейкоциттерің фагоцитарлық активтілігі, оның аяқталу фазасына дейін анықтау В.М.Берман және Е.М.Славская (1958) ұсынған классикалық әдісі немесе Б.АЧухловин және С.П.Иванов (1968) модификациясы бойынша жүргізуге болады. Бірінші әдісте тест-микроб ретінде S.aureus (Wood, 46) алынды, ал екінші модификациясында - Е.соіі штамм Ml7. Реакция жүргізу жолдары. 0.1 мл 3% натрий лимон қышқылына 0.2 мл науқас қанын қосады, араластырған соң оған 0.1 мл алтын түсті стафилококк немесе ішек таяқша ертінділері (24 сағат инкубацияланған таза дақылдан жасалған 2-миллиардты микробтық ертінді) қосылады. Барлығын жақсылап араластырып 37°С термостатқа 30 мин. кояды. Қоспаларды жақсылап араластырып бір тамшысынан шыны затына жұқа мазок дайындайды. Қалған қоспаны қайтадан 37°С термостатқа 90 мин. қояды. Инкубация ӛткен соң 120 минуттық мазок дайындайды. Мазоктарды (30 минуттық және 120 минуттық) фиксация жасаған соң, Романовский-Гимзе әдісі бойынша боялады және иммерсиялық микроскопия жасалынады. Микроскопия кезінде фагоцитозды бағалау критерийлері (инфекциялық процестің динамикасы бойынша демонстрациялық мазоктарды талдау)- 1. Активтілік - ФК (фагоцитарлық кӛрсеткіш) - 100 немесе 200 торша (нейтрофиддер немесе макрофаггар) ішінен фагоцитозға ұшыраған торшалардың (нейтрофилдер немесе макрофагтар) орташа %. 2. Интенсивтілігі - ФС (фагоцитарлық сан) - фагоциттеуші бір торша ішіндегі микробтар саны. Екі кӛрсеткіште 30 мин және 120 мин. инкубациядан соң бӛлек есептелінеді 3. Аяқталғандығы - фагоцитоздың толық аяқталғаны, %(ФТА) 4. ФСК (фагоцитарлық санның коэффициенті) . ФСК 5. НБИ (нейтрофилдердщ бактерицидтік индексі) НБИ = А - нейтрофил ішінде ӛлген микробтар саны, орташа саны; В — лейкоциітердің жалпы микробтарды сіңіру саны. Соң5ы кӛрсеткіш қор5аныс реакцияның нақты интенсивтілігін |