Литература для студентов Учебная литература для студентов медицинских вузов и медицинских
жүктеу/скачать 31,79 Mb. Pdf көрінісі
|
Гистология Афанасьев 2004
| Клеточные гибриды.
При слиянии двух клеток различных типов образует ся гетерокарион — клетка с двумя ядрами. Для получения гетерокариона суспензию клеток обрабатывают полиэтиленгликолем или инактивирован ными вирусами для повреждения плазмолемм клеток, после чего клетки способны к слиянию. Например, неактивное ядро эритроцита курицы ста новится активным (синтез РНК, репликация ДНК) при слиянии клеток и переносе в цитоплазму другой клетки, растущей в культуре ткани. Гетерока рион способен к митозу, в результате чего образуется гибридная клетка. Оболочки ядер у гетерокариона разрушаются, и их хромосомы объединяют ся в одном большом ядре. Клонирование гибридных клеток приводит к образованию гибридных клеточных линий, которые используются для изучения генома. Например, в гибридной клеточной линии ’’мышь—человек” установлена роль хромосомы 11 человека в синтезе инсулина. Гибридомы. Клеточные линии гибридом используют для получения мо ноклональных антител. Антитела вырабатываются плазмоцитами, которые образуются из В-лимфоцитов при иммунизации. Определенный вид антител получают при иммунизации мышей конкретными антигенами. Если клони ровать такие иммунизированные лимфоциты, то можно получить большое количество однородных антител. Однако время жизни В-лимфоцитов в 20 культуре ограничено. Поэтому производят их слияние с "бессмертными" опухолевыми клетками (В-лимфомы). В результате образуются гибридомы (гиб/шд-клетка с геномом от двух разных клеток; ома —■ окончание в назва ниях опухолей). Такие гибридомы способны размножаться длительно в культуре и синтезировать антитела определенного вида. Каждый клон гиб ридомы является источником моноклональных антител. Все молекулы ан тител данного вида обладают одинаковой специфичностью связывания ан тигенов. Можно получать моноклональные антитела против любого белка, содержащегося в клетке, и использовать их для установления локализации белков в клетке, а также для выделения белка из смеси (очистка белков), что позволяет исследовать структуру и функцию белков. Моноклональные антитела применяют также в технологии клонирования генов. Антитела можно использовать для изучения функции различных моле кул, вводя их через плазмолемму непосредственно в цитоплазму клеток тон кой стеклянной пипеткой. Например, введение антител к миозину в цито плазму оплодотворенной яйцеклетки морского ежа останавливает разделе ние цитоплазмы. жүктеу/скачать 31,79 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|