У
ЛЬТРАЗВУКОВОЕ ЭКСТРАГИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
…
285
Для определения оптимального объема растворителя при постоянстве массы, времени и однократной
экстракции изменяли объем растворителя от 4- до 8-кратного его избытка. Из полученных эксперименталь-
ных данных следует, что оптимальным соотношением сырья и растворителя с максимальным выходом суб-
станции является 1 : 6.
Время экстракции отработано при постоянстве всех других параметров (масса, объем, число экстрак-
ций), которое варьировалось от 6 до 96 ч. Учитывая полученные данные, использовали 48-часовое время
экстракции. Оптимальная температура – 20–25 °С, поскольку при ее увеличении наблюдается тенденция
гидролиза действующих веществ, что является нежелательным процессом при их извлечении. Мацерация
проведена дважды, так как именно 2-кратность, как показал эксперимент, способствует максимальному из-
влечению комплекса биологически активных веществ. На рисунках 1–3 приведены данные по оптималь-
ному
способу получения субстанции из Tamarix hispida Willd. с учетом вышеописанных параметров экс-
тракции методом мацерации. Таким образом, при извлечении из сырья 10%-ным водно-этиловым спиртом
в соотношении 1 : 6 (сырье-экстрагент), времени экстракции 48 ч при комнатной температуре выход экс-
трактивных веществ составляет 8.67%.
Для сравнительного исследования выхода компонентов использовали ультразвуковое воздействие.
Экстракцию проводили при разных частотах ультразвукового колебания, времени и температуры. Продол-
жительность воздействия ультразвуком зависит от величины частиц экстрагируемого сырья, например, ча-
стицы размером 0.5 мм рекомендуется обрабатывать не более 15–30 мин; 1 мм – не более 60 мин; 2 мм – не
более 120 мин. Обычно не рекомендуется проводить слишком длительную ультразвуковую обработку сы-
рья, так как может повыситься мутность экстракта из-за сопутствующего процесса диспергирования. Ис-
ходя из вышесказанного, для экстракции использовали высушенное растительное сырье, измельченное до
размера частиц 1 мм.
Для подбора оптимальных условий экстрагирования в
качестве экстрагента использовали 10%-ный
этиловый спирт при постоянстве времени экстракции и частоте ультразвука. Экстракция проведена при двух
частотах ультразвука, 20 и 35 кГц соответственно. Температуру варьировали от 25 до 40 °С, при этом
наблюдали незначительное изменение выхода экстрактивных веществ. Результаты ультразвуковой экстракции
компонентов из
Tamarix hispida Willd.
приведены на рисунках 4 и 5. Из данных следует, что для выделения
экстрактивных веществ оптимальным условием является время 25 мин при частоте 35 кГц. Для интенсифика-
ции процесса экстракции ультразвуковую обработку проводили при перемешивании.
Рис. 1. Выход экстрактивных веществ при
соотношении сырье-реагент 1 : 4 (метод
мацерации)
Рис. 2. Выход экстрактивных веществ при
соотношении сырье-реагент 1 : 6 (метод
мацерации)
Рис. 3. Выход экстрактивных веществ при
соотношении сырье-реагент 1 : 8 (метод
мацерации)
Ш.Н.
Ж
УМАГАЛИЕВА
,
А.
А
МАНЖОЛҚЫЗЫ
,
Н.А.
С
УЛТАНОВА
,
Ж.А.
А
БИЛОВ
286
Рис. 4. Выход экстрактивных веществ с частотой
ультразвука 20 кГц
Рис. 5. Выход экстрактивных веществ с частотой
ультразвука 35 кГц
Таким образом, выявлены оптимальные условия выделения экстрактивных веществ из
Tamarix his-
pida Willd
.: 10%-ный этиловый спирт в
соотношении сырье-экстрагент (1 : 6) в течение 25 мин при
комнатной температуре с частотой ультразвука 35 кГц. При этих условиях наблюдалось максимальное
извлечение экстрактивных веществ до 37.34%. Сравнительные результаты свидетельствуют о том, что вы-
ход экстрактивных веществ из
Tamarix hispida Willd. увеличивается в 3–4 раза при мощности ультразвука
от 20 до 35 кГц, при этом значительно сокращается время от 48 ч до 30 мин.
Полученный экстракт, условно названный ТН-10, после экстрагирования фильтровали,
концентрировали на роторном испарителе до сухого остатка. Субстанция представляет собой
кристаллический темно-коричневый порошок с приятным специфическим вкусом.
Методами БХ и ТСХ с использованием различных систем растворителей (I–IV) и специфических
проявителей выявили, что мажорными компонентами субстанции являются гидролизуемые дубильные ве-
щества.
Содержание гидролизуемых дубильных веществ в субстанциях, полученных ультразвуком и мацера-
цией, составляет 10 и 8% соответственно, которое определено методом перманганатометрии 19.
В УФ-спектре (рис. 6) субстанции при различных концентрациях наблюдали появление пиков в
области 270 нм, что соответствует области поглощения гидролизуемых дубильных веществ, содержащих
остатки галловой кислоты и ее производных 21. Данные УФ-спектрометрии и появление характерной
полосы в дальнейшем может быть использовано для количественного определения экстракта при разработке
пролонгированных полимерных форм. Нами начаты работы по получению мягких лекарственных форм на
основе полученной субстанции ТН-10 с бентонитовой глиной и ее композициями [22, 23].
Рис. 6. УФ-спектр водного раствора ТН-10 при
концентрациях 0.7% (1), 0.5% (2), 0.3% (3),
0.1% (4)
У
ЛЬТРАЗВУКОВОЕ ЭКСТРАГИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
…
287
Полученную субстанцию исследовали на антидиабетическую активность, которая проводилась эн-
зимным методом (
in vitro) с использованием фермента РТР-1В. Данный фермент подавляет фосфорилиро-
вание тирозина в инсулиновых рецепторах и является терапевтической мишенью при сахарном диабете 2-
го типа. Для оценки антидиабетической активности определяли среднюю концентрацию ингибирования
(ИК
50
). Полученная растительная субстанция показала умеренный антидиабетический эффект, подавляя ак-
тивность фермента при ИК
50
=3.94±0.14 мкг/мл при сравнении со стандартом (1.46±0.40 мкг/мл).
Выводы
Исходя из полученных результатов, можно сделать следующие выводы:
1) увеличивается выход компонентов из растительного сырья в 3–4 раза и значительно сокращается
время экстракции при излучаемой мощности ультразвука от 20 до 35 кГц;
2) на основании данных хроматографии и УФ-спектрометрии установили, что мажорными экстрак-
тивными веществами субстанции являются гидролизуемые дубильные вещества, содержащие остатки
галловой кислоты и ее производных;
3) выявлено, что полученная субстанция проявляет антидиабетическую активность в эксперименте
(
in vitro) с использованием фермента РТР-1В.
Достарыңызбен бөлісу: