О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология
жүктеу/скачать 14,39 Mb. Pdf көрінісі
|
| Реакция Vi-гемагглютинации. Это наиболее чувствительная реакция для
выявления антител. Принцип реакции заключается в том, что эритроциты человека (I группы) или барана после специальной обработки могут адсорбировать на своей поверхности Vi-антиген и приобретают при этом способность агглютиниповаться соответствующими Vi-антителами. Эритроциты с адсорбированными на поверхности антигенами называют эритроцитарными диагностикумами. Для постановки реакции Vi-гемагглютинации берут: 1) сыворотку крови больного (1-2 мл); 2) эритроцитарный сальмонеллезный Vi- диагностикум; З) Vi-сыворотку; 4) О-сыворотку; 5) изотонический раствор натрия хлорида. Реакцию ставят в агглютинационных пробирках или в пластмассовых пластинах с лунками. Кровь у больного берут так же, как для реакции Видаля. Получают сыворотку. Из сыворотки готовят двукратные серийные разведения, начиная с 1:10 до 1:160. По 0,5 мл каждого разведения вносят в лунку и прибавляют по 0,25 мл эритроцитарного диагностикума. Реакцию ставят в объеме 0,75 мл. Контролем служат: 1) стандартная агглютинирующая монорецепторная сыворотка + диагностикум - реакция должна быть положительной до титра сыворотки; 2) диагностикум в изотоническом растворе натрия хлорида (контроль) - реакция должна быть отрицательной. Содержимое лунок тщательно перемешивают, ставят в термостат на 2 ч и оставляют при комнатной температуре до следующего дня (на 18-24 ч). Учет начинают с контроля. Реакцию оценивают в зависимости от степени агглютинации диагностикума. Результаты учитывают по четырехкрестной системе: ++++ эритроциты полностью агглютинированы - осадок на дне лунки в виде "зонтика"; +++ "зонтик" меньше, не все эритроциты агглютинировались; ++ "зонтик" маленький, на дне лунки имеется осадок из неагглютинированных эритроцитов; - реакция отрицательная; эритроциты не агглютинировались и осели на дно лунки в виде пуговки. Контрольные вопросы 1. В какой период заболевания ставят реакцию Видаля? 2. Какие ингредиенты необходимы для постановки реакции Видаля? 3. С какими диагностикумами ставят реакцию Видаля? 4. Какая из серологических реакций является самой чувствительной при диагностике тифопаратифозных инфекций? 5. Каким диагностикумом пользуются при постановке реакции Vi- гемагглютинации? 6. Какой сывороткой определяют наличие Vi-антигена у исследуемой культуры? 7. Какое значение имеет определение Vi-фаготипа? Задание Возьмите у преподавателя О- и Н-диагностикумы из сальмонелл тифа, паратифа А и паратифа В и сыворотку больного. Поставьте реакцию Видаля. жүктеу/скачать 14,39 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|