Поступило в редакцию
жүктеу/скачать 0,66 Mb. Pdf көрінісі
|
| Обсуждение результатов
Проведено сравнительное исследование извлечения экстрактивных веществ из растительного сырья Tamarix hispida Willd. методом мацерации и с применением ультразвукового воздействия, с учетом различ- ных факторов экстракции, которые влияют на эффективность протекания процесса. Учитывая, что в иссле- дуемом растительном образце превалируют различные полифенольные соединения (гидролизуемые ду- бильные вещества, гликозидированные, сульфатные формы флавоноидов, фенолокислоты, углеводы и др.), для экстракции выбрали 10%-ный этиловый спирт. У ЛЬТРАЗВУКОВОЕ ЭКСТРАГИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ … 285 Для определения оптимального объема растворителя при постоянстве массы, времени и однократной экстракции изменяли объем растворителя от 4- до 8-кратного его избытка. Из полученных эксперименталь- ных данных следует, что оптимальным соотношением сырья и растворителя с максимальным выходом суб- станции является 1 : 6. Время экстракции отработано при постоянстве всех других параметров (масса, объем, число экстрак- ций), которое варьировалось от 6 до 96 ч. Учитывая полученные данные, использовали 48-часовое время экстракции. Оптимальная температура – 20–25 °С, поскольку при ее увеличении наблюдается тенденция гидролиза действующих веществ, что является нежелательным процессом при их извлечении. Мацерация проведена дважды, так как именно 2-кратность, как показал эксперимент, способствует максимальному из- влечению комплекса биологически активных веществ. На рисунках 1–3 приведены данные по оптималь- ному способу получения субстанции из Tamarix hispida Willd. с учетом вышеописанных параметров экс- тракции методом мацерации. Таким образом, при извлечении из сырья 10%-ным водно-этиловым спиртом в соотношении 1 : 6 (сырье-экстрагент), времени экстракции 48 ч при комнатной температуре выход экс- трактивных веществ составляет 8.67%. Для сравнительного исследования выхода компонентов использовали ультразвуковое воздействие. Экстракцию проводили при разных частотах ультразвукового колебания, времени и температуры. Продол- жительность воздействия ультразвуком зависит от величины частиц экстрагируемого сырья, например, ча- стицы размером 0.5 мм рекомендуется обрабатывать не более 15–30 мин; 1 мм – не более 60 мин; 2 мм – не более 120 мин. Обычно не рекомендуется проводить слишком длительную ультразвуковую обработку сы- рья, так как может повыситься мутность экстракта из-за сопутствующего процесса диспергирования. Ис- ходя из вышесказанного, для экстракции использовали высушенное растительное сырье, измельченное до размера частиц 1 мм. Для подбора оптимальных условий экстрагирования в качестве экстрагента использовали 10%-ный этиловый спирт при постоянстве времени экстракции и частоте ультразвука. Экстракция проведена при двух частотах ультразвука, 20 и 35 кГц соответственно. Температуру варьировали от 25 до 40 °С, при этом наблюдали незначительное изменение выхода экстрактивных веществ. Результаты ультразвуковой экстракции компонентов из Tamarix hispida Willd. приведены на рисунках 4 и 5. Из данных следует, что для выделения экстрактивных веществ оптимальным условием является время 25 мин при частоте 35 кГц. Для интенсифика- ции процесса экстракции ультразвуковую обработку проводили при перемешивании. Рис. 1. Выход экстрактивных веществ при соотношении сырье-реагент 1 : 4 (метод мацерации) Рис. 2. Выход экстрактивных веществ при соотношении сырье-реагент 1 : 6 (метод мацерации) Рис. 3. Выход экстрактивных веществ при соотношении сырье-реагент 1 : 8 (метод мацерации) Ш.Н. Ж УМАГАЛИЕВА , А. А МАНЖОЛҚЫЗЫ , Н.А. С УЛТАНОВА , Ж.А. А БИЛОВ 286 Рис. 4. Выход экстрактивных веществ с частотой ультразвука 20 кГц Рис. 5. Выход экстрактивных веществ с частотой ультразвука 35 кГц Таким образом, выявлены оптимальные условия выделения экстрактивных веществ из Tamarix his- pida Willd.: 10%-ный этиловый спирт в соотношении сырье-экстрагент (1 : 6) в течение 25 мин при комнатной температуре с частотой ультразвука 35 кГц. При этих условиях наблюдалось максимальное извлечение экстрактивных веществ до 37.34%. Сравнительные результаты свидетельствуют о том, что вы- ход экстрактивных веществ из Tamarix hispida Willd. увеличивается в 3–4 раза при мощности ультразвука от 20 до 35 кГц, при этом значительно сокращается время от 48 ч до 30 мин. Полученный экстракт, условно названный ТН-10, после экстрагирования фильтровали, концентрировали на роторном испарителе до сухого остатка. Субстанция представляет собой кристаллический темно-коричневый порошок с приятным специфическим вкусом. Методами БХ и ТСХ с использованием различных систем растворителей (I–IV) и специфических проявителей выявили, что мажорными компонентами субстанции являются гидролизуемые дубильные ве- щества. Содержание гидролизуемых дубильных веществ в субстанциях, полученных ультразвуком и мацера- цией, составляет 10 и 8% соответственно, которое определено методом перманганатометрии 19. В УФ-спектре (рис. 6) субстанции при различных концентрациях наблюдали появление пиков в области 270 нм, что соответствует области поглощения гидролизуемых дубильных веществ, содержащих остатки галловой кислоты и ее производных 21. Данные УФ-спектрометрии и появление характерной полосы в дальнейшем может быть использовано для количественного определения экстракта при разработке пролонгированных полимерных форм. Нами начаты работы по получению мягких лекарственных форм на основе полученной субстанции ТН-10 с бентонитовой глиной и ее композициями [22, 23]. Рис. 6. УФ-спектр водного раствора ТН-10 при концентрациях 0.7% (1), 0.5% (2), 0.3% (3), 0.1% (4) У ЛЬТРАЗВУКОВОЕ ЭКСТРАГИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ … 287 Полученную субстанцию исследовали на антидиабетическую активность, которая проводилась эн- зимным методом (in vitro) с использованием фермента РТР-1В. Данный фермент подавляет фосфорилиро- вание тирозина в инсулиновых рецепторах и является терапевтической мишенью при сахарном диабете 2- го типа. Для оценки антидиабетической активности определяли среднюю концентрацию ингибирования (ИК 50 ). Полученная растительная субстанция показала умеренный антидиабетический эффект, подавляя ак- тивность фермента при ИК 50 =3.94±0.14 мкг/мл при сравнении со стандартом (1.46±0.40 мкг/мл). Выводы Исходя из полученных результатов, можно сделать следующие выводы: 1) увеличивается выход компонентов из растительного сырья в 3–4 раза и значительно сокращается время экстракции при излучаемой мощности ультразвука от 20 до 35 кГц; 2) на основании данных хроматографии и УФ-спектрометрии установили, что мажорными экстрак- тивными веществами субстанции являются гидролизуемые дубильные вещества, содержащие остатки галловой кислоты и ее производных; 3) выявлено, что полученная субстанция проявляет антидиабетическую активность в эксперименте (in vitro) с использованием фермента РТР-1В. жүктеу/скачать 0,66 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|