Оқулық Ә.Ә. Шортанбаев, С. В. Кожанова. Алматы, 2008. 2
Лейкоциттердiң миграциясын тежеуші серпiлiсi (ЛМТС)
жүктеу/скачать 9,99 Mb. Pdf көрінісі
|
| Лейкоциттердiң миграциясын тежеуші серпiлiсi (ЛМТС)
ЛМТС әр түрлi жұқпалы ауруларда, негiзiнен жасушаiшiлк бактериялармен зақымданғанда: туберкулез, бруцеллез, лепра; кандидоз және созылмалы вирусты жұқпаларда иммундық жауабын; сонымен қатар аллергиялық ауруларда аллергендерге сезiмталдығын анықтау үшiн табысты қолданады. Әдiстiң қағидасы. Эритроциттер қоспасы жоқ қан плазмасынан алынған лейкоциттер қоспасын, (50 мкл) 199-шi ортасымен (бақылауда) және индуцирлеген вариант – ФГА-мен бiр көлемде араластырады. ФГА концентрациясы 1 мл-де 10 мкг. Осы серпiлiстiң бiрнеше модификациясы бар. Иммунологиялық серпiлiске арналған планшетке, дуплетке немесе триплетке 10% бұзаудың эмбриондық белсенденген сарысу қосылған 199 ортасын құяды. Мөлшерi 7мм және диаметрi 1мм капиллярды ортасы бар лейкоциттер қоспасымен немесе ФГА- мен толтырады. Бiр ұшын арақатынасы 1:3 тең парафин және воск қоспасымен толтырады, екiншi жағын – планшеттiң ұясына түсiредi. Планшеттi қақпақпен жабады, 18-24 сағатқа 37 о C инкубациялайды. Капиллярды алып тастағаннан кейiн сұйықтықты лункаларда қайтадан суспензиялайды. Әр лункада лейкоциттердiң санын Горяев камерасымен есептейдi. ФГА-мен бақылау және сынақ үшiн орташа санын есептейдi. Миграция индексiн есептеу үшiн тәжiрибедегi жасушалардың концентарциясын бақылаудағы сондай концентрацияға бөледi. Қалыпты жағдайжа арақатынасы 0,3-0,5 тең. Капиллярлық әдiс. Бөлiнген лейкоциттермен бiр жағы ашық, ал екiншi жағы жабылған 2 капиллярды толтырады. Кейiн центрифугалайды және жасушалары жоқ тұнбаны алып тастайды. Содан соң бiр капиллярға ынталандыруды (ФГА) қосады және 24 сағат бойы 37 0 С инкубациялайды. Бақылау және тәжiрибе капиллярының ашық жағынан планшеттiң ұясына лейкоциттердiң миграциясы жүредi. Серпiлiстi бақылау және тәжiрибе ұяларындағы жасушалар концентарциясының арақатынасымен бағалайды. Қалыпты жағдайда арақатынасы 0,6-0,87 тең (миграция индексi). жүктеу/скачать 9,99 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|