Ламинар-бокс; МБС-10 бинокулярлы лупасы;
микроскоп; стерильді
скальпельдер; инелер.
Жұмыстың орындалутәртібі:
1. Картоптың сау түйіндерін ағынды сумен жуады.
2. Түйіндерді залалсыздандырушы ерітінділермен (спирт,
хлоамин) өңдеп, дистильденген сумен жуады.
3. Түйнектің көздерін паренхимасымен бірге (1,5 х 1,5 см) кесіп
алып, өсіру және термотерапия жасау үшін кюветаға
отырғызады.
4. Өскіндерді термостатта 37'C температурада 1 сөтке
инкубациялайды.
5. Термотерапиядан кейін өскіндерді 6 %-тік хлорамин
6. ерітіндісінде 5 минут ұстайды.
Ламинар-боксте микроскоптың
астында
өскіндерден
апикальды
меристемаларын
бөліп,
пробиркалардағы қоректік
ортаға отырғызады.
7. Апикальды меристсмаларды өсіру №1 жұмыста сипатталған жолмен
жүргізіледі.
№ 4 жұмыс.
Картоптың апикальды меристемаларын өсіруде
химиотерапия әдісін қолдана отырып вируссыз материал алу
Қажетті материалдар мен аспаптар:
Картоп өскіндері.
Мурасиге және Скуг,
Уайт қоректік орталары; БАП; ИСҚ; РНК-
азаның 0,01н срітіндісі; 70 %-тік
этил спирті; 6%-тік хлорамин
ерітіндісі.
Зейтц сүзгісі; стерильді скальпельдер; инелер; пинцеттер.
Жұмыстың орындалу тәртібі;
1. РНК-аза ерітіндісін Зейтц сүзгісі арқылы өткізіп, 100 мл Мурасиге
және Скуг қоректік ортасына қосады. Қоспаны пробиркалардағы
алдын-ала
дайындалған, қатты стерильді Орталардың үстіне,
қалыңдығы 0,5 см болатындай етіп құяды.
2. Картоп өскіндерін 6 %-тік хлорамин ерітіндісінде 5 минут
стерильдейді.
3. Өскіндерді стерильді сумен
шайып Петри тостағаншысына
отырғызады.
4. Ламинар-боксте микроскоптың астында апикальды
меристемаларды кесіп алып, ферментсіз (бақылау) және
ферменті бар (тәжірибе) ортаға отырғызады.
5. Мерситемалар отыргызылған пробиркаларды арнайы болмеде
ұстайды.
6. Апикальды меристемаларды өсіру №1 жұмыста сипатталған
жолмен жүргізіледі.
7. Тәжірибе және бақылау нәтижелерін салыстырады.
Достарыңызбен бөлісу: